徕卡病理培训

徕卡病理培训 Leica Bio-systems Leica Bio-systems 产品详解 接触客户，了解意向时需要了解的信息: ， 处理什么样本(组织) 1 2， 切片厚度要求 ， 组织大小 3 4， 后期进行什么研究，包括:如何染色，用什么显微镜观察 基本配置: 1， 切片机，冰冻切片机一次性刀片(需要耗材) or 钢刀(需要磨刀机) 2， 轮转切片机是否带精准定位系统(即红色0刻度指示)，夹包埋盒用通用样本 夹，夹蜡块用 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 样本夹，注意:RM2016不可配通用样本夹 3， 冰冻切片机单双压缩机，是否带抽吸系统，是否电动切片 4， 脱水机一次性组织处理量，全封闭半封闭 5， 包埋机是分体，一体机，或单独冷台(-15?)或单独熔蜡器 6， 染色盖片机，是否带烤箱(0，2，4个选配) 7， 打号机是打包埋盒(IP C)还是打玻片(IP S) 1 Leica Bio-systems 招标讲解 一 公司简介 Leica公司成立于1847年，经过多年合并重组成为一家专门致力于光学和组织学产品研发及生产的综合性跨国集团。 Leica显微镜公司是全球最具规模的显微镜及样品制备生产厂商，产品应用遍及生命科学、组织学、工业材料学等各方面。 Leica组织学产品主要应用于医院的病理科，包括了脱水、包埋、切片、染色、封片及镜下观察诊断的系列产品。 目前Leica公司在北京、上海、成都、广州、香港等地设置了办事处及联营维修站，外高桥保税库，以便为国内用户提供全方位服务。 上海全外资工厂。 二 产品简介 三 售后服务，市场占有率 1 只有Leica是厂家进入中国市场，其他进口品牌全部是中国总代形式，不可靠，技术支持力量不够， Leica工程师及产品经理每年都去德国参加培训，并把客户的一手信息及时反馈给工厂，以便提供 更好的产品给用户。 2 稳定的用户群验证了产品，也验证了售后服务，举例说明性能稳定。 3 实行两级售后服务体系，各地区设总代理，为客户提供及时全面的售后服务。每年提供机会让总代 的工程师去上海参加培训，开通800-820-8932和400-820-8932免费服务热线。 4 型号没有改变是因为不用再更新注册证，实际上是在不断更新的。大的功能上大家不会有太大差别， 关键在于工作细节的设计和考虑上，人性化的设计使工作更舒适，体现真正的实力。 5 虽然做的很多，但还希望做的更好，尽全力为客户提供最适合用户的产品，最好的产品，而不是一 味追求最便宜的价格。 6 从市场占有率分析竞争对手的售后服务。 绝对的市场占有率，病理及相关科研 技术先进，可靠，符合要求，准确性高 方便学术交流，用户基础广泛 在本地区树立窗口形象，提供最好的品质和服务 2 Leica Bio-systems RM22.. Serial(转轮切片机) 一 RM22..概述 高品质切片是病理诊断的保障 1 一体化机身，方便拆卸的磁力废物槽，固定好，便于清洁，减少由于清洁造成的切片质量问题 2 边缘符合人体工程学设计，粗修轮比其他产品高约近80MM，减少技术人员的工作疲劳度 3 专利的力补偿系统，用弹簧配重代替传统的重块配重，手轮极其平滑，操作轻松，以达到最佳的切片 效果 4 进样系统优秀，精度高是核心技术，德国的钢材和机械，可以保证内部机芯整体热胀冷缩 5 0位指示的精准样本定位系统，通过红线标示可以准确的在X/Y轴上8?定位，此功能根据经费可选， 不带定位、带定位(区别在于只是无指示)、带精准定位，技术员1/3时间切片，2/3时间用来对刀， 此系统可以减少无效工作时间，提高效率，利于临床选择最佳切片角度 6 刀架侧向移动调节，无需移动刀片，预设了三个位置，左、中、右，便于耗材的高效利用，不影响切 片质量，而其他产品只能手动推动刀片，打开压力板再压上会增加锁杆弹簧的损耗，且夹不紧会影响 切片质量 7 刀架可调节切割角度，一次性刀片需要角度小些，钢刀需要角度大些 8 样品头的回缩功能，下去再上升时回缩，保护组织，再切时再前进 9 增加了刀架护手(Knife Guard)功能，并可以推出刀片，因为压力板增大了不好推出刀片 10 压力板覆盖全部刀片，不易伤手 11 专用工具的固定比手动固定更稳定 12 根据应用选配广泛的刀具、刀架和样本夹，分通用样本夹(夹包埋盒)和标准样本夹(夹蜡块)，标准 样本夹分55×60和40×40等，还有可以夹超大样本的，单手操作的通用样本夹 13 存放盘方便工具随时取用，还可以放置冷盘或存放蜡块，体现设计的人性化 14 所有RM22..产品均可选配体视镜，放大小样品 二 RM22..分述 适合免疫组化，分子病理， 1 RM2235切片范围:1,60µm RM2245/RM2255切片范围:0.5,100µm RM2265切片范围:0.25,100µm(半薄切片)可以切到此精度，但实际病理科石蜡通常切到4µm 2 RM2235粗进轮手动操作，所有RM22..回缩功能均可关闭 RM2245/RM2255/RM2265步进马达进样(及切片)，保证了切片的匀速操作，控制精准 3 RM2245进样分两档，SECTION调节切片厚度，TRIM调节修块厚度，切片模式分传统手轮和ROCKING模 式，开这ROCKING功能保证无论怎么切都能保持回缩功能，针对用户常规习惯，可以半圈修块 4 RM2255可以手动切片或自动切片，两种计数方式 5 上下臂移动70mm，大组织切片范围宽 3 Leica Bio-systems CM.. Serial(冰冻切片机) 冰冻强调快速，稳定，安全可靠，对切片质量要求高，冰冻后组织细胞变性很大 一 CM1850 功率:1500W 1 单压缩 机制 综治信访维稳工作机制反恐怖工作机制企业员工晋升机制公司员工晋升机制员工晋升机制图 冷厢室，半导体Peltier制冷速冻架，可迅速冷冻到最低-60?C，速冻架温度-40?C，但 无样本头制冷 2 切片范围:1,60µm，病理科冰冻通常切到5µm 3 温度范围:0?C,-35?C，从室温降到最低温度所需时间3.5,4小时，平时一般停留在-10?C 4 手动除霜防止速冻架结霜，自动除霜除厢室，手动除霜持续时间12分钟 5 带精准定位系统 6 两档速度电动粗进0.7mm/s和0.2mm/s 7 宽敞的操作空间，独一无二的隔热系统，可以保证温度回升缓慢，温度缓冲，慢降慢升 8 可用喷雾式消毒剂消毒，安全可靠 9 防卷板四面可以重复使用，减少损耗，节约成本，宽度50mm配钢刀，70mm配刀片 10 科学密闭的排水系统确保废液可控处理，防止病原体在工作环境中的扩散传播 11 刀架可侧向移动，三个位置左、中、右，便于耗材的高效利用，不影响切片质量 12 人体工程学的手轮非常平滑，并可锁定 13 均带样本回缩功能 二 CM1900 功率:1800W 1 双压缩机制冷，完全独立的制冷系统，一个制冷厢室，一个制冷样本头， 厢室制冷针对常规切片，一般在-20?C ,-24?C 特殊样本如肌瘤和脂肪等需要更低的温度-28?C ,-32?C，若将所有标本都调到超低温度会令标本很 脆，易碎，因此需要对特殊标本进行二次制冷;切片过程中始终保持低温。 2 样本头压缩机在使用前半小时打开，切后关闭，厢室压缩机始终打开。普通组织样本头低于厢室2?