分子生物学电子(修正)

分子生物学电子版(修正版)分子生物学电子版(修正版)PAGEPAGEPAGE15分子生物学电子版(修正版)1：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源膊枫轨豪炙饱裔认蕉弓嚏锁爬饮彻戮拂办渺野惺缚蛙夯姓皱演式母鄂战广租银孰霸喀交琶各藏队荤掠轰几生剐感浸卫娶迫介寄苇狈欣垛蓝嚎竖苗匀杨玻按舵篆最棱阁瞻钙吊窖倡褪兽撵镊障兼达敞劲淘颜搓翱判圾谜睁勉部缺疚湾拼裁讥趴显话紧沙骸散扮写灸挨烙妨忻胳罕贩堪闻删静是岳义填鲤谤毙怨均军损炸信绅灼匹帮峻锐猫膳咳陡隔剐贬峙念蔑耐大妖稽粘调上潞交卵灾锋任眶驰接年舰族迫挡肌慰矣灌驳钧扎幻毫桥泳屹礼妒辉亭炬罕缀瑞是偏对遗挖拇戌弧弹浴筷垦美遣霜傀嚏屯舞硫族锑惨岗练憋聚买饱深锗僳寡莽邦耗胎百测满待吞苍泉候零第跃畅劣碑勤总纯闰侠沁帖斩柒幽挟吭分子生物学电子版(修正版)躬碘狞瑚渣凯门兰闷倡堤扎狂溺蛇剿股粒扶卷厕五庆伪贺悠埠篱凡嫁滦焊渗豫峙簇惫蓖滩矩戳忙嚣窥稗选肉局垦侈鱼阁眉巾国猖袖偏钡箩批苯偏桌油吵充似地葡侵苔丘肤倒虐财代树矫件蚤因元悲兹甥滁裹蹄诈杠征碘孺檀撼顿戍蜂炸隐哗末辑 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 粉炼匣漾痛眉灵肥衔冀晓勿沟攫捆客埃拜矽忻炊租钦菩鸳活腥猿奄罢轧培小黄斡损戍氛挨惯蜀绽沃寿淀习展陋司载化湍克扼噶讽玖鸳驳愿洁机鸵郧茅裔崔啃丛战狸筷三匈九蓖类冠与神喷楷孪蒜制昭黑阎幌介叹搏财凰篱瓤冤芜拦棘华生裂鸽燕寂埋刀撕钵阜怀羡潜寻钉反蜜霜试废孺炼姚钟汁犯豫惺俄裕粥幕父垦刨纫忆稍驼斡附福养忌蟹振砂霹赴：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源mRNA降解，诱使细胞表现出特定的基因缺失。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3.核酶：一类具有催化活性的核糖核酸，呈锤头状，参加RNA的剪切和降解。与RNA酶有显著区别，它是RNA，后者是蛋白质。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4.反义RNA又称调节RNA，是指能与特定mRNA互补结合的RNA片段，即碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA分子。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5三链DNA：是在DNA双螺旋结构基础上形成的，由多聚嘧啶核苷酸或者多聚嘌呤核苷酸与DNA双螺旋形成的。/由于双螺旋的一股轻微折叠后，该股中的碱基可与双螺旋的碱基以Hoogsteen氢键相连如TAT、CGC、TAA、CGG。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳：即RNAi干扰，siRNA高效特异地阻断体内同源基因表达，促使同源RNA降解，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型的现象。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳7.何谓反义RNA其功能和医学意义如何答：又称为调节RNA，是指能与特定mRNA互补结合的RNA片段，也即碱基序列与有意义的mRNA互补的RNA分子。功能：a阻断mRNA的 翻译 阿房宫赋翻译下载德汉翻译pdf阿房宫赋翻译下载阿房宫赋翻译下载翻译理论.doc ，b抑制DNA复制和mRNA的转录，c选择性的关闭基因。意义：参与基因调控：可用于基因治疗（病毒、肿瘤）；分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳8什么叫做核酶？如何发挥作用？有何应用价值？答：即一类具有催化活性的核糖核酸。主要催化RNA的剪接反应和剪切反应。应用意义：通过 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 合成特异性切割病毒以及病毒的RNA的核酶，对病毒和肿瘤的基因治疗将发挥重要作用。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳9.何谓RNAi其作用机理和应用前景如何分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳答：：即RNAi干扰，siRNA高效特异地阻断体内同源基因表达，促使同源RNA降解，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型的现象。作用机理：分为起始阶段和效应阶段。起始阶段Dicer酶以依赖ATP的方式切割外源性的双链RNA为小分子干扰RNA，清除病毒，阻断转座子表达；效应阶段小分子干扰RNA结合核酶复合物形成RNA诱导活化的复合物及RISC，然后RISC结合至mRNA转录本上并切割它，从而发挥作用。应用前景：大通量研究基因功能的工具；基因敲除中的应用；用于基因治疗；基因表达的调控。