《黄酮类化合物》PPT课件 (2)

第九章黄酮类化合物（flavonoids）前言黄酮类化合物是广泛分布在自然界的一大类化合物，多数具有颜色，在植物体内一部分与糖结合成苷类化合物（存在于植物的花、叶、果实等组织），一部分游离存在（存在于木质部坚硬组织)。对植物的生长发育、开花结果以及抵御异物侵入等方面起着重要作用。学习内容（一）黄酮类化合物基本结构与分类(掌握)（二）黄酮类化合物的理化性质(掌握)（三）黄酮类化合物的提取分离(掌握)（四）黄酮类化合物的鉴定与结构测定（熟悉）（五）黄酮类化合物的生理活性（了解）1、基本结构基本母核为2-苯基色原酮类化合物。三个环编号取代基：OH、OCH3、OCH2O等。取代位置ACB124581’6’2、分类黄酮（醇）类二氢黄酮（醇）类异黄酮类、二氢异黄酮类查耳酮类花色素类、黄烷类橙酮（噢哢）类双黄酮类区分要点：双键、B环连接位置、C环的完整性与环上的取代等。分类黄酮（醇）类结构特点：完全的母核结构。黄酮醇与黄酮的区别：3-OH的有无。木犀草素槲皮素分类二氢黄酮（醇）类结构特点：C2-C3之间无双键。二氢黄酮醇与二氢黄酮的区别：3-OH的有无。甘草苷杜鹃素分类异黄酮类、二氢异黄酮类结构特点：B环连接在C3位。异黄酮和二氢异黄酮的区别：C2-C3之间双键的有无。大豆素紫檀素分类查耳酮类结构特点：C环开环。注意编号不同。1’2’4’135αβ红花苷分类花青素类：C环为苯环结构，1位氧带正电荷。儿茶素飞燕草素黄烷类C4无羰基，C2-C3无双键。分类橙酮（噢哢）类：C环为五元环。硫磺菊素双黄酮类：两分子黄酮组成。银杏素分类理化性质一、性状1、存在状态2、旋光性3、颜色二、溶解性（熟悉）1、苷元2、苷三、酸碱性（掌握）四、显色反应（重点掌握）一、性状1、苷元为结晶性固体，苷类为无定性粉末。2、苷元除二氢黄酮（醇）类、黄烷（醇）有旋光性外，其它无旋光性；苷类化合物多为左旋性。3、颜色：具明显显色，多数黄色或橙色，与交叉共轭体系有关。理化性质二、溶解性1、苷元一般难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂。2、平面型结构的水溶性小于非平面型结构。3、OH越多，水溶性越强。4、苷类化合物的糖数越多，水溶性越强。5、3-O-glc苷的水溶性>7-O-glc苷。理化性质三、酸碱性1、酸性：7，4’-二-OH>7或4’-OH>一般酚羟基>5-OH。（原因？）2、碱性：1-O原子有碱性。理化性质浓HCl..四、显色反应(一)、还原反应(二)、金属盐类试剂的络合反应(三)、硼酸显色反应（了解)(四)、碱性试剂显色反应（熟悉）理化性质显色反应(一）、还原反应HCl—Mg粉（Zn)反应1、操作：样品溶于甲醇或乙醇中，加入少许镁粉（锌粉）振摇，滴加浓HCl几滴，观察颜色（必要时可加热）。2、结果：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）--橙红色~紫红色。查尔酮、橙酮不显色。3、干扰组分的排除：花青素、部分查尔酮。理化性质显色反应（一）、还原反应NaBH4反应（专属性较高的还原剂）1、操作：样品溶于乙醇中，加入2%NaBH4乙醇液，稍后加入浓HCl或浓H2SO4数滴，观察颜色。2、结果：二氢黄酮类呈紫色或紫红色。理化性质显色反应（二）、金属盐类试剂的络合反应锆盐—枸橼酸显色反应（ZrOCl2)1、操作：样品甲醇溶液加入2%ZrOCl2的甲醇溶液，观察颜色；然后再加入2%的枸橼酸，再观察颜色。