， 脂肪含量高的温度可以设定的更低 一旦样本头制冷的压缩机损坏，还可以当作CM1850使用，双压缩机制冷不仅考虑到常规切片需求，还 针对个性化设计，此理念定位综合性医院，针对各种样本，同时被市场广泛接受 2 切片范围:1,60µm，病理科冰冻通常切到5µm 3 温度范围:0?C~-35?C，从室温降到最低温度所需时间4小时，平时一般停留在-10?C 样本温度:-10?C~-50?C，速冻架:-45?C，从-10?C降温厢室需10多分钟，样本头降温需2分钟 4 Leica Bio-systems 4 厢室和样本制冷系统独立的手动除霜功能，但不能除速冻架，速冻架除霜建议停压缩机后吹风，标配 有小塑料板，平时盖在速冻架上防止结霜，手动除霜持续时间9分钟 5 一档速度电动粗进0.8mm/s 6 宽敞的操作空间，独一无二的隔热系统，可以保证温度回升缓慢，温度缓冲，慢降慢升 7 可用喷雾式消毒剂消毒，安全可靠 8 防卷板四面可以重复使用，减少损耗，节约成本，宽度50mm配钢刀，70mm配刀片 9 科学密闭的排水系统确保废液可控处理，防止病原体在工作环境中的扩散传播 10 刀架可侧向移动，三个位置左、中、右，便于耗材的高效利用，不影响切片质量 11 人体工程学的手轮非常平滑，并可锁定 12 10个样本托，但不会有人真的放满，CM内脱水很严重，还容易混 13 标配带8?定位系统，可以选配360?精准定位系统，但不建议，因为临床无需此功能，一切以节约时 间为原则 14 均带样本回缩功能 15 排水管在机身后，冷凝水很少 三CM1850UV及CM1900UV 1 一键控制UVC消毒系统，可分30或180分钟两档消毒，并可以随时开启和终止消毒，CM1900UV由于厢室比较大，因此消毒时间是40分钟或4小时 2 探测器可探测到滑窗是否密闭，真正的安全保护，不会辐射到人体 3 在-20?C条件下，有效针对工作区域的表面和空气消毒，并有证书证明 4 无臭氧，无毒性 5 消毒需先清理厢室内的碎屑，再进行UVC消毒才有效 6 UVC消毒与消毒剂结合使用效果最好 四CM3050S 功率:1800W 1 双压缩机制冷，完全独立的制冷系统，一个制冷厢室，一个制冷样本头， 厢室制冷针对常规切片，一般在-20?C ,-24?C 特殊样本如肌瘤和脂肪等需要更低的温度-28?C ,-32?C，若将所有标本都调到超低温度会令标本很 脆，易碎，因此需要对特殊标本进行二次制冷 一旦样本头制冷的压缩机损坏，还可以当作CM1850使用，双压缩机制冷不仅考虑到常规切片需求，还 针对个性化设计，此理念定位综合性医院，针对各种样本，同时被市场广泛接受 2 切片范围:0.5,300µm，病理科冰冻通常切到5µm 5 Leica Bio-systems 3 温度范围:0?C~-40?C，调节精度为1?C 样本温度:-10?C,-50?C，速冻架温度:-45?C 4 步进马达进样及切片，保证匀速及高质量的连续薄切片，完全的RM2255的机芯 5 两档速度电动粗进500µm /s及1000µm/s 6 厢室和样本制冷系统独立的手动除霜功能，手动除霜持续时间6,12分钟 7 宽敞的操作空间，独一无二的隔热系统，可以保证温度回升缓慢，温度缓冲，慢降慢升 8 可用喷雾式消毒剂消毒，安全可靠 9 防卷板四面可以重复使用，减少损耗，节约成本，宽度50mm配钢刀，70mm配刀片，材料采用偏光玻 璃，不眩目 10 切片厚度设定及总厚度显示，切片计数功能(正计及倒计) 11 人体工程学的手轮非常平滑，电动切片时，手轮手柄可以固定于中心位置，避免不停转动 12 10个样本托 13 带精准定位系统 14 均带样本回缩功能 15 脚踏开关控制切片可选 16 液压高度调节可选 17 自动切片功能均带切窗功能，设定有效切窗范围，范围内会慢速(按设定速度)，范围外会加速，高效 五 CM1950 Serial.. 功率:1900W TM1 标配:UVC消毒，银离子涂层AgProtect，冷冻厢室制冷 2 选配:O样品头制冷 (双压缩机) V切片废屑处理系统带有负压辅助切片功能 M切片马达 5种配置: Ordering numberNameUV plus Ag Protect Object coolingVacuumMotor 订货号 名称= UV样品头制冷 = O负压= V电动切片= M 14 0477 43905CM1950 UVVX X 14 0477 42456CM1950 OUVXX 14 0477 42457CM1950 OUVVXXX 14 0477 42458CM1950 OUVMXX X 14 0477 42459CM1950 OUVVMXXXX 6 Leica Bio-systems 3 切片厚度范围:1 - 100 μm 4 修块厚度范围:1-600μm(建议用于科研) 修片厚度设置范围(建议用于临床)值:10 μm，20 μm，30 μm，40 μm 5 厢室温度范围:0?C~-35?C? 5 K，从室温降到最低温度所需时间4小时，平时一般停留在-10?C 样本温度:-10?C~-50?C? 3 K,可精确温控，速冻架温度:-42?C + 5 K 6 两档速度电动粗进:300μm/s或900μm/s，样本头采用步进马达进样技术 7 手动切片模式:传统手动模式和摆动模式(半刀模式,转半圈即切片，好像RM2235) TM8 优化的空气循环系统(CryoZone)对刀片/刀和防卷板(冷空气从蒸发器上直接向下吹到刀架上)、样 品(冷空气吹拂过样品表面)有间接冷却作用(即便没有选配O功能也可以间接冷却) 9 刀架使用全新、稳定的燕尾槽固定系统，在确保稳定的前提下，可以延长工作距离。适用常规样品、 坚硬样品、大样品 10 全新的CE刀架适用宽刀片和窄刀片(宽刀片刀架，窄刀片专用插件,窄刀片刀架)，对刀片全长施加 均匀夹力，实现无振动切片 刀片架的精准的侧向移动功能确保刀片的全长都可以被利用到 配备集成的红色安全护手和退刀辅助器(标配带有磁铁的小刷子) 刀架标配提供防卷板和枕腕，枕腕为偏爱使用毛笔取片的用户设计，可分别调节(4个位置) 11 温度探测计安装在厢室中更高的位置，箱室显示温度代表了此刻刀片区域的真实温度 12 带色彩标识的样本托(识别样本)表面凹槽加深加宽，经过预冷，样品可以很好的贴附在上面，不会 再产生切片厚薄不均现象(跳片) 13 样本托的后背表面积宽大(特大样本托50*80mm选配)，和全新设计的速冻架(15个编号的位置)或 者半导体制冷位置(2个)充分接触，样品冷却迅速 14 通过单个锁杆操作提高加装样品的效率，固定牢固，不因用户力量的个体差别影响牢固性 明确指示的0?位置可以在切片以前快速校准样品，并且在样品再次安装至样品头时，重新校准也会 非常快捷 15 冷凝液体被冷凝瓶收集，以便安全处理 16 表面平坦，没有任何缝隙、小孔或其他空间可以积存污染的切片碎屑，易于清洁。防碎屑无霜的封闭 式切片机 17 手动热气(吹热气)除霜，自动除霜是在安装时即设定好夜间除霜时间(持续12分钟，24小时一循 环)，一般不轻易改变，当自动除霜不足以完全除掉速冻架上的霜时，提供手动除霜按键，按下后机器 吹出热气帮助除霜。厢室和样本制冷系统有独立手动除霜 18 符合人体工程学设计，防止用户接触锐利的边缘并帮助用户降低肌肉骨骼劳损(MSD)的发生 明亮但防炫目的照明系统降低视觉疲劳 7 Leica Bio-systems 19 厢室内外空间布局合理，机器顶部略凹陷可放置常用工具;厢室内的活动架子也可以随意搁置工具 样本和其他附件可以在内置储物盒中预冷，切片过程中可以关上盒子，避免污染 20 带样本回缩功能，20μm或者关闭 21 控制系统容易识别，图形化符号带锁，可视的操作参数始终显示 22 UVC消毒:经认证的UVC灯完全可以达到针对细菌、病毒和真菌的表面消毒 一键控制UVC消毒系统，可分30或180分钟两档消毒(区别CM1900)，并可以随时开启和终止消毒 探测器可探测到滑窗是否密闭，真正的安全保护，不会辐射到人体 在-20?C条件下，有效针对工作区域的表面和空气消毒，并有证书证明 无臭氧，无毒性 消毒需先清理厢室内的碎屑，再进行UVC消毒才有效 UVC消毒与消毒剂结合使用效果最好 TM23 银离子涂层AgProtect: 银离子可以通过阻断细胞新陈代谢、干扰细胞呼吸、阻止细胞分裂方式导致细胞死亡 银离子能杀灭微生物，但水分(水蒸汽)是必须的，由于冰冻切片机厢室内湿度很低，因此该功能只 保护切片机外部表面，外部被脏手套污染的概率最高。