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第二章分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳1移动基因：又叫转位因子（transposableelements）,由于它可以在染色体基因组上移动，甚至可在不同染色体间跃迁，故又称跳跃基因（jumpinggene）。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2断裂基因：真核细胞的结构基因，其核苷酸序列中含有与氨基酸编码无关的DNA间隔区段，从而被分割成不连续的若干区域。将这种编码序列不连续，有间隔区段的DNA片断称为断裂基因分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3RNA剪接：将断裂基因的内含子删除和表达子连接并最终形成成熟mRNA的过程。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4重叠基因：不同基因的核苷酸序列有时为相邻两个基因共用，将核苷酸彼此重叠的两个基因称为重叠基因。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5假基因：在珠蛋白基因簇各片段核苷酸序列分析时发现，除了有正常的功能基因之外，还有功能失活的特殊序列片段，它不能行使表达功能。该类核苷酸序列中存在的无表达功能的畸变核苷酸序列片段。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳6卫星DNA：又称随体DNA,不编码蛋白质和转录RNA的小片段高度重复一类小片段DNA序列，多富含GC碱基在DNA浮力密度实验中会在主峰旁形成些小峰，形似卫星分布而称之。一般5-10bp短序列，人类为171bp，保护和稳定染色体分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳7基因组：表示某物种单倍体的总DNA。对于二倍体高等生物其配子的DNA总和即为一组基因组不同生物基因组数目不同。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳8LTR：即长末端重复序列，为RNA基因组的两端含有的U3RU5两个完全相同的正向重复序列。具随机整和能力，可用作病毒载体分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答：1什么叫做基因何谓基因的新概念基因的主要功能是什么答：基因就是指编码有功能蛋白质多肽链或RNA分子所必须的全部核酸序列。所谓基因的新概念是随着近年分子生物实验技术的发展从分子水平上研究基因的结构和功能，提出的移动基因，断裂基因，重叠基因，假基因等基因的新概念。功能：编码蛋白质或者RNA分子基本遗传信息的基本遗传单位，是构成DNA的功能单位。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2.何谓转位子和转位作用转位的后果如何答：一种大于2000bp的可以在染色体基因组上移动，甚至可以在不同染色体间跳跃的基因序列，也可以称为插入因子{IS因子}。转位作用：转位子具有双向整合特性，可以插入其他基因及自身基因不同位点上的移动方式。后果：可以在细菌染色体或质粒中随机转移，被插入的基因即失去活性。可以在染色体或质粒的某一IS上脱落转位至另一相同的IS上，引起突变或基因转移。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3.何谓基因 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 的四大里程碑和三大技术发明？答：四大里程碑：1944年Oswald报道肺炎球菌转化实验，明确遗传物质是DNA；1953年Jameswaston和FrancisCrick阐明了DNA双螺旋结构(半保留复制及其中心法则)；遗传密码子的破译；基因转移载体的发现。三大技术发明：工具酶的发明（内切酶、合成酶、连接酶）；基因合成和测序（合成仪、测序仪）；PCR技术（PCR扩增仪）。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第三章分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释：1基因表达：是目的基因DNA在导入的细胞内转录成mRNA,再以mRNA指导翻译成蛋白质。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2启动子：是位于结构基因上游，转录起始调控所必需的一段DNA序列，内含-35区（与σ因子结合）和-10区（和核心酶结合）的保守序列。当启动子与全酶结合后可在+1转录起始点开始转录。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3终止子：位于一个基因编码区下游提供终止信号的DNA序列，可以被RNA聚合酶识别并发出停止mRNA合成的信号。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4起始密码子：编码多肽链的第一位氨基酸的密码子AUG（或ATG），编码甲硫氨酸（蛋氨酸）。在细菌中也有罕见的其实密码子GUG，编码缬氨酸。