2、结果：黄酮类化合物分子中有游离的3或5-OH时生成黄色络合物，但5-OH黄酮的络合物遇枸橼酸后颜色会褪去。3、应用：鉴别3-OH或5-OH黄酮。理化性质显色反应（二）、金属盐类试剂的络合反应醋酸镁（MgAc2)反应1、操作：在滤纸上滴加样品液，喷以醋酸镁的甲醇液，加热干燥，观察结果。2、结果：二氢黄酮（醇）类显蓝色荧光。黄酮（醇）和异黄酮显黄色~橙色~褐色。理化性质显色反应（二）、金属盐类试剂的络合反应AlCl3显色反应1、操作：样品的乙醇液滴于滤纸上喷1%的AlCl3乙醇液显色，在紫外灯下观察荧光颜色。2、结果：除4’-OH黄酮醇或7、4’-二OH黄酮醇显天蓝色荧光外，其它显黄色荧光。3、应用：定性定量分析。理化性质显色反应（二）、金属盐类试剂的络合反应铅盐反应：1、醋酸铅只能与分子中具有邻二酚羟基或兼有3-OH或5-OH结构的化合物作用。2、碱式醋酸铅的沉淀范围广。3、生成黄色~红色沉淀。理化性质显色反应（二）、金属盐类试剂的络合反应氯化锶（SrCl2)反应1、操作：样品甲醇液中加入3滴0.01mol/L的SrCl2甲醇液，再加入氨气饱和的甲醇溶液后观察有无沉淀出现。2、结果：具有邻二酚羟基的黄酮类化合物生成绿色~棕色乃至黑色沉淀。理化性质显色反应（二）、金属盐类试剂的络合反应FeCl3反应：多数黄酮化合物分子结构中有酚羟基，遇FeCl3可产生正反应，但一般含有H键缔合的酚羟基才呈现显著的颜色。理化性质显色反应（三）硼酸显色反应5-OH黄酮或2’-OH查尔酮为正反应。在草酸存在下显黄色并带有绿色荧光；但在枸橼酸丙酮存在下只显黄色而无荧光。理化性质显色反应（四）、碱性试剂显色反应碱性试剂：氨气、Na2CO3等。1、OH-H+无色橙黄色理化性质显色反应（四）、碱性试剂显色反应2、黄酮醇在碱性条件下先呈黄色，通入空气后变为棕色。3、黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或3、4’-二羟基取代时在碱液中不安定，由黄色变成深红色乃至绿棕色。理化性质显色反应黄酮类化合物的提取原则：1、苷和极性较大的苷元一般用极性较大的溶剂提取，如甲醇-水（1：1）或甲醇；一些多糖苷可以用沸水提取。2、苷元一般用极性较小的溶剂提取，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。3、提取苷时注意破酶。提取与分离黄酮类化合物的提取方案1：溶剂提取法。提取与分离药材粗品醇提浸膏EtOH提取、浓缩乙醚液Et2O提取不溶物BuOH液不溶物n-BuOH提取？？？黄酮类化合物的提取方案2：碱溶酸沉淀法1、原理：黄酮类化合物多数有酚羟基，显酸性，可溶于碱水中，再加酸后又可沉淀析出。2、常用碱：石灰水、Na2CO3、稀NaOH、碱性稀醇等。提取与分离黄酮类化合物的分离方法一、柱色谱1、硅胶色谱法：主要用于分离非平面型黄酮及高度甲基化的黄酮（醇）的分离。2、聚酰胺柱层析法：3、GFC法二、pH梯度萃取法提取与分离聚酰胺柱层析法Rf的比较1、2、提取与分离小大大小Rf的比较3、4、提取与分离小大大小Rf的比较5、用含水流动相洗脱时：三糖苷>双糖苷>单糖苷>苷元用有机溶剂洗脱时：苷元>苷提取与分离GFC法分离苷元时主要是吸附作用，OH越多，吸附越牢，Rf越小。分离苷时主要是分子筛作用，分子越大，Rf越大。提取与分离pH梯度萃取法提取与分离黄酮类化合物5%Na2CO35%NaHCO34%NaOH0.2%NaOH溶于有机溶剂中有机液有机层碱水层？碱水层？有机层碱水层？有机层碱水层？