【doc】核磁共振法测定萘普生对映体相对含量

【doc】核磁共振法测定萘普生对映体相对含量 核磁共振法测定萘普生对映体相对含量 中国药科大学 JournalofChinaPharmaceuticalUniversityl999,30(1)}31,33 J一; 核磁共振法测定萘普生对映体相对含量 王庆锋杭太封?张正行尺77/ 坤国药抖大学药物 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 研链'南?77, 摘要利用手性镧系位移试剂Eu(TFC)的作用,测定萘普生甲酯化衍生物的.H— NMR谱来确定萘普生对 映体相对含量.在样品浓度为0l7mol/L.位移试剂和被测样品摩尔比为0.318附近 时.定量信号峰一COOCH,的对 映体移釜一力髦寺t沸关薯调萘普生;对缺体定量;质子棱磁共振;镧系手性位移试 剂十班乃,t]/,一-__--一__.____?_一--''..- 萘普生为芳基异丙酸类的非甾体抗炎药, 能缓解轻度至中度疼痛,其抗炎活性来自(+)一一 对映体,而其(一)一R-对映体则显示毒副作用.因此 医药工业上已采用结晶法对萘普生拆分后以右旋 体上市,但其左旋体杂质仍占一定比例[.药典采 用测定比旋度的方法来确定萘普生对映体含量.也 有文献报道了GLC和HPCE用于萘普生手性拆分 和定量的方法.本文先对样品进行甲酯衍生化, 再利用镧系手性位移试剂:三[3一(三氟甲基羟基亚 甲基)一()一樟脑酯根合]铕(十3)[I,简写为Eu (TFC)a]和H—NMR,建立了一个测定萘普生对映 体相对含量的简便,准确方法,该方法同样适用于 其它芳基异丙酸类的对映体定量[. l仪器 氢谱由90MHz的JEOL-FX90Q型核磁共振 仪测定,测试温度28C土1C,利用溶剂CDCIs的残 留信号(6c一一7.24)作为参考标准.化学位移6精 确到土0.O1.偶合常数精确到土0.1Hz. 2样品和试剂 一 (-),一(一)和混旋萘普生由本校药物分析 教研室提供;CDC|s(99.80A氘化,购自北京化工厂) 使用前先蒸馏,后置于有过量4nm分子筛的容器 中;Eu(TFC),(购自SIGMA公司)使用前先干燥, 再置于放有POs的真空干燥器中. 3衍生化样品制备 准确称量萘普生混旋体样品50mg置于烧瓶 中,加入甲醇40ml和浓盐酸(ca.38)lml,回流 收穑日期1998—0915 搅拌1h后.把反应物浓缩至一定量体积.用3×15 ml乙醚萃取.合并乙醚层,用无水CaSO一干燥后.蒸 干溶剂,产物置于真空干燥器中备用.萘普生混旋 体甲酯化衍生化产物(I)的质子核磁共振化学位 移为(6):1.58(3H.d,J=7.2Hz,C—CH3),3.67 (3H,S.COOCHa),3.85(1H,q,J一7.2Hz,一CH cHa),3.91(3H.S,一OCH3),7.O9,7.83(6H.多重 峰,Ar-H).单体的甲酯衍生化同样按上述条件进 行,产物的质子核磁谱数据和混旋体完全一样. 4对映体含量测定 在核磁管中准确加入一定量样品?和CDCI 0.35ml,使其浓度约为0.2mol/L,溶解后测其氢 谱.再称取位移试剂一定量,直接加入样品管中. 振荡溶解后放入核磁探头内.待温度平衡时立即测 谱.再逐渐增加位移试剂量.重复上述操作.在得到 测试对映体含量的最佳条件后,再利用此条件测定 按不同比例人为混和的单体衍生物的回收率. 对映体百分含量由式计算: 一 (+)一对映体一F—]×1oo Ln'+)T【)J R-(一)埘映体一三_×iOO~o c一,和^一分别是一(+)一和一()一对映体 的峰面积. 5结果和讨论 5.1衍生化测定依据 和酯基相比,羧基,醚键与铕离子的配位能力 较差,不能产生较大的诱导位移值.因此未对萘普 @ ? , 墨 f{ 32中国药科大学3O卷 生样品进行直接分析,而是衍生为甲酯化产物. 同时,样品甲酯化产物的酯甲基一COOCHa为定量引 入了一个非常有用的单信号峰.在酸性条件和甲醇 远远过量的情况下,酯化反应快速定量完成,我们 在反应的不同时期利用氢谱监测C-CHa和酯甲基 COOCH~的比率,在回流半小时后比率趋于恒定可 证实这一点.衍生化产物进行氢谱测定前不需纯 化,杂质的存在不影响用核磁共振谱对样品的相对 定量,并且避免了纯化时可能引起的对映体富集. 5.2手性搁系诱导位移 样品和位移试剂的络合平衡在核磁共振时标 内完成,因此测得的图谱是配合物和未配合物的时 间平均图谱0.对映体和手性位移试剂生成的配台 物是非对殃异构体对的混和物,形成非对映异构体 对的络合平衡常数有差异,配合物的空间构型也不 同,就产生了不同的诱导化学位移[用A(A6) 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示 其差值].对于萘普生甲酯样品(1),酯甲基单峰是 H.0 cH一 642 一 个较好定量的信号峰,在一定条件下,当(6) 和分离度都达到一定值时,就能利用NMR法对其 对映体相对百分含量进行定量.和色谱方法相比, NMR法不需纯对映体作参考标准. 在?的结构中,酯基和醚基是可以与铕离子配 合的基团,但醚是较弱的碱,因此在I和?的摩尔 比小于I时,醚不和酯发生竞争性配位.从本实验测 得的氢谱上甲氧基的质子信号未发生分裂也证实 这点.样品中加入位移试剂后,就可观测到各个质 子信号产生了低场诱导位移,图谱得到了简化,特 别是芳氢,原来复杂的多重峰也近似为一级偶台 谱.在逐渐加大位移试剂量时,图谱上部分基团如一 COOCH~,C-CH~等的信号峰产生了手性分裂,观测 到明显的对映体位移差(见图1).