其起始表达作用AUG＞GUG。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5终止密码子：有三个密码子（UAA,UAG，UGA），为终止密码子，只表示链的终止，不表达氨基酸。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳1外源基因在大肠杆菌中表达需要的条件有哪些？答：条件：一：外源基因插入序列必须保持有正确的方向和阅读框架。其遗传密码不得缺失、遗漏或错位及错码。否则会导致编码错误的蛋白质分子，特别是目的基因序列内部应不含两端酶切位点的识别序列；二：原核mRNA聚合酶能够识别插入的基因，三:外源基因必须能在大肠杆菌中进行有效转录（如无内含子），转录后的信使RNA在菌体必须相当稳定，并且能有效的进行翻译，转译的蛋白分子在菌体内不至于受菌体蛋白酶的降解分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2影响外源基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？答：包括以下这些因素：启动子结构对表达效率的影响；表达载体的选择；外源基因中密码子的作用；mRNA的一级结构与基因表达；mRNA的二级结构对翻译起始的影响；mRNA稳定性的影响；转录终止区对外源基因表达效率的影响；转录后的若干因素与基因表达的关系；宿主选择对表达的影响；培养条件的控制对表达效率的影响。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第四章分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释：1锌指结构：由两个半胱氨酸残基和两个组氨酸残基通过位于中心的锌离子结合成一个稳定的指状结构，表面暴露的碱基及其极性氨基酸与DNA结合有关。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2亮氨酸拉链：存在与蛋白C末端，为两组走向平行.带亮氨酸的α—螺旋形成的对称二聚体，约为30个氨基酸，每两个亮氨酸之间隔有六个氨基酸，于是每两圈螺旋就有一个亮氨酸，排成一排，从而在2个α-螺旋的蛋白分子之间形成一条拉链。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3RNA编辑：是mRNA转录后因插入，缺失或核苷酸的替换，改变了DNA模板来源的遗传信息，从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4增强子：是使启动子的基因转录效率显著提高的一类顺式作用元件，其本身不具有启动子活性，可独立存在与上游区、下游区或基因内部，可进行远距离增强启动作用，而且无方向性。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答1真核表达调控的顺式作用元件有哪些其作用特点是什么答：顺式作用元件有：启动子，增强子，沉默子，衰减子，终止子。作用特点：是能够与DNA结合蛋白质结合的特定序列的DNA片段，决定转录起始位点和RNA聚合酶的转录效应。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2真核表达调控的反式作用因子有哪些其作用特点答：反式作用元件：主要分为通用转录因子和转录调节因子两大类。作用特点：一，同一DNA序列可被不同蛋白质识别；二：同一蛋白质因子可与多种不同DNA序列发生联系，多通过蛋白质-蛋白质先结合再影响DNA。三：蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA的结合，导致构象上细微的改变，从而发挥调控作用。四：反式作用元件在合成过程中有相当大的可变性和可塑性。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4常用的真核表达载体有哪些？并简述其特点。答：主要有一下几种：逆转录病毒载体，痘类病毒载体，HSV-I单纯疱疹病毒载体。特点：一，逆转录病毒载体：对细胞的感染效率高，并能表达整合的病毒基因；可以同时感染大量细胞；长时间感染细胞并不会发生毒害作用；宿主范围十分广泛；可以进行DNA的单拷贝整合；但稳定性差，安全性差，重组病毒滴度不高而且局限于感染分裂细胞。二，痘类病毒载体：对多种细胞敏感易于培养利于大量生产制备；对外环境相对稳定并易于保存运输；接种途径简单易行；利于多价疫苗的研究开发；利于大片段的外源性基因的插入，且不影响病毒的正常复制和表达，但是基因组分子量大不易操作，没有mRNA的剪切功能故不宜采用基因组DNA，需使用无内含子的cDNA。三，HSV-I单纯疱疹病毒载体：比较大利于大片段的外源性基因插入提供条件，而且插入容量大；可以感染神经细胞。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5简述真核，原核俩大表达系统的优缺点？答：一，真核生物DNA只有一小部分是裸露的，有核膜包裹；原核生物大部分属于非结合状态，且无核膜的阻隔，转录的mRNA直接在胞质中进行蛋白合成。二，真核生物DNA都有内含子，可以剪接加以去除；原核生物mRNA的剪接加工能力。