直接保护:控制面板、把手、外部盖板 24 V功能既可以防止切片打卷(负压辅助切片)又可以抽吸碎屑(切片废屑处理系统)，使用不同功能时 更换不同吸头，选择不同吸力 固体废物会被位置隐蔽的第一滤网系统所收集，为了进一步提高实验室环境的安全性，空气会经过 HEPA滤网的过滤，这个滤网须3个月更换一次 切片过程中，碎屑通过磁力吸嘴被吸走或单独清理时用软管清理碎屑 25 O功能制冷样本头，厢室制冷针对常规切片，一般在-20?C ,-24?C 特殊样本如肌瘤和脂肪等需要更低的温度-28?C ,-32?C，若将所有标本都调到超低温度会令标本很 脆，易碎，因此需要对特殊标本进行二次制冷;切片过程中始终保持低温 样本头压缩机在使用前半小时打开，切后关闭，厢室压缩机始终打开。普通组织样本头低于厢室2?， 脂肪含量高的温度可以设定的更低 双压缩机制冷不仅考虑到常规切片需求，还针对个性化设计，此理念定位综合性医院，针对各种样本， 同时被市场广泛接受 26 M功能电动切片，可通过控制面板或脚踏开关(选择M功能即有此配置)操作 单次，连续，V (最大速度)按钮确保切片动作一致性 max 刹车按钮可停止马达的运行，样品头将停止在最低位，同时电子刹车也会被启动，如果要重新启动马 达只需同时按下run/stop和enable按钮，无需解除电子刹车 27 可选配徕卡座椅，可以调至5个高度搁脚板 8 Leica Bio-systems 六 竞争对手 Microm:Objective，Peltier，Vacutome，Motorize HM525: 成交价16.5-24万 HM550OV 38万(高) 1 双制冷并不是真的两个压缩机，而是用压缩机上抽出一根软管接上，通过盐溶液循环降温，一旦压缩 机故障，将全部无法制冷，且无法精确控制温度，一旦盐溶液泄露，将腐蚀步进马达电路 2 不可能精确制冷样品头，我们可以精确到-50?C 3 切片范围更小没有实际意义，只是参数上好看 4 M功能必须原配，后加不了，O后加很难，并非宣传的可以任意叠加功能，且后加功能不好 V功能吸取，开小后还可以展平，但临床上用处不大，科研单位比较喜欢此功能，Leica用防卷板效 果更好，Leica的防卷板为偏光玻璃，不眩目 5 自动对刀系统原理是碰到组织电流开通，后退200µm后再断电，其记忆功能不实用，因取材厚度不定， 样品不平，碰到高处可以，碰到低处容易切掉有用的部分，且速度缓慢 6 消毒采用超声雾化消毒，污染严重，只能在常温下长时间的进行，残留液体伤害人体，常温后有水蒸 汽，易结霜 7 开关灯及很多功能需要进入多级菜单操作，英文不方便操作人员，控制面板操作复杂，Leica图形化 8 密闭性极差，管道暴露在外，空隙多 9 半导体制冷只能比周围温度底15?C,20?C(为半导体生产厂家出厂设定好的)，是相对温度，且一 面制冷，另一面散热，影响厢室制冷效果。最好的半导体寿命为2-5年。 10 560是一款非常老的型号，双压缩机，可以制冷样本头和速冻架，但无厢室制冷 好处:粗修提供三档速度 Shandon: E型:成交价18.2,22万 FSE:成交价22万(USD2.9W) 单压缩机:E半自动,CM1850;SME电动 双压缩机:FE半自动,CM1900;FSE电动,CM3050S 1 双压缩机并非同时使用，而是轮流工作，可以延长压缩机使用寿命，但样本头制冷是靠同一个压缩机 2 切片都暴露在厢体外，降温快但升温也快 3 按组合键后就可以开盖，并不安全 4 消毒采用福尔马林熏蒸法，污染严重，只能在常温下长时间的进行，残留液体伤害人体，常温后有水 蒸汽气，易结霜 5 多级密码保护过于繁琐，不符合快速的要求 6 样本头未做改进，怀疑样本头依然靠半导体制冷，否则会弃用黑大设计，可以升温更有效说明其靠半 导体制冷，一面制冷，另一面散热，只需添加反向开关和温度显示数字即可 7 好处:粗修可以转轮也可以按键 9 Leica Bio-systems TP1020/ASP200S/ASP300S/Peloris(脱水机) 脱水原理:利用不同化学试剂，利用密度梯度原理，逐渐将组织中的水分置换出来。 脱水机工作原理:组织放入脱水缸通过程序设定，将试剂抽入缸内，经过加温，抽真空等步骤后，试剂回位。避免卡缸，保证组织在湿润环境中。所有管路封闭，所有产生气体经冷凝管后变液体入废液缸。 脱水试剂:固定液(福尔马林，甲醛，替代物固定组织,蛋白)，脱水(酒精75%-80%-85%-90%-100%) 一般如果每天40-50个蜡块可以推TP1020，但已经达到70以上的适合200S/300S 一 TP1020 半封闭全自动脱水机(第一代) 1 4种型号可选，Base>F>V 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 ，可以查询，便于及时解决问题，故障可以通过网络直接发至德国工厂，远程诊 断，只需上网即可排除故障 3 200S标配是2个塑料耐微波脱水篮，处理168个标准包埋盒，可申请补配金属篮，处理200个 300S标配是3个金属脱水篮，可配耐微波处理252个标准包埋盒。 4 15套程序，5套/页面，针对不同样本，不同时间需要，完全满足大病理科需求。图形界面，根据脱水 10 Leica Bio-systems 的组织，可设定时间等。通常病理科设定“沙发床”程序，具通用性，但针对性不强，Leica可以设 针对性强的程序，兰,黄,红,绿,紫排列(常用,不常用)，显示不同程序，颜色标识，防止误操作 5 带自检、预检功能，开启前先检测阀门，压力，管路是否畅通等，有故障不会执行程序 6 试剂相容性检测，可以自行设置试剂的兼容性，若操作过程中与设置冲突会报警，不会串缸 7 独特的试剂管理系统RMS(Reagent Manage System)好比银行排号系统，无需改变物理位置: 试剂有三种设置(粗算):天数、脱水次数、蜡块数，达到设置的数据后换了新的，会自动将新的试剂 放到最后执行(举例无水酒精)，减少了试剂的浪费;也可以关闭此功能，手工调换 8 盖子是倒金字塔形的，可以自动滴水，所有盖子都可开可洗 9 充分脱水:二级搅拌系统，磁力棒搅拌，4种压力选择(P/V，P，V，常压)，潮涌式(液体抽吸类似 潮涌搅拌)，以上功能可开可关，磁力棒从一字型改为十字型，搅拌更充分 10 独特的双通道设计，石蜡与液体分开走，不易堵塞，转盘阀门(环岛)决定哪路进出 堵塞来自试剂残渣，石蜡杂质(比例大)，解决方法:提高石蜡质量，转盘只走试剂，石蜡与脱水缸相 连(蜡缸在反应缸旁边)，快行道 11 金属脱水缸整体铸造，不锈钢，没有焊缝，耐高温，耐压，可以直接加热 12 三级排放减少递进污染:将液体从反应缸抽吸至试剂瓶、加长等待时间利用重力下流、最后加吹风， 避免了交叉污染，可设置80″，120″，140″全部液体回试剂瓶 13 3个蜡缸足够，别的品牌4个蜡缸反倒说明了二甲苯污染严重，且更换麻烦，耗电量大 14 石蜡清洁，一指键即可出去蜡中的杂质，延长蜡的使用寿命，降低成本，多重洗蜡程序。原理是抽蜡 到反应缸，加热到65?C挥发，冷凝气体收集，重蒸馏 15 石蜡温度范围:40?C,65?C，试剂加热温度范围:30?C,55?C 16 二层反应缸(蜡缸)液面感应器，下层感应器可关，上层感应器溢满报警，标准应在二层之间 17 反应缸底部有滤网，组织碎屑不会掉出去 18 试剂瓶两路，上气下液，气液分离，降低了夹带污染，试剂在加热，液体挥发成气体若不排出会冷凝 后污染下一缸;二级气雾控制系统:冷凝器外加活性炭滤网和选配的排气管，可将挥发性溶剂从仪器 内部气体中除去 19 卡试剂瓶的卡子可以上下活动，保证热胀冷缩时的密闭性能，瓶子有减少污染防腐蚀的设计，否则试 剂瓶会老化很快。试剂瓶US$200.00 20 远程排放/灌注，两个阀门(在下面的玻璃门上)，一个排蜡，一个排液 21 阀门防腐蚀设计 22 活性碳吸收最后的气体，吸苯，活性碳有效期1年。