仙人掌药用成分的提取及其镇痛作用的实验研究

仙人掌药用成分的提取及其镇痛作用的实验研究 仙人掌药用成分的提取及其镇痛作用的实 验研究         &nb sp;   作者:韦国锋～ 李振中～ 黄祖良～ 何有成  【关键词】  仙人掌,,,药用成分,,,提取,,,药理,,,镇痛 摘要:目的对仙人掌药用成分的提取工艺及镇痛作用进行探讨。方法 采用乙醇提取～醋酸乙酯等有机溶剂萃取～经硅胶柱层分离～得到淡黄色物质～并对该物质进行了化学定性分析和小鼠镇痛作用实验。结果经化学定性分析～ 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明这种药用成分中含有黄酮类物质～其镇痛作用与阿司匹林和生理盐水比较:扭体法χ2分别为5.19～9.68,P<0.05或0.001,,温浴法P<0.01或P<0.001。结论仙人掌植物中含有黄酮类物质～对小鼠具有显著的镇痛作用。 关键词:仙人掌,  药用成分,  提取,  药理,  镇痛 Studies on Extraction and Analgesic Effect of Medicinal Components in Opuntia dillenii Haw Abstract:ObjectiveTo investigate the extract processing and the analgesic effect of medicinal components in Opuntia dillenii Haw.MethodsThe chemical quantitative analysis and the analgesic effect on mice were carried out on a primrose yellow material which was extracted by ethanol, ethyl acetate and chromatographically separated by silica gel column.ResultsA flavonoid chemical compound was found and the χ2 were 5.19( P< 0.05 or 0.01) in writhing tests,P< 0.01 or 0.001,, 9.68 in lukewarm bath procedure while compared its analgesic effect with aspirin and normal saline.ConclusionObvious analgesic effect on mice is found in Opuntia dillenii Haw. Key words:Opuntia dillenii Haw;  Medicinal Components;  Extraction;  Pharmacology;  Analgesia     仙人掌是仙人掌科仙人掌Opuntia dillenii Haw的 根和茎～其味苦、寒～入心、肺、胃三经～具有活血行气、 清热解毒之功效～主治心胃气痛、痞块、肺痈、乳痈、烫火伤、蛇伤等,1, 。由于仙人掌资源丰富～具有较强的药理作用～深受人们的青睐。近年来的研究表明～仙人掌具有抗炎、消肿、抑菌作用和有抗脂质氧化以及降血糖的作用,2~4, 。课题组曾对仙人掌的降血压作用和镇痛作用进行了初步探讨,5,。在此主要针对仙人掌镇痛成分的提取工艺以及镇痛作用作进一步的研究。 1  材料 1.1  仙人掌 采自广西那坡县石山区。 1.2  动物小鼠由本院实验动物中心提供。 1.3  仪器 电热恒温水浴锅～北京长原实验仪器厂,秒表～上海秒表厂,鼠筒～自制,2FA02旋转蒸发仪～上海玻璃仪器厂,层析柱。 1.4  试剂乙醇,阿司匹林片～广西南宁制药企业集团公司生产,醋酸,氯仿,醋酸乙酯,生理盐水,三氯化铁,乙酸镁,三氯化铝,硅胶～青岛海洋化工厂。 1.5  统计学处理 计数资料采用χ2 检验～计 量数据以〒s表示～采用t检验。 