一、PBS缓冲液1.1母液的配制:0.2MNa2HPO4:称取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:称取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水1.2不同PH值PBS配制各种PH值的0.2MPBS(100ml)配方:pH 0.2MNaH2PO4(ml) 0.2MNa2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml0.2MPBS为例,先配制母液,按照配方
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分别取19ml0.2mol/L的NaH2PO4和81ml0.2mol/L的Na2HPO4,混合即可。1.3不同浓度PBS的配制只需将0.2MPBS按相应比例适当稀释即可,如:0.1MPBS(PH=7.4):取500ml0.2MPBS,加水稀释至1000ml即可。0.01MPBS(PH=7.4):取50ml0.2MPBS,加水稀释至1000ml即可。0.02MPBS(PH=7.4):取100ml0.2MPBS,加水稀释至1000ml即可。若需要NaCl的话,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。 二、Tris-HCl缓冲液 某一特定pH值的0.05mol/LTris缓冲液的配制:将50ml0.1mol/LTris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/LHCl混合,加水将体积调至100ml即可。(至于配制0.1MHCl就是8.58ml浓盐酸用蒸馏水定容到1000ml啦) 各种ph值的tris缓冲液的配制 所需ph值(25℃) 0.1mol/lHCl的体积/ml 7.1 45.7 7.2 44.7 7.3 43.4 7.4 42.0 7.5 40.3 7.6 38.5 7.7 36.6 7.8 34.5 7.9 32.0 8.0 29.2 8.1 26.2 8.2 22.9 8.3 19.9 8.4 17.2 8.5 14.7 8.6 12.4 8.7 10.3 8.8 8.5 8.9 7.0