【doc】饲料添加氧化油脂对鲤体内脂质过氧化及血液指标的影响

【doc】饲料添加氧化油脂对鲤体内脂质过氧化及血液指标的影响 饲料添加氧化油脂对鲤体内脂质过氧化及 血液指标的影响 一 96 第4卷第1期中国水产科学. 1997年3月JOURNALOFFISHERYSCIENCESOFCHINA V0l4.No.1 Mar..1997 ,}j 饲料添加氧化油脂对鲤体内脂质过氧化 及血液指标的影响 EFFECTSOFADDOXIDATIVEOILINDIETONLIPIDPEROXIDATION ANDHEMATOLOGICALVALUESFORCOMMONCARPS 美键词 . 墨丝塑堕:霉一墼脂厦,坐堑拯 KEYWORI~Oxidativeoil,Carp,Lipidperoxides,Hematologicalvalues 由于饲料脂质的氧化酸败而引起的养殖鱼类病害时有发生,给水产养殖业造成很大损失,如鲤瘦背 病t鲴鱼,蛳鱼黄疽病等.病理学研究发现,病鱼有溶血性贫血症状,组织中的高度不饱和脂肪酸含量下 降t肝,脾,肾中有大量的血铁黄索沉积.而有关摄人氧化酸败脂质对鱼类体内脂质过氧化及其产物积累 的影响研究报道甚少.一些实验动物研究表明,体内过氧化脂质可造成细胞膜损伤,膜内酶和蛋白质变 性,机体代谢异常,致使发生多种疾病J.因此体内过氧化脂质是机体发病的重要诱因.本文报道饲料添 加大豆油脂的不同氧化酸败度对鲤体内过氧化脂质积累及血液指标的影响,以探讨代谢过程中过氧化脂 质的积累规律,为科学预防养殖鱼类的有关疾病提供科学依据. 1材料与方法 1.1实验材料 实验用当年鲤平均体重29.58?4.4g,体长10.6?1.8cm,取自黑龙江水产研究所松浦试验场. 试剂脂质过氧化物标准品四己氧基丙烷(1,1,3,3-tetraerhorypropane)(瑞士产),十二烷基硫酸钠 'sDs)(日本产),硫代巴比妥酸(TBA)(上海试剂二厂).氧化酸败油脂系采用新鲜大豆油脚,放置在室外, 最高气温28,30?制得. 1.2试验方法饲料油脂过氧化值测定采用碘量法"】. 血清和肝组织过氧化脂质含量测定采用TBA法J.取血清0.2ml加0.IMHCL2ml混匀后加人 0.6%TBAlml,混匀置沸水浴30min,冷却后以正丁薛4ml振摇抽提,离心后取上清比色(532nm);另取肝 匀浆0.2ml加8%SDS0.2ml,置室温20min后加01MHC12ml和0.6%TBAIml,置沸水浴40min.以下 方法同血清.以四己氧基丙烷为标准计算含量,以每mI或每g组织湿重的nmol数表示. 收稿日期:1996—0828 CJ ) ? 1期刘伟等:饲料添加氧化油脂对鲤体内脂质过氧化及血液指标的影响95 血液三项指标测定方法:血红蛋白一碱化法.压积一微量法.红细胞致一血细胞计数板. 数据处理采用两个小样本间T检验. 四种试验饲料(表1)的过氧化值(%)分别是0.13(1fit).0.30(2fit).0.50(3组),1.09(4glt).用90% 基础饲料(新鲜原料)和10%大豆油脂(新鲜豆油与氧化酸败油脂调配)制成,放一 20"C冰箱中保存备用. 裹1试验饲料组成与营养成分分析f%) Table1Compositionoftheexperimentaldletforcarps(%) 组份 Ingredie 鱼粉豆饼麦麸玉米面维生素矿物盐大豆油唐 Fish?啪lsoybe帅cakewhea出r曲c—m氍IvI【_啪M旧啪s0y.oiI 粗蛋白粗脂肪灰份 90%10% CradeprotCrudelatCrudeash %23.54015100.511033.513.77.4 每Kg饲料古 VA:800OIU.VD:1600IU.VE:50rag.VBl:Smg.V:20mg.V:5rng~VC:100rag.氯化胆 碱:700rag.泛酸 钙:40mg,烟酸:10Drag.肌 醇:50mc,C~(HPO?)2'H20:75.08g.MgSO4?7H20:13.2g.NazHPO4:8.72g,拧檬酸 羲:2.5岛zn. s0|'7H20:0.3g.l2'6H:o:10mg.MnSO~?O:80mg.KI:15rag.CuSO.:10mg. Co.t~ined:viltaminA:8000IU.vitaminD160OlU.唧a:150n.thiamine:5mb0f【n:20Ilg,pyn— doxi~ehy~Lx.ehloride:5mg.c且 力:100mg,cholinechloride:700mg,eatciumpantothetmte{40rag.rfi~ofinanude}100rag.i . nosltiol:5Omg,Ca(FIPO~)2'HzO:75.08g.MgSO~'7H2o:13.2g,Na~HPO4:872g.ivancitr ate:2.5gZnSO~?7H2O:03g, C~CI2'6H2o:10Ilg.MnSO~'O80rag.Kh15rag.CuSO.:lOmginperkgofdiet.' 按4×2随机将实验鱼分组.每组2o尾.放人圆形水族箱(200L)q~.日投喂试验饲料2-3次.占体重2-3%.