有机层提取分离实例：芸香苷的提取提取与分离1、芸香苷的结构式2、提取思路3、方案确定A、溶剂法B、碱水提取法溶解性：水溶性强酸碱性：有酸性溶剂法槐米粗粉沸水煎煮30分钟，两次。趁热滤过。药渣水提液放冷，过滤。滤液沉淀重结晶，过滤。芸香苷注意？方法？方法？注意？提取与分离碱水提取法槐米粗粉6倍量硼砂水液，石灰乳调PH8~9，煎煮2次。药渣水提液HCl调PH3~4，搅拌，析晶，过滤。滤液沉淀重结晶，过滤。芸香苷目的？目的？PH可否调到1~2提取与分离提取分离实例：黄芩苷的提取提取与分离1、黄芩苷的结构式：2、提取思路3、方案确定：碱水提取法4、 流程 快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计 图书写鉴定PC:可采用双向展开法：第一向展开采用某种醇性溶剂，第二向展开用水或极性较大的溶剂展开。TLC：1、硅胶TLC2、聚酰胺TLC鉴定与结构测定结构测定—紫外光谱的应用一般程序：1、测定样品甲醇中的UV光谱；2、测定加入诊断试剂后的UV光谱；3、如样品为苷类化合物，则先进行水解再测定光谱。鉴定与结构测定黄酮类化合物在甲醇液中的UV光谱特征苯甲酰系统产生峰带Ⅱ（220~280nm）桂皮酰系统产生峰带Ⅰ（300~400nm）AB黄酮（醇）的UV特征峰Ⅰ300~400nm，峰Ⅱ220~280nm。峰Ⅰ受A环、B环影响，氧化程度越高，吸收带越长移。峰Ⅱ主要受A环影响，B环可影响其峰形。200300400(nm)示意图查尔酮的UV特征峰Ⅰ300~390nm，峰Ⅱ220~270nm。峰Ⅰ有时开裂为Ⅰa（340~390nm）、Ⅰb（300~320nm）。峰Ⅰ受整个母核氧化的影响，尤其2’-OH影响最大。200400(nm)示意图异黄酮、二氢黄酮（醇）的UV特征峰Ⅱ为主峰，峰Ⅰ常成为其肩峰。异黄酮峰Ⅱ245~270nm；二氢黄酮峰Ⅱ270~295nm。200300（nm)示意图加入诊断试剂后引起的吸收峰位移在结构鉴定中的应用1、甲醇钠A、有3-OH，无4’-OH时，带Ⅰ红移50~60nm，强度降低。B、无3-OH，有4’-OH时，带Ⅰ红移40~60nm，强度不降低。C、3-OH、4’-OH同时存在时，带Ⅰ随处理时间的延长而衰退。2、醋酸钠用于7-OH的鉴别。有7-OH时带Ⅱ红移5~20nm，若同时有6、8-氧代，则位移幅度减小。醋酸钠熔融后若带Ⅰ红移40~60nm，强度不降，说明有4’-OH。5、6、7-三OH；5、7、8-三OH；3、3’、4’-三OH存在时吸收峰衰减。3、醋酸钠/硼酸用于鉴别邻二酚羟基。B环有邻二酚羟基带Ⅰ红移12~30nm，A环有邻二酚羟基带Ⅱ红移5~10nm。4、AlCl3/AlCl3+HCl用于鉴别3-OH、5-OH、邻二酚羟基的存在。(1)样品+AlCl3/HCl光谱=样品+CH3OH表明无3-OH或5-OH，或3-OH、5-OH被取代（2）样品+AlCl3/HCl光谱≠样品+CH3OH带Ⅰ红移35~55nm，有5-OH，无3-OH；带Ⅰ红移60nm，有3-OH，无5-OH；带Ⅰ红移50~60nm，同时有3-OH和5-OH。（3）样品+AlCl3/HCl光谱=样品+AlCl3表明A、B环均无邻二酚羟基。（4）样品+AlCl3/HCl光谱≠样品+AlCl3带Ⅰ蓝移30~40nm，B环有邻二酚羟基；带Ⅰ蓝移20nm，B环有邻三酚羟基；带Ⅰ蓝移50~65nm，A、B环均有邻二酚羟基。结构测定—1H-HMR的应用一、A环质子信号比B环质子信号在高场，即A环质子的化学位移值