水产品中呋喃唑酮、呋喃西林药物残留的HPLC法测定

812中国卫生检验杂志2006年7月第l6卷第7期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Jul2006；Vol16No7【化学测定方法】水产品中呋喃唑酮、呋喃西林药物残留的HPLC法测定吴富忠，欧阳立群(浙江省舟山市疾病预防控制中心，浙江舟山316000)[摘要]目的：建立用高效液相色谱法(HPLC)同时测定水产品中呋喃唑酮与呋喃西林药残的方法。方法：样品经二氯甲烷一丙酮(8+2)提取，无水硫酸钠脱水过滤、蒸干，乙腈一水(3+7)溶解，正己烷脱脂净化，用液相紫外检测器测定。结果：实验 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明，该方法检测线性范围为0．10—2．0oec'na，最低检出限分别为0．01、0．02oec'na；若取10．0g样品提取定容至1．0ml测定，对应的最低检出浓度分别为1、2la,g／kg；线性相关系数均大于0．999，平均回收率约85％，相对MATCH_ word word文档格式规范word作业纸小票打印word模板word简历模板免费word简历 _1716056512937_0偏差小于10％。结论：该方法操作简单，呋喃唑酮检测限较SN0530—1996(出口肉中呋喃唑酮残留量检验方法》有明显提高，且能同时测定呋喃西林，是水产品中呋喃唑酮、呋喃西林原药残留快速准确的检测方法。[关键词]呋喃唑酮与呋喃西林；高效液相色谱法；水产品[中图分类号]0657．72[文献标识码]A[文章编号]1004—8685(2006)07—0812—02呋喃唑酮(Furazolidone)、呋喃西林(Furacilin；Nitrofura—zone)是常见的抗菌药，对人体具有致癌效应。在水产养殖中，常用于消毒和细菌性疾病预防与治疗。残留在水产品中的原药及代谢产物通过食物链的传递，对人体健康产生危害。国际食品法典委员会(CAC)的兽药残留委员会(CCBVDF)、欧盟、美国、日本等一些发达国家规定动物源性食品中不得有硝基呋喃残留，并禁止将呋喃唑酮、呋喃西林作为药物添加在饲料中。同许多国家一样，我国农业部制订的NY5070—2002《无公害食品水产品中鱼药残留限量》及GB18406．4—2001《无公害水产品安全要求》规定，水产品中不得检出呋喃唑酮，同时禁止在饲料中添加。现有的SN0530—1996(出口肉中呋喃唑酮残留量检验方法》等检测方法只能测定呋喃唑酮。我们通过实验，选用二氯甲烷一丙酮提取、浓缩、溶解，用正己烷净化，HPLC—UV检测器在365nm同时检测。[作者简介]吴富忠(1964一)，男，主管技师，主要从事卫生理化检验工作。1材料与方法1．1仪器Agilentl100液相色谱仪(美国安捷伦公司)；高速组织捣碎机；旋转蒸发仪；超声波提取器或漩涡混合器；氮吹仪。1．2试剂乙腈(美国Sigma化学试剂公司)，AR级二氯甲烷、丙酮、正己烷、无水硫酸钠、乙酸；超纯水。标准储备液：称取呋喃唑酮(Sigma—Aldrich公司)10．0mg溶于乙腈一水(3+7)中并定容至100ml，浓度为100IIll；呋喃西林(100IIll；Sig—ma—Aldrich公司)；临用时用乙腈一水(3+7)稀释成10／IIll混合使用液。1．3色谱条件检测器：UV；检测波长：365nrn；色谱柱：AgilentSB—C8150×4．6mill5I．zm；流动相：乙腈一1％乙酸水溶液(3+7)；流速0．8ml／min；柱温：20~C；进样量20；停止时间：6min。1．4实验方法1．4．1试样测定取水产品可食部分，用组织捣碎机捣成匀浆。称取试样约10g(精确至0．01g)于100ml锥形瓶中。加(上接第811页)2．11．2新酚试剂比色法与国标法的方法比较见表5。表5新酚试剂比色法与国标法的方法比较3小结新酚试剂比色法测定工作场所空气中的甲醛，方法简单、方便、稳定，并且新酚试剂比色法与国标法比较在测定结果上无显著性差异，新酚试剂比色法具有较好的精密度和准确度，较高的采样效率，线性范围为0．10—2．50，最低检出浓度为0．02ms／m，适合工作场所空气中甲醛的13常检测工作。[参考文献][1]GBZ／TI60．54—2004．工作场所空气有毒物质测定脂肪族醛类化合物[S]．[2]GB／T18204．26—20O0．公共场所空气中甲醛测定方法[S]．[3]曲建翘，薛丰松，蒙滨．室内空气质量检验方法指南[M]．北京：中国标准出版社。2002．