实 验水温20-23"C.实验7周定期测定鱼体生长(相对生长=一WdWo).实验结束时全部受试鱼尾部采血,分别 用于制备血清和血液指标测定;部分散解剖观察并取出肝胰脏(以下称肝或肝组织).匀浆,立即分析. 2培果 2.1?直种体内过氧化脂质吉?与积? 鲤鱼种血清,肝组织过氧化脂质含量的变化.随饲料氧化酸败油脂古量的增加而增加(表2)与 0.13%~I比较.血清,肝TBA值在舔加油脂过氧化值0.5%时明显上升(P<0.05). 增至1.09%时血清 TBA值升高显着(P<0.叭).但肝组织的TBA值增加不明显 裹2实验7周各组耀钱种血清,肝过氧化朦质吉-(TBA值) Table2TBAvaluesins~rii11oandliverofcroonearigs蜘differentTBAdletfor49days 组别样品敷lTBA值(nvalues) GroupsNo-l血清Serum(nmol/m1)肝Liv(nmoL/g) 10 10 10 10 2.28?0.74 3.05?0.69 3.94?0.50 5.78?1.12'' 1330?377 1418?324 1846?427 1945?345 *P<0.05**P<001 2.2实验量血液指标豆生长的舅定结果. 试验鲤血液三项指标无明显贫血症状(表3)与0.13%组比较,饲料过氧化值在0.3%时,全血红血球数,血 红蛋白古量有升高现象;在0.5%以上又呈下降趋势.血样溶血现象逐渐增加.实验中期(20天)以后.各组实验 鱼出现生长差异.3.4组可见眼球凹陷.体黑等瘦背病症状;解剖兰色. 中国水产科学4卷 表3实验7周鲤鱼种血液【RBC,m,Ht)指标检验结果 l'abl~3R~uIt~inhematologicalvalues【RBC,Hb,Ht)oftestcarpsfor49days 初始值(s?nv~lue)RBC:14555?4769,Hb:5.5?2.79.Ht:3743121 3讨论 3.1饲料氧化酸败脂质与鱼体内脂质过氧化' 试验结果表明,鲤鱼种摄^氧化酸败大豆油脂导致鱼体内过氧化脂质含量增加.明显加速了体内脂质 肝过氧化脂质积累;当POV值由0.13%至1.09%时血清中的积累显过氧化和血清, 着增加(达2倍多),证 实了体内抗氧化能力改变与饲料脂质氧化酸败度明显相关.这种外源氧化酸败脂质对鱼体内脂质过氧化 作用与用褐变鱼粉喂养蛳鱼30天引起血浆,肝过氧化脂质升高结果相.实验动物研究表明,对小鼠 连续(21天)投喂过氧化玉米油可诱使体内过氧化脂质升高…,而这种增加与一定生理状况下.机体代谢过 程产生的自由基引起的体内(如生物膜)高度不饱和脂肪酸氧化反应机理是否相同,还不清楚.已知.动物 的抗氧化酶类主要存在于肝和红细胞中,是机体重要的抗氧化肪御系统,如果该组织脂质过氧化加重,说 明自身抗氧化括性受到干扰,将对整个机体过氧化脂质的代谢和自由基的清除产生直接影响.可见血清, 肝LPO含量变化是反应机体脂质过氧化和抗氧化能力的敏感性指标,肝,血清过氧化脂质对鱼体其它组 织的影响,还待深入研究. 3.2过氧化脂质积累与鱼体发病的关系 本实验发现.饲料脂质过氧化程度直接影响体内过氧化脂质的积累水平.舔加油脂过氧化值在0.50 以上时已经对体内抗氧化系统产生明显影响.致使有害的过氧化脂质积累,发生了病理变化,实验鱼虽未 发生贫血症状,但却产生溶血现象,血液指标也有不同程度的改变,可能还与鱼类本身的生理状况和持续 作用时间有关.众所周知,饲料脂肪变质可导致鱼类生长缓慢,患病,甚至死亡.越盐棱介(1994)发现,当 对虾饲料蔼加油脂过氧化值达13mEq/kg(0.16%)时,幼虾生长发育受到影响;鲤在饲料过氧化值为 150mEq/kg(1.9%)时发生瘦背病;鲷类在食过氧化值lOOmEq/kg生铒时即可能致 .近来病理研究发 死0】 现,一些炎症疾病如鲤鳔炎病等与体内过氧化脂质,自由基产生有关..因此,需要逐步揭示饲料不同含 量有害脂质在机体内代谢,积累和致病特性. 参考文献 l钱怕初等,1989.蜂花粉对小鼠体内外脂质过氧化的影响.营养.11(4):355--358 2于守洋等,1989c营养与食品卫生监督检验方法指南.286--288.人民卫生出版社 3洪平.1995影响水产饲料品质之非配力因素一鱼虾营养研究进展.379—39O.中山大学出版社. 4关屋朝裕等,1994c7IJ组织中Y)2一千,,三,-酸值#37工/.含量I=及中饲料鱼粉品质影 响日水志,60(4):505--508, 5越盐梭介等,1994工lZ-及}i寸饲料添加油脂酸化强度H水志,60(4);561--566 6Nemc~kJVE.1993Roleotfreerdbinswimbladderinflammationofcarp.JFishDis.16(2):1 31--136 7Pear~JnMDChinabutS-1994Jaundicedisuseinthefarmedcatfishhybrid,C/ariasmao'loxephalus{Gunther)×C ga,'qepinus(Burchel[)inThaihmd.JFishDis.17(4):325—336 l