通过回收率的测 试实验,可判断其对映体信号归属,例如,对于 一 COOCHs,R-(一)一的峰比s一(十)一的峰移向更低 场;而对于C-CHs,则是一(+)一的峰在低场. 01086—————— Fig1(A)'H~NMRspnumoFmixtureof(+)and(一)一naproxenmethyrL时sincDc『?(B)JHNMRs!~ctrumofamixtureofI_})and (--)一naproxenmethyt鹊*rg,O.17mol/LinCDCI3.af咐comp]~xatZonwith0.3l8molarequ{Ien嘧ofEtt(TFC)s. 5.3最佳位移试剂条件 当样品?浓度为0.17mol/L,在i和?不同的 摩尔比值时,对于一COOCHa和C-CHs的诱导位移 和对映体位移差A(A6)的结果见表1.在I:?<0. 5时谱线诱导加宽效应很小,再加大位移试剂量时, 虽然()值增大,但发生信号峰重叠和显着的诱 导加宽,对定量不- ' r 利.据此我们得出测定l亦即是 萘普生对殃体含量的最佳条件:在样品浓度为0.17 mol/L,在i:l在0.2,0.5之间,特别是在0.318附 近时,可以利用,COOCH~质子信号峰,测定萘普生 的对映体百分含量. 5.4回收率试验 王庆锋等:核磁共振法测定萘普生对映体相对含话 在所选条件下+对由萘普生单体甲酯衍生物不法平均回收率1O0.8.相对标准偏差1.31(一 同比例组成的样品进行测定+结果(见表2)表明本4), 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 了这一方法准确性较高. TabI.Shiftdataf甜amixtureof(十)-and(一)一 naproxenmethyl~tersaftereomple~ationwlthvariousm盯 rati~ofEu(TFC)to:,ubstrat~Total coneenua~onofsul~tratE1nCDCA017mol/L rio~hiftdatabe…thesignalsover]aped Tab2.Recoverytestufthee~miometieeomlx~itioaofsynth~a~mixtureof(4-)and(一)一 naproxenbyHNMRithEucTFc 参考文献 1Sall0~tioBCMeffJnPJ.KnightsKMThester~ospeeificineorpora- tionoffenopzofenintorathepatocyteandadipoeytetrlacylglyecroJs? BnH岍州【撕.t988—3t10):1919 2PirkwH.SikkengaDLReso]utinnofoFtiealisebyliquid chromatoPgaphy.,['M.1976l23:400 3HanllRGMI丑uCamCADetErminationofthee~tiomeTieeompo sitl?ofcyeloprofenbyprotonnucleazmagneticespec— trm~pywithaeurol~um(111)shiftant山曲.【990.1l5 I157 4DewarGH—KwakyeJKParfittR1.OptiealDuritydetermina tionbyNMR:Useofehlra1]anthanideftnbandabaseline techniqueJPlea,1982l(7):802 5Coekeri】lAF.DariesGLO.HardenRC.atL.anthanldsft r眈nbfornuclearmagnetic?n&ncespeelr~cegy~heJ.get. 1973.7(6):553 DeterminationoftheEnantiomericCompositionofNaproxenby NMRwithaChiralLanthanideShiftReagents WangQingfeng,HangTaijun,ZhangZhengxing D删m跏l既cA~.1ysis.ChinaPharm,u~alUnh,ersily,Nanji~21000.9 AbstractAmethodforenantiomeriecompositiondeterminationofnaproxeninasimpleandr eliablemannerby NMRspectroscopywithachiraleuropium(?)shiftreagentwasreported.AfterConversionoftheenantiomeric sampleintoamixtureofmethy1esterderivatives.optimisationoftheexperimentsconditionsintermsofsubstrat~ constractionandshiftreagenttosul~stratemolarratioledtotwosetsofenantiomericresonancesignalsofutilityfor quatitatJvepurpo~,es.Theme'anrecoverywas100.8(N一4),andRSDwas1.31. KeywordsNaproxen;Enantiomeriecomposition;ProtonNMRspeetroscepieanalysis;Chirallanthanideshift reagent