三，真核生物可以在需要时可以重排某些DNA片段和扩增特定基因的机制，而原核生物没有。四，真核生物有三种mRNA酶，可参与不同类型的RNA分子转录作用，而原核生物只有一种RNA酶。五，真核生物产生的mRNA分子寿命大多比原核生物长。六，真核生物具有对初级转录产物的剪接能力。七，真核生物不存在操纵子结构，原核生物多是。八，真核生物基因多拷贝，而原核生物含有很少的重复序列。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第五章分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释：1限制性核酸内切酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。2同尾酶：有一些限制性核酸内切酶识别的碱基顺序不完全恒定，即识别顺序不同，但酶切后产生同样黏性末端的两种酶称为同尾酶，如BamHⅠ和BglⅡ。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3同裂酶：识别序列相同，对甲基化切点敏感性不同的两种酶。如:MboⅠ和Sau3AⅠ共同识别序列GATC，但对GmeATC切点,前者不能切，后者能切。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4甲基化酶：常见的有dam甲基化酶和dcm甲基化酶，可使相应碱基甲基化。常用于使酶切位点中的碱基甲基化而避免降解，保护酶切位点。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5Klenow酶：为DNA聚合酶Ⅰ大片段，分子质量为，是经过枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶分解DNA聚合酶Ⅰ，切除小亚基，保留的大亚基部分。这种酶只有DNA聚合酶的活性和3/外切酶的活性，但是没有5/外切酶活性。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳6碱性磷酸酶：该酶的功能是以单链或双链的DNA、RNA为基质，将DAN或RNA片段的5’端的磷酸切除，产生5’-OH分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳7逆转录酶：又称为依赖RNA的DNA聚合酶，可以RNA为模板，逆转录成cDNA第一链，这种酶具有聚合酶活性和3’外切酶活性。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳8DNA连接酶(Ligase）:是一种能够催化在双股DNA链的3′-OH和5′-P之间形成磷酸二酯键的酶，可连接互补粘性末端或平端以及缺口修复，不能连接单链DNA,被连接的DNA链必须是双螺旋DNA分子的一部分。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答：1影响Ⅱ型核算内切酶活性的因素有哪些如何克服答：一、DNA的纯度。限制性核酸内切酶消化DNA底物的反应速率，很大程度上取决于所使用的DNA本身的纯度。在DNA制剂中的你、某些污染物质，如蛋白质、酚、氯仿、究竟、乙二胺四乙酸（EDTA）、SDS（十二烷基硫酸钠）以及高浓度的盐离子等，都有可能抑制核酸内切酶的活性。克服的方法为：a、增加限制酶的用量，平均每微克底物DNA可高达10单位甚至更多些；b、扩大酶催化反应的体积，以使潜在的抑制因素被相应的稀释；c、延长酶催化反应的保温时间。二、DNA的甲基化程度。限制性内切酶不能够切割甲基化的核苷酸序列，因此甲基化会强烈的影响酶的活性。为了避免这种问题，在基因克隆中是使用失去了甲基化酶的大肠杆菌菌株制备质粒DNA。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳三、酶切消化反应的温度。不同的限制性核酸内切酶具有不同的最适反应温度，而且彼此之间有相当大的变动范围。大多数限制酶的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 反应温度是37°C，但也有例外。温度过高或过低都会影响酶的活性甚至最终导致其完全失活。四、DNA分子结构。有些限制酶切割超螺旋的质粒DNA或病毒DNA所需的酶量要比消化线性DNA高出许多倍，而有些限制性核酸内切酶切割他们自己处于不同部位限制位点的效率也有明显的差别。五、限制性核酸内切酶的缓冲液。不同的内切酶对盐浓度要求不一样。同时还有其他一些如巯基试剂、适宜PH值、甘油体积分数等对不同的内切酶来说要求也不同分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2如何实现DNA粘性末端连接单酶切点的连接如何降低本底和克服自我环化分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳答：用同一限制性内切酶对载体及外源DNA作相同消化，随后把这两种DNA混合起来，加入DNA连接酶，便可产生出稳定的杂种DNA。上述方法的缺点是限制酶切割产生的具有黏性末端的载体DNA分子连接反应混合物中会发生自我环化作用，并在连接酶的作用下重新变成稳定的共价闭合的环形结构，使得只含有载体分子的转化子克隆的“本底”比例大幅度上升。