(收稿13期：2006一Ol一09)维普资讯http://www.cqvip.com中国卫生检验杂志2006年7月第l6卷第7期ChineseJournalofHealthlaboratoryTeehnology，Jul2006；Vol16No7813二氯甲烷一丙酮(8+2)液25rnl，在超声波提取器或漩涡混合器上提取5min，提取液通过无水硫酸钠层析柱过滤于蒸发瓶中，再加入25rnl二氯甲烷一丙酮混合液重复二次上述操作，用少量提取液淋洗无水硫酸钠柱，滤液经旋转蒸发仪在50℃水浴减压蒸发至约3—4rnl，移人10rnl具塞离心管，每次用2ml提取液洗蒸发瓶二次，并人离心管，用氮吹仪在50℃吹干。准确加入1．0ml乙腈一水(3+7)溶解残渣，加入1ml正己烷，在漩涡混合器上混匀1min，静止或离心分层后，用吸管移去上层正己烷层，重复上述净化步骤数次。处理后的下层清液经0．45m滤膜过滤至自动进样器样品瓶中，进样20测定。1．4．2标准曲线绘制准确吸取10．0／rIll混合标准溶液0、0．10、0．25、0．50、1．0、2．0ml，用乙腈一水混合液稀释至10rnl，制成0、0．10、0．25、0．50、1．0、2．0／rnl的标准系列溶液，分别进样20。以呋喃含量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。2结果与 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 2．1实验条件选择2．1．1提取剂选择按照SN0530—1996“出口肉中呋喃唑酮残留量检验方法”，在样品中加入1lzg标准用二氯甲烷提取测定，其提取回收率较低，只有约70％；根据二者的化学物理性质，分别用二氯甲烷一丙酮、二氯甲烷一乙腈、二氯甲烷一乙酸乙酯提取，回收率基本相同(约85％)。所不同的是用二氯甲烷一丙酮提取时，当丙酮的比例超过20％时，有一部分水分被提取出来不能完全脱去；而用二氯甲烷一乙腈与二氯甲烷一乙酸乙酯提取，旋转蒸发的水浴温度需提高到80％。本法提取剂选用二氯甲烷一丙酮(8+2)。2．1．2色谱流动相的选择高效液相色谱法中流动相的选择随色谱柱和分离对象的不同而不同。本方法选用乙腈一1％乙酸水溶液作为流动相，并对其比例进行了选择性实验。试验结果表明，当乙腈比例大于40％时，出峰太快，两成分问分离不完全；乙腈比例小于20％时，出峰时间延长，峰底加宽，峰形变矮。本实验确定乙腈与1％乙酸的配比为3+7，加乙酸的目的是避免呋喃唑酮遇碱分解。2．1．3测定波长的选择经紫外扫描，呋喃唑酮在365nm有强吸收；呋喃西林在250nln和375nm有强吸收，经试验，波长在365—375nm时，信号值较稳定。本实验选用365nm检测波长。2．1．4柱温与流速选择分离柱温度高低与流动相流速快慢对被测成分分离与出峰信号产生影响。经试验，流速比柱温对两者分离与出峰的影响大。本文选择柱温20~C、流速0．8ml／min。2．2线性范围与最低检出限在本实验条件下，呋喃唑酮、呋喃西林的含量在0．10—20~e,／ml范围，标准含量与峰面积有良好的线性关系，呋喃唑酮、呋喃西林相关系数分别为Q9996、0L9991。标准色谱图见图1。l时间(rain)图1呋喃唑酮、呋喃西林药物标准色谱图l：呋喃唑酮；2：呋喃西林取浓度为0．50／rnl标准溶液进样20分析，以2倍噪声计算呋喃唑酮、呋喃西林最低检出限分别为0．01、0．02g／rnl。若取10．0g样品提取定容至1．0ml测定，对应的最低检出浓度分别为1、2／kg。2．3方法提取回收率试验取10g左右的虾仁与鳗鱼匀样，分别加入1．0rnl的混合标准液0．10、0．50、1．00ml，其平均回收率：呋喃唑酮为82．6％一87．9％、呋喃西林为79．2％一88．5％。2．4方法精密度试验在混匀的虾仁与鳗鱼样品中，分别加入O．1O、O．50、1．0lzg标准，各测定6次，RSD在4．23％～8．95％之间。暑O暑Zl23456时间(rain)图2样品+标准色谱图234时间(rain)虾仁样品色谱圈奏墨时间(rain)圈4鳗鱼样品色谱圈3讨论本文用二氯甲烷一丙酮混合液提取水产品中呋喃唑酮、呋喃西林，提取液经蒸干后，溶于乙腈～水溶液，无需SPE柱净化，不同浓度的变异系数均在10％内，方法最低检出限较SN0530—1996“出口肉中呋喃唑酮残留量检验方法”有很大提高，且能同时检测呋喃西林，能基本满足水产品中呋喃唑酮、呋喃西林原药残留的检测要求。[参考文献][1]SN0530—1996．出口肉中呋喃唑酮残留量检验方法[s]．(收稿日期：2006—04一l7)l3瞳O维普资讯http://www.cqvip.com