MS培养基的配制
一、MS培养基的配制
1. 培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的10倍或100倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。
2. 按配方表配制MS培养基母液:大量元素50×，微量元素配100×，铁盐、有机成分配制成100×，母液贮存于4?的冰箱中。激素配成浓度为0.1mg/mL.
3. 配制各种母液是，成分顺序加入，上一成分溶解后再加下一成分。钙液和铁盐都单独配制。生长素配制时，先用微量1MNaOH溶解，再以蒸馏水定容;细胞分裂素配制时，先用微量0.1MHCl溶解，再以蒸馏水定容。
二、MS母液配制取作表
序药品名称 MS量扩大倍数 母液量定容 取作量号 (mg/L) (g) (mg/L) 甲NHNO1650 50× 41.25 500ml 20 43
液 KNO 1900 47.5 3
MgSO.7H0 370 9.25 42
KHPO 170 4.25 24
钙无水CaCl 440 100× 11 500ml 20 2
液
乙MnSO.4HO或22.3 100× 1.12 500ml 10 42
液 MnSO. HO 16.9 0.85 42
ZnSO.7HO 8.6 0.43 42
HBO 6.2 0.31 33
KI 0.83 0.0415
铁Na.EDTA.2HO 37.2 100× 1.86 500ml 10 22
盐 FeSO.7H0 27.8 1.39 42
有盐酸吡哆醇(VB) 0.5 100× 0.005 100ml 10 6
机烟酸 0.5 0.005
成甘氨酸 2 0.02
分
丙NaMoO.2HO.2HO 0.25 100× 0.0125 500ml 10 2422
液CuSO.5HO 0.025 0.00125 42
? CoCl.6HO 0.025 0.00125 22
丙肌醇 100 100× 2 200ml 10 液
?
丙盐酸硫胺素(VB) 0.4 50× 0.02 100ml 2 1
液
?
附琼脂5.5-6.5g/L 蔗糖pH5.8-6.2 注 30g/L
备注:1钙液的母液量由于易沉淀所以取11g
2丙液?由于取的量太少所以先去12.5mg,溶于10mL水，再取1mL溶液稀释 三、注意事项
1、药品的质量问题:
为了避免杂质及有害物质对组织培养的影响，必须注意药品质量，国内药品采用国际上通用标准，分为:
一级，即保证试剂、优质纯试剂Guaranteed Reagent, GR级;
二级，即分析纯试剂，Analytical Reagent, AR级;
三级，即化学纯试剂，Chemical Pure, CP级;
四级，即实验试剂，Laboratory Reagent, LR级。
各级均有一定的杂质含量限制范围，其它特殊用的试剂也有特殊的标记，如光谱纯、层析用、组织培养用等。植物组织培养一般用分析纯级试剂。 2、如药品所带结晶水不同，应进行换算。
3、称量必需准确，一般用1-4/万的分析天平称量，特别如微量元素及激素等，但有些药品不影响基本反应过程的如蔗糖、琼脂等可用1/100粗天平称取。 4、所用的水必须纯净，一般用全玻璃蒸馏器二次蒸馏的重蒸水或者达到一定标准的无离子水。
5、制备好的浓缩液应保存于冰箱中，储备液配置量要依据使用频度而定，一般所制备的储备液最好于1-2个月内使用完，不宜过长时间保存。
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