活性碳网US$200.00 23 机器内部有个旋转盘，一个孔对通一个缸后吸二甲苯，不吸时在停泊位 24 小盘子接冷凝水，很薄很浅，液滴收集盘 11 Leica Bio-systems 25 停电后会有提示信息，将停电时间，组织停留在哪等信息记录下来 26 二级报警，一级蜂鸣，二级可接警铃或电话等 27 样本量用弹簧圈为有序，无序可以放置更多，Leica采用样本不动液体动，因此方形组织框不受限制 28 二级密码保护 29石蜡缸上方的空间更宽大，并且脱水缸盖子的设计便于石蜡的更换或者样本篮的更换 脱水缸盖子的安全锁单手即刻开启和关闭 所有用户相关功能、工作区域和连接都容易接触到 30 可配UPS，有接口，支持将组织浸泡到液体中，没有UPS能支持完成整个操作，需要功率奇大 31 试剂更换情况，最好提前灌输更换试剂的概念，避免日后使用时觉得设备浪费试剂 福尔马林需要每月更换 如果每天都使用，则最后3桶清洗液需要每月更换 二甲苯共2桶，每月至少换1桶 酒精共7桶，为梯度脱水，每月至少换2-3桶，循环换完需2,3个月 由于组织问题，不换试剂容易堵塞管路，但Leica堵管路无需换管，Shandon需换管子 三 Peloris Fast Rapid Tissue Processor微波组织处理快速脱水机(第三代) 1 最大组织处理量600个，宽松排放528个，无二甲苯包埋盒宽松排放432个，两个缸独立编程，允许 连续上下载或不同组织分开处理。快速产出量:450个包埋盒/小时 2 脱水缸温度:35?C,85?C 3 试剂瓶站点数16个，每个程序包含最多16个步骤 4 脱水缸3个液面探测装置:3.8L(试剂不足报警)/5L(试剂满溢报警)/5.3L(脱水缸最大容量) 5 蜡缸站点数4个，每个蜡缸都可以注满整个脱水缸 6 脱水缸搅拌通过磁力搅拌系统，搅拌速度可选(关闭/低速/中速/高速)，搅拌器是转轮 7 脱水缸P/V/PV设定:真空(最大):,70kPa，压力(最大):，45kPa 8 孵育时间即标本浸泡时间:0-99个小时 9 脱水缸排液时间:0、5、10或30秒 10 试剂相容性检测及试剂分组，在某种试剂缺少时，可以到同组找替代试剂，保护组织 固定液:福尔马林/脱水:酒精/透明:二甲苯/石蜡/清洁剂 11 RMS试剂管理系统 软件监控试剂纯净度(根据组织块数，脱水次数和试剂瓶位置) 过期试剂不被使用 安全延长试剂使用时间 12 Leica Bio-systems 包埋盒减少互相污染 12 脱水缸快速清洗程序带有干燥步骤(高温、真空和气流)，可在30分钟左右内对脱水缸进行彻底清洁 并干燥 13 废气处理系统:活性碳滤网过滤有害气体，外接式挥发气体除去系统 14 试剂外接灌注/排放:速度几乎是普通脱水机的2倍(管道粗，压力大)，可以同时选择多个试剂瓶 石蜡站点可以通过废蜡排放管进行排空 TM15 试剂瓶和蜡缸带刻度标识，快速石蜡熔化，如果使用Parablocks固体石蜡，只需3-4小时即化 16 报警装置:本地和远程 17 立即开始和延迟开始程序，事先给出要求结束时间，机器会根据程序设定算好开始时间开始操作 18 活性碳滤网到期警报和冷凝瓶装满报警 19 通俗易懂的操作软件，图形化界面 20 可以无限存储程序，只要内存足够大 21 市场上最快的脱水机 Peloris 微波 传统的 1.5mm 40-50分钟 1小时 2小时 3mm 80分钟 2小时 4小时 6mm 3小时 不可微波处理 8小时 含脂肪的乳腺组织 5-6小时 不可微波处理 传统常规脱水需要过夜才能完成，大批次包埋和切片就需要等待更久，Peloris标本取材即可脱水， 中午完成，下午染色，包埋，第二天出报告，提高医院床位周转率 TM22 ActivFlo专利技术 消除温差层，去除高温点，保证组织的均匀加热 最佳的试剂交换 适用任何厚度、任何类型的组织 5分钟达到理想温度(一般设置40分钟时，只有在最后几分钟才能达到55?C，其他时间都在加热， Peloris只需5分钟即达到55?C 微波加热的弱点:受热不均、不适合脂肪组织、造成组织矫化(人为操作过程中出现的本不该出现的 假象)、组织不能太厚(<6mm)、对分子生物学研究存在潜在的影响、不能用福尔马 林固定和二甲苯、不同组织类型导致渗透的差异、处理量低 23 独立的脱水缸支持连续上/下载、大批次过夜程序容量、不同类型组织的最优化处理、批次大小灵活、 紧急标本优先处理、未能预计的标本量 24 安全性高，脱水过程中可以用酒精，异丙醇(用户可自购)替代二甲苯，实现无二甲苯操作 13 Leica Bio-systems TM25 Waxsol不含二甲苯的清洗试剂，如果前期选用不含二甲苯的脱水过程，即需要用此试剂清洗脱水缸 有效的石蜡溶剂 无刺激性气味 带分支的长链(异链烷烃)结构,较低的生物学活性 TM26 Parablocks石蜡 固体的石蜡块 快速熔化，只需3小时(石蜡熔化的速度与气泡多少有关，越少越好) 非颗粒状，不需要搬动熔化的石蜡液体 无添加剂，浸蜡和包埋最理想的石蜡 5块Parablocks可以填满一个蜡缸 27 活检组织包埋盒(专做活检的小网眼特殊包埋盒)无需海绵垫(普通的包埋盒需要用纱布或海绵防止 小组织漏走)，减少84%的相互污染 减少试剂使用 改善试剂的流动 消除活检海绵垫导致的矫作用 操作更简便 28 亚光的包埋模具(提高操作时间) 侧面有缝的包埋盒可以紧密贴合模具 加高四壁放置多余石蜡堆积，无需刮除多余石蜡，节约每日工时 分离闩使蜡块的取出更便捷 一次性模具无需再清洗 29 减少试剂使用量25% 降低试剂消耗，每升试剂可处理更多组织块 减少处理废液的开销 减少维护开销 30 比ASP300×2的优势 TM体积小于两台ASP300、Activflo技术加热、连续上载、不同标本类型分别处理、可以无二甲苯、脂 肪等特殊组织也适合、排空快、节省试剂25%、无限制设置程序 客户最关心的脱水机的几个参数: 脱水质量?脱水数量?试剂使用率?脱水速度?样品安全性?机器稳定性?操作人员的安全、环保性 ?使用简单 14 Leica Bio-systems 尺寸(H x W x D) 1500 x 857 x 721 mm 脱水缸 2个，独立运作(允许连续处理，或不同组织分开处理) 600(最大量)，528(宽松排列)，432(宽松排列/不使用二甲苯) 连续上载，提高利用率，总产量增加 TM脱水数量(包埋盒容量) ActivFlo，脱水速度快，周转快，处理量增加 TMActivFlo创造了理想的处理环境，系统能够迅速升温，主动促进试剂交换，避免 出现高温点或温差层 2个脱水缸，不同组织可分开处理，对于微波技术不能处理的脂肪组织、切片过厚 的组织，脱水效果同样可靠 脱水质量 独特的包埋盒设计，更易于试剂交换，组织脱水效果更佳 TMActivFlo，脱水速度快 连续上载 真空/压力排放系统 独特的包埋盒设计，加快试剂交换 TM特殊的耗材Parablocks，快速融化 脱水速度 比传统的脱水机快40-60%，一般只需2小时;含脂肪的乳腺组织只需5-6小时 比其他脱水机节省试剂25% RMS试剂管理系统 特殊耗材 小批量 试剂使用率 过期试剂不用 全封闭系统 过期试剂自动报警 试剂分组 样本安全 不使用微波技术，避免组织加热不均匀 机器稳定性 泵、阀门 全封闭系统 环保 处理过程可不含二甲苯(也可以使用二甲苯) 操作软件 操作简单、灵活，用户可无限设计个性化处理程序 紧急样本及时处理，可当天报告病理诊断 病人关怀 满足临床特殊需求(如肝移植病人术后肝穿)，可尽快获得石蜡病理报告 15 Leica Bio-systems 四 竞争对手 Shandon(Microm没有全封闭) Excelsior:成交价32-33万 1 Excelisor并非全封闭，只是落地式，混淆全封闭概念，开口后发型管子插入缸口打开。