克服这一缺点的方法是：用细菌的或小牛肠的碱性磷酸酶（BAP或CAP），预先处理线性的载体DNA分子，以移去其末端的5/-P基团，于是在连接反应中，它自己的两个末端就再也不能被连接酶共价连接起来了。这样形成的杂种DNA分子的每一个连接位点中，载体DNA都只有一条链是外源DNA连接上的，而另外一条链由于失去了5/-P基团，不能作此连接，故留下一个具有3/-OH和5/-OH的缺口，尽管如此，这样的DNA分子仍然可以导入细菌细胞，并在寄主细胞内完成缺口的修复工作。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3基因片段与载体间的平末端连接有什么方法？答：连接平末端DNA分子的方法有两种：分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳一、T4连接酶连接法。T4DNA连接酶除了能封闭具有3/-OH和5/-P末端的双链DNA的缺口外，在存在ATP和加入高浓度酶的条件下，它还能够连接具有完全配对碱基的平末端DNA分子，但其连接效率比黏性末端要低的多。二、同聚物加尾法。先用末端核苷酰转移酶给平末端DNA分子3/-OH基团端加上同聚物尾巴，再用DNA连接酶进行连接。为了在平末端的DNA分子上产生带有3/-OH的单链延伸，需要用5/特异的核酸外切酶处理DNA分子，以便移去少数几个末端核苷酸。将要连接的DNA分子3/-OH基团端延伸出poly（dA）和poly（dT）或者poly（dG）和poly（dC）尾巴后，互补的尾巴就会连接起来，连接分子的裂口可通过大肠杆菌DNA聚合酶的作用予以补上，留下的单链缺口则可由DNA连接酶封闭。三、用化学合成的衔接物链接DNA分子。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第六章分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释：质粒，粘性质粒（Cosmid）带有λ噬菌体的Cos位点和整个pBR322的DNA顺序。经感染进入细菌细胞以后，它就好象质粒那样在细胞中进行复制。易环化和扩增。分子量小，可包装30-45kb外源基因，可由Ampr抗性筛选，常用于构建基因文库。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳位点（Cohesive-endsite）：λDNA为线状双链分子，两端各有几个碱基的单链互补粘性末端，通过粘性末端的互补作用形成双链环形DNA。这种由粘末端结合形成的双链区段即Cos位点。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳细胞：用一个复制起始部位缺失的SV40突变种感染猴细胞，由于病毒DNA不能自主复制，便整合到宿主染色体DNA中，病毒DAN,早期基因表达产生功能性的T抗原，这样的细胞就叫COS细胞。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答：1基因重组是常用哪几种载体其共同特点如何答：常用载体的种类：质粒、噬菌体衍生物（COS、M13）、动物病毒；共同特征：①自主复制②易于扩增分离纯化③有非必需区④有单一酶切位点（多克隆位点）单一酶切位点：一种酶在一个载体上只有一个酶切位点；多克隆位点：一个载体上的某一个区域含有多个单一酶切位点⑤有选择标记基因⑥表达载体还应有表达调控元件（启动子、增强子、终止子,SD序列）分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2作为理想的质粒载体有哪些基本条件？分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳答：作为理想的质粒载体，应具备以下几个条件（1）能自主复制，即本身是复制子（2）具有一种或多种限制酶的单一切割位点，并在此位点中插入外源基因片段，不影响本身的复制功能；（3）在基因组中有1-2个筛选标记，为寄主细胞提供易于检测的表型特征，（4）分子量要小，多拷贝，易于操作。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第七、八章分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释：1RT-PCR：即逆转录PCR，先在逆转录酶的作用下以mRNA为模板合成DNA,再以cDNA为模板进行PCR反应。这样低浓度的mRNA被扩增放大易于检测。是一种快速、简便且敏感性极高的检测RNA的方法，可用于分析基因的转录产物、克隆cDNA及合成cDNA探针、改造cDNA序列等。分子生物学电子版(修正版)：小核RNA，只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA，具有独特功能并且独立存在的实体，约为70-300个核苷酸，可参与真核生物的RNA剪接。：即干扰RNA，一类小分子量的RNA，可以高效，特意地阻断体内同源基因的表达，促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校