改良双缩脲法测定食品中蛋白质含量 &nbsh1; 改良双缩脲法测定食品中蛋白质含量 异丙醇的加入量确定: 分别加入...
分别加入 3ml 蛋白质标准溶液,各加入 1ml、3ml、5ml、7ml、10ml,12ml 异丙醇,加入 10ml 双缩脲试剂,用水定容至 25ml,60℃水浴振荡 5min,3500-4000Z/min 离心 10min,目视比浊,发现加入 7ml、10ml,12ml 异丙醇的样液最清亮,分别加入 1.0ml、3.0ml、5.0ml 的样液离心后有雾状混浊,为了确保显色效果,确定异丙醇加入量为 10ml。
为了确定其它参数,先按下述方法绘制曲线。分别取 0.0 ,0.5 ,1.0, 1.5, 2.0, 2.5 ,3.0 ,3.5, 4.0ml 蛋白质标准溶
液,分别相当于蛋白质含量为 0.00 6.625 13.25 19.88.26.50 33.13 39.75.46.38 53.00 mg,10ml 异丙醇,其它操作同 1.3.2.1,并于 550nm 处测 ABS,结果见表 1。
表 1
编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
样液体积 ml |
0 |
0.5 |
1 |
1.5 |
2 |
2.5 |
3 |
3.5 |
4 |
蛋白质含量 mg |
0.000 |
6.625 |
13.250 |
19.880 |
26.500 |
33.130 |
39.750 |
46.380 |
53.000 |
吸光度 |
0.000 |