全封闭型号 Pathcenter并无UPS电源 2 样本量固定，只能放在规定的样本盒中，无法无序排放，最多222个标本 3 探测功能，虽有三个感应器，却没有满溢报警，其只能探测吸入多少试剂至脱水缸，不会因为试剂不 足报警，而Leica可以 4 没有精确的RMS，极大的造成试剂的浪费，举例梯度脱水:试剂中混合了蛋白质探测不准，外挂无水 酒精瓶是市场上买的，易挥发，挥发后并不是真的无水酒精，影响脱水效果 此功能无法关闭，不可以自己配精准浓度，且换一缸液体需要全部改变物理位置，工作量大 5 宣称开盖时微动开关启动，反应缸边缘电抽风抽走有毒气体，但实际抽至脚下，因无废气瓶且非全封 闭，因此还是排至室内，可用红色蒸汽试验 6 玻璃缸盖容易冷凝水蒸气，根本看不见反应过程，反而证明试剂污染，且无法拆卸，不便清洗 7 晃动搅拌，易丢失损坏标本 8 标本会有气泡 9 预加热功能是不得已而为之，因为石蜡缸是塑料的，因此清洗程序无法彻底加热，容易有蜡残留。试 剂瓶,加热缸,脱水缸(需经过加热缸，一个试剂瓶配一个加热缸)，加热缸基本无法清洁，试剂再干 净也容易被加热缸污染 10 操作界面仅表层汉化 11 7层密码保护，易忘，但很少用到，属于Shandon的设计风格 12 UPS电源为2块小型机车电池，仅能保持电脑不断电，无法支持整个脱水程序结束，概念炒作。声称 可以运行8小时程序，但为了保证走程序，取消或降低很多功能，如加热从60?C降至30?C 13 试剂瓶橱门为金属的，无法看清试剂状态，Leica是玻璃的，可以实时观测 14 Pathcenter的旋转阀必须加热，因为石蜡和试剂共用同一旋转阀，而Leica的石蜡与试剂完全分开， 减少污染，降低堵蜡危险 15 若主程序无法进行，则从属程序也无法进行 16 出厂价低于Leica20%，但在国内价格几乎持平，说明价值不高 17 半封闭脱水机价格很高，英国原产，真空泵在外部 18 半封闭蜡缸不可以取下，擦洗困难 16 Leica Bio-systems Sakura VIP5(全封闭) 成交价25-27万(最低21万) 1 4L石蜡，浪费，同时也说明3L时脱水不净，需第四缸脱水 2 无石蜡排放管道，需要石蜡在液体状态下手工倒蜡，容易烫伤操作人员 3 缸盖无法取下，难以清洁 4 蜡缸位于脱水缸下方，脱水缸无法达到通常要求的常温，因为总被下方的石蜡缸加热 5 半封闭已经停产 Sakura XPress (Sakura) 或 Pathos (Milestone) (大组织) 1 全自动液体交换 2 在一定温度下进行脱水，有些需要不同的压力 3 无二甲苯处理(酒精脱水/透明或者石蜡) 4 无福尔马林处理(酒精固定剂，如MolekularFix或 FineFix) 5 缩短的整个处理时间加上高产量 6 小批次处理，连续工作流程 7 当天出结果(Rapid Tissue Processors) Microm STP120(半封闭) 1 组织量120个 2 转组织同时上升旋转，甩水再抖。甩干功能提杆上下反复自转，公转，对杆的要求很高，很多客户购 买后并不实用，对组织也不好 3 试剂缸是不透明铝缸，不便于监控，易腐蚀，成本高 6 STP120在西班牙HYR工厂生产，为贴牌产品 Microm STP420(大组织) 1 STP420有两个脱水缸, 大脱水缸用作普通过夜程序，独立的小脱水缸可以处理紧急的活检组织 2 大的圆形脱水缸有6个旋转样本篮，类似于洗衣机 3 通过旋转进行搅拌 4 特殊的搅拌方式据说可以增加提高试剂使用效果 5 自动外接式灌注和排放，无需取出试剂瓶或者污染脱水缸 6 RMS试剂管理系统 7 大脱水缸容量为348个包埋盒，小脱水缸容量为58个包埋盒 8 10个试剂站点，4个石蜡站点 17 Leica Bio-systems 9 内置不间断电源(UPS) 实现样本保护 10 彩色触摸屏 11 玻璃脱水缸盖 缺点: 1 无论大小脱水缸都无法处理大样本，比如脑子 2 在断电的时候，部分包埋盒会干掉，即便有UPS，和自动灌注功能，大脱水缸还是无法彻底注满 3 无法证明旋转式搅拌确实更有优点 4 价格昂贵(和ASP相比) 18 Leica Bio-systems ST5010/ST5020/CV5030染色封片机 染色封片是病理诊断和科研的中制片过程必不可少的两个步骤。病理医师将用来诊断和科研的组织，通过取材，脱水-包埋-切片-染色-封片-显微镜诊断结果。染色是指通过HE染色方法，将正常组织和肿瘤组织加以区分，来判断是恶性肿瘤还是良性肿瘤亦或是正常组织。盖片是将染色后组织用盖玻片进行封片，以便用显微镜进行诊断。 传统染色封片，通过人工完成，不仅效率低，而且直接接触有毒试剂(酒精,二甲苯)对人身体造成危害也不利于环保。徕卡公司德国病理工厂经过研究开发生产了ST5020染色机和CV5030盖片机，并可组成染色盖片系统，他将染色封片程序设置在机器里，将传统的人工染色和封片方法改由机器机器完成，不仅提高染色、封片质量;增加染色、封片数量，改善工作环境而且保护操作者的健康。 一 ST5010 功率:800W 组织学的常规染色机 1 全微机控制，15套程序，每套程序25个步骤(26个总站点) 2 最多可以同时11个玻片架(4个程序)，30片玻片/架，一次上载一个玻片架，可以连续上载4次 3 XYZ轴架框运动 4 标配1个烤箱，烤箱温度范围30?C,65?C或0?C。烤箱用来快速干燥切片 5 每一个反应缸都可以单独编程，反应缸可设置18-22个，450ml 6 所有的步骤和程序参数是用户自定的 (包括准确的孵育时间)。强调有精准时间的设置，若没有此功能 会很慢，举例盐酸酒精需要精准时间，二甲苯无需精准时间，将精准时间和模糊时间结合设置使用， 效率高，只设置必要的精准时间 7 节水功能:架子到了才冲水，无此功能就会一直在冲水 8 1路上载，1路下载，若接CV5030则可以不要下载 9 染色数量200,400片，最多600片/小时，不是绝对数，要根据程序(优化快速 HE染色) 10 兼容市场上的各种品牌的玻片架，无需另加适配器 11 简单按键操作，高灵活性，高质量，高安全度。 灵活性是指可以根据不同的染色协议，同时处理几个玻片篮。以使Popanicolean和Haewatoxylm/Eosin 染色能简单方便地同时进行，而不需要全新编程或更换试剂 使用安全，有一个集成的烟雾控制系统，由一个两抽屉系统负责玻片篮的装载和卸载，这意味 着实际上不暴露在烟雾中。优化的清洗缸，快速除去多余的试剂，玻片篮带出溶剂最少，设计确保没 有液滴和试剂的残余 12 符合所有国际标准，技术成熟，低维护 19 Leica Bio-systems 二 ST5020 功率:800W(带烤箱)，400W(不带烤箱)组织学的高档染色机 1 50套程序，每套程序40个步骤(40个总站点)，孵育时间59分59秒 2 XYZ轴架框运动 TM3 最多4种不同的染色方式即同时进行4个程序，通过颜色代码识别系统(CodeRack，也称异频雷达发 射夹子)实现:举例红色为HE染色，兰色为巴氏染色，绿色为苏木素染色等，用不同颜色代表不同染 色程序，9种颜色，标配4个，最多放4个同时染 4 通过连续上载最多同时处理12个玻片架，一次最多进120张片子(4路上载，30张/玻片架) 5 染色数量由染色步骤、上载程序和仪器设定决定，通常650片/小时，最多可达1000片/小时 6 每一个反应缸都可以单独编程，反应缸最多可设置34个，总站点达到40个，450ml 7 1,4路上载，0,4路下载，可以在染色同时拉开抽屉连续上载 8 水洗缸为5，1个，1个为蒸馏水设计，也可以加普通水或设置成染缸，但有两个进水口;节水功能 9 彩色触摸屏，试剂管理系统RMS，可以根据时间或次数设置更换试剂的标准 10 软件具有优化功能，能进行程序相容性自检，运行更加可靠 11 针对CV5030设计，与其兼容性好 12 二级密码管理，USER和SUPERVISOR 13 标配不带烤箱，可选配2个或4个，烤箱烘干玻片，去蜡，保证染色完全自动化 14 活性碳滤网和烟雾抽排管路系统 15 试剂缸和水洗缸都可以取出清洗，建议使用实验室洗碗机清洗，水温最高不超过+65?C，使用标准的 实验室洗碗机清洁剂。 