2  方法 2.1  仙人掌药用成分的提取与分离仙人掌粉 碎70%EtOH        回流3次提取液减压回收        EtOH醇提取物 H2O           混悬液氯仿、醋酸乙酯、        正丁醇萃取萃取 液减压回收       溶剂 取正丁醇部分    上硅胶柱H2O洗1次            再用氯仿甲醇水洗脱     洗脱液减压回收       溶剂粗提取物    EtOH         活性炭脱色淡黄色物质。 2.2  提取物的定性分析 2.2.1  乙酸镁实验 取样品溶液1滴～滴于滤纸上～滴乙酸镁试液1滴～晾干于365 nm灯下观察呈淡蓝色荧光。 2.2.2  三氯化铝实验 取样品溶液1滴～滴于滤纸上～滴三氯化铝1滴～晾干于365 nm灯下观察～出现亮黄色荧光。 2.2.3  三氯化铁实验 取样品溶液与三氯化铁反应呈绿色。 2.2.4  浓氨水实验 取样品溶液1滴～滴于滤纸上～晾干～再用浓氨水熏～颜色加深。 2.2.5  络合反应实验 取样品溶液与亚硝酸钠溶液、硝酸铝溶液、氢氧化钠溶液反应呈樱红色。 2.2.6  TLC定性0.5%CMCNa、硅胶G制板～对照品及样品溶液点样～用70%乙醇展开后～晾干～紫外线,365 nm,下观察～在相同位置 1出现相同的斑点。 2.3  提取物的镇痛实验 2.3.1  扭体法取小鼠75只～体重为16~18 g。雌雄不拘～随机分为3组～每组25只。分别予腹腔注射仙人掌提取物、阿司匹林和等量生理盐水各1 ml/只～给药1 h后～各鼠腹腔注射醋酸溶液0.2 ml/只～观察15 min内小鼠的扭体数。 2.3.2  温浴法,6,取小鼠45只～体重为16~18 g～雌雄不拘～随机分为3组～每组15只。分别予腹腔注射仙人掌提取～阿司匹林和等量生理盐水各1 ml/只。用特制鼠笼装置～将小鼠装入固定的筒内～然后把小鼠尾部浸入50?的水浴中～以尾部回缩作为痛反应～以在温水浴中反应时间延长或痛阈提高(%)表示痛反应。观察给药前后20～30～60 min的痛阈潜伏期。 3  结果 3.1  仙人掌提取物对扭体法小鼠疼痛的影响实验结果显示～仙人掌提取物对扭体法致小鼠疼痛具有显著的镇痛作用～与阿司匹林和生理盐水组比较差异有显著性,P ,0.05或P,0.001,。结果见表1。 3.2  仙人掌提取物对温浴法致小鼠疼痛的影响 结果显示～仙人掌提取物给药后不同时间痛阈潜伏期明显优于生理盐水和阿司匹林组,P,0.01或P,0.001,。结果见表2。 表1   仙人掌提取物对扭体法致小鼠疼痛的影响,略, 与生理盐水组比较～aP<0.001,与阿司匹林组比较～bP<0.05～n=25 表2   仙人掌提取物对温浴法致小鼠疼痛的影响,略, 与生理盐水组比较～aP<0.01～bP<0.01～cP<0.001,与阿司匹林组比较～dP<0.01～eP<0.001～n=15 4  讨论 仙人掌植物中含有多种活性成分～其中较重要的有生物碱、黄酮类、甾醇类等化合物～此外还有多糖、有机酸类等。本次实验主要是针对仙人掌植物中的黄酮类化合物进行提取。定性实验结果表明～按此法对仙人掌进行提取分离～结果得到黄酮类化合物～但是哪一种黄酮化合物～还需要作进一步的研究。特别是仙人掌植物中黄酮的含量还需进一步测定。因为黄酮类化合物具有多种多样的生理活性～从而引起了国内外学者的高度重视～对黄酮类化合物的研究日益广泛。本次镇痛实验表明～从仙人掌植物中提取得到的淡黄色物质～确实对小鼠具有显著的镇痛作用。对醋酸刺激导致小鼠产生腹膜炎症产生疼痛～该淡黄色物质更能减少小鼠扭体次数与阿司匹林和生理盐水组比较,P<0.05或P<0.001,,温浴法实验结果也表明仙人掌提取物对小鼠痛反应有抑制作用～给药后不同时间痛阈潜伏期长于阿司匹林组和生理盐水组～P<0.01或P<0.001～但仙人掌提取物的镇痛作用机理有待于进一步研究。 参考文献: ,1,  全国中草药汇编编写组. 全国中草药汇编,M,. 北京:人民卫生出版社～1975:275. ,2,  陈淑冰～唐雨文.仙人掌抗炎作用的研究,J,.中药药理与临床～1991～7,6,:33. ,3,  陈淑冰. 仙人掌抗脂质过氧化作用的研究,J,.中药药理与临床～1997～13,3,:36. ,4,  蒋建勤～李佩珍. 仙人掌提取物降血糖作用研究,J,.基层中药杂志～1996～10,1,:40. ,5,  覃特营～韦国锋. 仙人掌三萜皂甙镇痛作用的研究,J,. 右江民族医学院学报～1995～17,4,:399. ,6,  徐叔兰～卞如廉～陈  修. 药理实验方法,第2版,M,. 北京:人民卫生出版社～1991:695.