16 为抑制细菌繁殖，可使用5%的次氯酸钠冲洗排水系统，再用大量清水冲洗 17 选配2个加热试剂缸，温度35?C,70?C 18 选配节省试剂的插件，为特染设计 19 一般需另配2M排气软管(14047535762)USD300.00，标配带4M排水管 20 配塑料玻片架，不要配金属玻片架，以免变形，USD27.00/个 三 CV5030 功率:300W 1 为组织切片和细胞涂片，单细胞涂片设计 2 高产量的玻璃封片机:大约 400 片/小时 3 盖玻片架自动适合不同大小的盖玻片，残破盖玻片感应器带有自动检除功能，“盖玻片捕获器” 保证封片更加安全可靠，确保优质效果。 4 可与其他品牌多种型号的玻片架兼容 (开放性的体现)， 5 输入架可一次放60张切片，并可加入试剂，完成湿性或干性封片 (质量和灵活性的体现) 20 Leica Bio-systems 6 喷嘴出口保存在试剂中，保证封固剂喷涂的完整性 7 用户可自选封固剂，自主设定固封剂参数 8 盖玻片大小22-24*24-60mm，玻璃盖玻片和塑料胶带直接关键差别 9 活性碳滤网和烟雾抽排管路系统 10 占地面积小 11 可与Leica的染色机相连，组成染色盖片工作站 四 竞争对手 Microm 1 提供海绵擦，每次出缸时可以擦拭一下，每个缸都很干净，Leica与Shandon都脏，但海绵擦只能擦 拭染色架底部的试剂，实际上玻片之间由于毛细现象聚积的试剂要多很多;且海绵擦脏了有很多有毒 试剂，对人体有害 2 每个缸在染色过程种染液都处于搅拌状态，感觉上肯定要比不搅拌的染色更充分 3 外接一台笔记本电脑，价格不高，但显示价值 4 价格介于ST5010与ST5020之间 SAKURA 1 双层便利性差，不适合连接盖片机 2 至少18个染色试剂缸，上载、下载站点各1，水洗缸5个，烤片箱1个，共26个 3 上载，下载抽屉各1个 4 SAKURA封片机只能用专用材料塑料胶带，不开放，与玻璃对比如下: 特点 塑料带 玻璃 备注 速度 ++ + 塑料带封片的速度是玻璃的2倍。 操作过程的质量 + (+) 就操作而言两者相当，但就可靠性而言塑料带的优 势比玻璃稍强 镜下观察的质量 + +(+) 塑料带可适用于大多数常规的检验，但是无法适应 高分辨率的镜头的观察 密封的质量 - + 有报道称塑料会“脱开”，“断裂”“需要重新封片”， 甚至引起诉讼。 灵活性 - + 塑料带不适合涂片，无法配合进行“特定区域的扫 描”，玻璃封片技术可以适合不同样本的要求。 系统兼容性 - (+) 塑料带封片系统是局限的(只限于Sakura玻片架), 玻璃封片系统有时可以接受其他品牌的玻片架 操作者的安全 (+) + 塑料带需要二甲苯来预处理, 玻璃可以进行干性 封片或者用二甲苯替代品封片 使用成本 - + 塑料带比玻片要贵 21 Leica Bio-systems EG1150/EG1160 一 EG1150H+C 1 重力原理，分体机，冷热台随意组合摆放，宽大的操作台面，全新的排蜡系统 2 热台温度范围55?C,70?C，冷台温度在室温20分钟后可保持在-5?C 3 3L的熔蜡槽，相对4L的省电，因为实际应用时很少用到4L蜡 4 热台可容近100个包埋盒，冷台可容70个包埋盒 5 流蜡量可调 6 半导体制冷小块，比室温低10?C,15?C(未必零下) 7 过热保护，温度过高保险丝自动断电 8 两个废蜡槽可装卸，便于清洁 9 可存储一个程序，但关机后才可以保存下来 10 可选配脚踏开关，双手可以工作 11 可选配放大镜 二 EG1160 1 一体化机身，微处理器程序化控制，控制工作天数、起止时间，工作台面的温度等 2 流蜡可以手控，包埋盒推动控制夹或脚踏开关(标配) 3 喷嘴用泵控制，有照明 4 10级石蜡流速调控 5 液态石蜡高度指示 6 石蜡出口可以单独加热 22 Leica Bio-systems SM2100R 一 配置解析 1 HN40为标准样本夹，可夹蜡块 2 通用样本夹，可夹包埋盒 3 超大样本夹，病理科用不上，是针对科研单位的 4 干冰盘，切活肾脏用的，如果选配了干冰盘就必须加间隔块 7 可以电动进样 23 Leica Bio-systems IP C/IP S Leica Shandon OEM Raymond A LAMB IP C:包埋盒打印机 Cassette MicroWriter Comment IP S:玻片打印机 Slide MicroWriter 喷墨打印，利用闪灯的光化学作Leica的产品没有噪打码原理(IP S) 用，墨水即可牢固，不会受化学试利用钻石头刻划玻片的表面 音，而RA的产品噪音 剂腐蚀 很大 打码原理(IP C) 同上 加热的铁笔刻划包埋盒，色带 RA会制造较大噪音 各种市售KNITTEL SLIDES，使用玻片(IP S) 推荐使用(Colormark) Starfrost均可用 Leica可以提供成条使用包埋盒: 可以打印有盖的或者无盖的 的已排列好的包埋盒 墨水耐腐蚀 可以耐受化学试剂和物理摩擦 不 以利长久保存 玻片容量(IP S) 150片/储片盒，3个储片盒 72张 Leica的容量非常大 包埋盒容量(IP C) 80个/储存盒，共6个储存盒 75个/储存盒，共6个储存盒 数字、标识、字母、图案、条形码Leica打印机可以打打印内容 4种字体 (甚至兼容word文档) 印的内容更多 IPS:4秒/个(成批打印模式) 速度 IPC:3,4秒/个(成批打印模式) 10秒/个(单独打印模式) 各种市售打印盒均可用，甚至是带打印盒: 盒盖的 Nice Label，和电脑相连，软件操 作简便 软件可以自由编辑， 可以通过打印驱动程序和基于可以打印住院号，病 Windows系统的LIS整合 人姓名(英语)，条打印软件 Windows打印驱动程序可以为打形码，病理号(例如 印过程提供最大限度的便利和灵200507123,A1， 活 200507123,A2) 360 dpi高精度打印分辨率 有条件整合入医院的信息系统网目前只有Leica具备其他: 络 这样的条件 参数: 闪灯可以使用150,000次 可以使用3个月或者打印60，000 墨盒: 次，同时配备清洗墨盒，确保打印 60000个字符 质量 可以选择有序排放盒，这样无论是 附件: 玻片还是包埋盒都会按照次序整 齐排列，提高工作速度 IPC/IPS墨水一旦打开，三个月必须更换 如果仪器需要搬迁，必须将墨水盒取下，装上清洗盒，避免堵塞 24 Leica Bio-systems 机器绝对不能关闭电源长达6小时, 容易造成喷墨头堵塞 BOND-X/BOND-MAX 一 免疫组化概述 1 何为免疫组化:用已知的抗原或抗体去检测待检组织中的抗原或抗体，根据其结合后经一系列方法的 处理，呈色反应，在光镜下确定组织的来源，属性和部位。目前免疫组化作为病理诊断，鉴别特殊病 例，是不可或缺的最重要的手段 2 免疫组化的基本原理:利用抗原和抗体之间结合的高度特异性，先将组织或细胞中的某些化学物质提 取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物，制备特异性抗体，再用这种抗体(第一抗体) 作为抗原去免疫动物制备第二抗体，并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述 抗原成分结合，将抗原放大，由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的，因此，还必须借助 于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒)。通过抗原抗体反 应及呈色反应，显示细胞或组织中的化学成分，在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产 物，从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗 原的物质，如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的 特异性抗体进行检测 3 常用术语 抗原:是体内非正常物质。出现在机体内的外来或异常蛋白，刺激免疫系统产生抗体 抗原决定簇:抗原与抗体结合的区域 抗体:是消除非正常物质的卫士。人体内自然产生的蛋白能识别和去除感染和疾病。由B细胞免疫应 答产生。抗体属于特异性蛋白族被称为免疫球蛋白(lg)。lg分类:lgG、lgA，lgM，lgD，lgE(含量 高至低) 免疫组化抗体(一抗):IHC人造抗体结合特异性的抗原或抗原决定簇 多克隆抗体(多抗):多种多样成分(一把钥匙开多个锁，特异性会降低，敏感性高，无法完美结合)。 可由不同种系产生(通常是兔)。不同的免疫组化反应。抗体与多种抗原决定簇反应。特异性不强，但 广泛的特异性使其敏感性高于单抗。存在不同的抗原交叉反应问题 单克隆抗体(单抗):特异性提高。由克隆性浆细胞产生(通常是鼠或兔)。相同的免疫组化反应。源 于单一克隆的相同的抗体，能与相同的抗原决定簇反应。特异性远高于多抗 3 免疫组化重要性 由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高等显著特点，且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起， 这门技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域 25 Leica Bio-systems 在病理学研究中，免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例，在免疫组化技术出现以前，对肿瘤的诊断和分类还局限于细胞水平，而引入免疫组化技术后，则使研究的深度提高到了生物化学水平、分子水平。近年来，伴随基因探针研究而兴起的核酸分子原位杂交技术也正在蓬勃发展，更使免疫组化如虎添翼，两者相得益彰，将研究推进到了基因水平 4 免疫组化的应用 确定细胞类型 通过特定抗体标记出细胞内相应抗原成分，以确定细胞类型。如角蛋白是上皮性标记，前列腺特异性抗原仅见于前列腺上皮，甲状腺球蛋白抗体是甲状腺滤泡型癌的敏感标记，而降钙素抗体是甲状腺髓样癌的特有标记。有些细胞(如表皮内朗格汉斯细胞、黑色素细胞、淋巴结内指突状和树突状网织细胞)光镜下不易辨认，但免疫组化标记(S-100蛋白等)能清楚显示其形态 辨认细胞产物 利用某些细胞产物为抗原制备的抗体，可作为相应产物的特殊标记，如内分泌细胞产生的各种激素，大多数可用免疫组化技术标记出来，据此可对内分泌肿瘤作功能分类，检测分泌异位激素的肿瘤等 了解分化程度 大多数标记物都有其特定的分布部位，如上皮细胞膜抗原(EMA)着色部位在细胞膜上，但差分化乳癌胞浆内也可出现阳性颗粒;角蛋白的含量也与分化程度有关，低分化或未分化癌含量较低、染色较弱 鉴别病变性质 通过标记Ig轻链(κ、λ)可区分部分B细胞性淋巴瘤与B细胞反应性增生，前者常表达单一的Ig轻链(κ+/λ+)，后者常为多克隆Ig轻链(κ+、λ+)。而标记bcl-2蛋白在区别滤泡型淋巴瘤和反应性滤泡增生上有相当的意义。在滤泡型淋巴瘤，90%以上肿瘤性滤泡细胞有bcl-2的高表达;而在滤泡反应性增生时，滤泡反应中心的细胞不表达bcl-2蛋白 发现微小病灶 某些癌的早期转移有时与淋巴结内窦性组织细胞增生不易区别。用常规病理组织学方法要在一个组织中认出单个转移性肿瘤细胞或几个细胞是不可能的，而采用免疫组化方法(如用上皮性标志)则十分有助于微小(癌)转移灶的发现。对转移性肿瘤也可借助免疫组化标志寻找原发瘤，如骨组织内有前列腺特异性抗原阳性细胞，提示前列腺癌转移 探讨肿瘤起源或分化表型 一些来源不明的肿瘤长期争论不休，最后通过免疫组化标记取得共识。如颗粒性肌母细胞瘤，曾被认为是肌源性的，但该肿瘤肌源性标记阴性，而神经性标记阳性，证明为神经来源(可能来自神经鞘细胞)。分化很差的肿瘤病理上常按细胞形态分为梭形细胞肿瘤、小圆细胞肿瘤等，通过多种标记的联合应用，也可能确定来源 确定肿瘤分期 26 Leica Bio-systems 判断肿瘤是原位还是浸润及有无血管、淋巴管侵袭与肿瘤分期密切相关。用常规病理方法判断有时是十分困难的，但用免疫组化法可获得明确结果。如采用层粘连蛋白和?型胶原的单克隆抗体可清楚显示基底膜的主要成分，一旦证实上皮性癌突破了基底膜，就不是原位癌，而是浸润癌了，其预后是不同的。用第八因子相关蛋白、荆豆凝集素等显示血管和淋巴管内皮细胞的标记物则可清楚显示肿瘤对血管或淋巴管的浸润。对许多肿瘤的良恶性鉴别及有无血管或淋巴管浸润，这是主要的鉴别依据，同时也有治疗及预后意义 指导预后和治疗 免疫组化标记中与预后有关的标记大致可分为三类: ?类固醇激素受体:如雌激素受体、孕激素受体等，它们与乳腺癌的关系已获公认，性激素受体阳性者内分泌治疗效果较好，预后也较好。相似的结果也见于子宫内膜癌和卵巢癌 ?肿瘤基因标记:如癌基因c-erB-2，c-myc，P53蛋白等，在肿瘤中高度表达者，患者预后较差;而nm23蛋白高度表达者，肿瘤转移率较低，预后较好 ?细胞增殖性标记:如表皮生长因子受体(EGFR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67等，表达指数越高，表明其增殖越活跃，恶性度增高，预后不良，其中以恶性淋巴瘤、乳腺癌较为明显。而且在乳腺癌的研究中发现Ki-67、 PCNA 、EGFR阳性者，淋巴结转移率高，并与激素受体的表达呈负相关 辅助疾病诊断或分类 人体的免疫性疾病，主要是自身免疫性疾病，如肾小球肾炎、皮肤自身免疫性疾病等，可用免疫组化方法对组织细胞内的免疫球蛋白、补体、免疫复合物等进行检测以辅助诊断。某些疾病的分类或分型也是在免疫组化基础上建立的。内分泌肿瘤如垂体前叶腺瘤，根据其分泌功能可分为生长激素腺瘤、泌乳激素腺瘤等10型;胰岛细胞瘤的功能分类为胰岛素瘤、高血糖素瘤等6种;恶性淋巴瘤根据瘤细胞表面标志不同可分为T细胞性、B细胞性。肾小球肾炎的免疫学分类亦需免疫组化或免疫荧光技术 寻找感染基因 人体疾病的致病微生物中有的在常规病理检查中不易发现，尤其是病毒性致病微生物，由于其分子水平的结构，在细胞水平上难以发现，通过免疫组化方法则可明确发现病原体抗原部位以及定量，如巨细胞病毒(CMV)、人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV)、乙型肝炎病毒(HBV)等，已有商品化标志物帮助解决病因诊断问题 5 免疫组化的优点 特异性强 免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性，因此，免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示，如角蛋白(keratin)显示上皮成分，LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时才会出现交叉反应 27 Leica Bio-systems 敏感性高 在应用免疫组化的起始阶段，由于技术上的限制，只有直接法、间接法等敏感性不高的技术，那时的 抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP法的出现，使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍 仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于 常规病理诊断工作 定位准确、形态与功能相结合 该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗 原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学研究的深 入是十分有意义的 6 免疫组化的全过程 组织处理 切片 免疫组化步骤:抗原修复:物理修复(水浴,微波,高压) 化学修复(胰酶,胃酶) 显色:常用DAB 7 免疫组化操作基本步骤 1.切片脱蜡水化后,PBS洗3次 2.根据实际情况抗原修复 3.滴加过氧化物酶阻断剂.室温孵育10min后PBS洗3次 4.滴加非免疫性动物血清,室温孵育10min 5.甩去血清,滴加一抗,室温孵育60min或4度过夜 6.PBS洗3次后,加二抗,室温孵育15min 7.PBS洗3次后,DAB显色 8.复染,封片 二 BOND-X/BOND-MAX 1 包括脱蜡和修复在内的全自动”连续性”的系统 2 Leica生产的紧密聚合物技术和一抗组成的高敏检测系统带来高质量的结果 TM3 Covertile既保护组织样本又使得试剂消耗量和废液产生量最小化 4 有害废液和无害废液分开处理的环保设计 5 智能化的操作系统 28 Leica Bio-systems 简单方便的操作系统-仅仅只要在操作系统中选择染色步骤,然后打印出标签,把它贴在待检玻片上,把玻片放进玻片架,剩下的事就交给机器了 高灵活度的操作系统-可编辑染色步骤,可管理试剂,管理病例和报告 TM6 Covertile: 保护组织，防止标本脱片和脱水 滴加所有试剂均只需100-150ul 小的试剂容器,使得BOND能够放在实验台上,节约实验室的空间 能够重复使用25次 易于清洗 有一个特殊的卡口，使它能够被正确放置 7 拥有BOND可以带来 染色质量的提高 诊断质量的提高 实验灵活度的提高 生产量的提高 错误的减少 实验成本的减少 v 洁净的实验室 三、 BOND-MAX 1 全流程全自动，从烤片，脱蜡，抗原修复，封闭，一抗，二抗，DAB显色，复染整个过程零手工操作， 给免疫组化检测带来了标准化和可重复性，高质量的试剂和高端的设计理念，染色细节的处理带来的是高质量，可重复，标准化的染色效果，给医院带来可信的检测 可以完成独立运行免疫组化和原位杂交两种不同的检测，可给病理科带来新的业务 零手工操作可腾出人力来开展其他的业务 其他机器只能做到免疫组化一抗，二抗，显色三个步骤，机器无法做到免疫组化中最关键的步骤—抗原修复。除需人工操作外，染色细节做的不够好，染色质量和重复性如人工操作 2 连续性的流水线工作流程，可以随时上下载，整个操作流程只需要2-2.5个小时，给免疫组化带来急 诊模式，为手术中急需做免疫组化定性的组织切片提供了可操作性。此外，速度的提高可提高病理科免疫组化的效率，免疫组化当天诊断成为可能，可间接提高出院率，增加病床的周转率，效率的提高意味着效益的提高 29 Leica Bio-systems 其他机器不可随时上下载，且整个染色时间至少需5-6个小时，虽然比人工操作的时间一天快了，但 是无法做到急诊模式，且实际的效果不明显 综合以上两点，Bond-Max的优势就在于“又好又快” 以下为染色操作的细节方面: 1 Bond每日会自动检测，排除一切无法正常染色的因素即可开始工作，若出现任何无法正常染色的因 素，即会给用户提示报警 其他机器无此功能 TM2 Bond染色中独有的Covertile，试剂侧面滴加，一方面防止试剂直接滴加可能造成对组织的伤害， 另 外一方面创造出局部的“湿盒”环境，防止组织脱水皱缩影响染色质量，第三可以避免影响染色质量 的“边缘效应” 其他机器无此功能 3 Bond所用的试剂可常温保存，完成避免了试剂效价降低而影响染色质量的可能性 其他非Leica提供的任何免疫组化试剂均需4度保存 4 在保证染色质量的前提下，Bond染色每一步骤滴加试剂量均为100ul，最大限度减少试剂的消耗 其他机器若每一步骤滴加试剂量为100ul，绝对无法保证染色质量。因为它们没有组织切片保湿功能 三、 Novocastra Conpact Polymer 30 Leica Bio-systems 四、 竞争对手 Ventana Benchmark Bond-Max Ventana Benchmark 自动性 全自动 全自动 连续性 连续 非连续 Covertile 专利技术 油性保护组织 切片保护功能 试剂侧面滴加 需额外清洗油污 真空负压抽吸 试剂直接滴加 最大限度保护组织 对脆弱组织可能造成伤害 避免边缘效应 无法避免边缘效应 三个独立的玻片架 单一处理模式 效率 连续性处理模式 IHC和ISH同时操作时 增加病理科效率 需等ISH完成才能取出 IHC玻片 每一步骤试剂滴加量均为 无法做到每一步骤试剂滴加量最小，试试剂滴加量 100ul，最大限度减少试剂消耗 剂消耗巨大 3 L/day 25 L/day 试剂消耗总量 染色质量 卓越 一般 机用试剂 可常温保存，无需每天从冰箱取出试需4度保存，需要每天从冰箱中取出放 剂放入机器 入机器 20 min/week 60 min/day 清洁维护 带摄像头和红外线的OCR光学识别 标签识别系统 系统，最大限度减少人工错误 条形码识别系统 自检系统 每日自动检测，杜绝人工错误 无 环保设计 有害废液和无害废液分开处理 无 服务和支持 成熟和迅速的服务体系和技术支持 尚无注册证，国内服务和支持很不成熟 31 Leica Bio-systems Dako Labvision Bond-Max Bond-X Dako 自动性 全自动 半自动 半自动 连续性 连续 连续 非连续 可同时独立运行 只能完成免疫组化只能完成免疫组化(IHC)功 能 免疫组化(IHC)和 (IHC)的部分流程 的部分流程 原位杂交(ISH) 全流程全自动，整个 染色流程八个步骤只能完成滴加一抗，只能完成滴加一抗，二抗和工作流程 (烤片，脱蜡，抗原二抗，显色和复染四显色三个步骤，其他步骤需 修复，封闭，一抗，个步骤，其他步骤需人工操作 二抗，显色，复染)人工操作 零手工操作 三十个独立的温度控 温控单元 制单元，可通过电脑无 无 随意调节 Covertile 专利技术 Covertile 专利技术 无特殊切片保护技术 试剂侧面滴加 试剂侧面滴加 组织易脱水皱缩 切片保护功能 真空负压抽吸 真空负压抽吸 试剂直接滴加 最大限度保护组织 最大限度保护组织 对脆弱组织可能造成伤害 避免边缘效应 避免边缘效应 无法避免边缘效应 连续性处理模式 连续性处理模式 单一处理模式 效 率 批玻片处理时间加上人工处理时间加上人工处理的时间整个 2-2.5h 整个流程3-3.5h 流程需5-6h 增加病理科效率 染色质量 卓越 中等 一般 每一步骤试剂滴加量每一步骤试剂滴加无法做到每一步100ul滴试剂滴加量 均为100ul，最大限度量均为100ul，最大加试剂消耗巨大 减少消耗 限度减少消耗 试剂消耗总量 3 L/天 5 L/天 15 L/天 带摄像头和红外线的带摄像头和红外线 标签识别系统 OCR光学识别系统，的OCR光学识别系条形码识别系统 减少人工错误 统，减少人工错误 清洁维护 10 分钟/周 10 分钟/周 20 分钟/天 机用试剂 可常温保存 可常温保存 需4度保存 自检系统 每日自动检测 每日自动检测 杜绝人工错误 杜绝人工错误 无 环保设计 有害废液和无害废液无 无 分开处理 处理模块 一台电脑可控制 一台电脑可控制 一台电脑只可控制 五台机器 五台机器 三台机器 32 Leica Bio-systems 服务和支持 成熟和迅速的服务 成熟和迅速的服务 贴牌机器 高质量的技术支持 高质量的技术支持 服务和支持麻烦且有限 33