风疹监测方案

。附件1风疹监测技术指南（试行）风疹是由风疹病毒引起的急性呼吸道传染病，常见于4～10岁儿童，成人也可发病。以轻度发热、皮疹及耳后、枕后、颈部淋巴结肿大和疼痛为主要特征，全国疾病监测信息报告管理系统数据显示，近年来全国风疹报告发病有逐年上升的趋势，青少年是主要的发病人群。风疹本身临床症状轻微，其主要危害是如果怀孕期间（尤其在怀孕前三个月）感染了风疹病毒，可能会导致流产、死胎以及白内障、心脏病和听力损害等严重的先天性缺陷，即先天性风疹综合征（CRS）。为了加强我国在开展风疹和CRS监测和控制方面的经验，卫生部与世界卫生组织（WHO）在山东、黑龙江两省合作开展风疹和先天性风疹综合征监测项目。本指南适用于指导项目地区开展风疹监测工作。一、监测目的（一）及时发现风疹病例，了解风疹流行病学特征和病毒学特征。（二）分析人群免疫状况，确定易感人群，采取针对性措施，预防和控制疫情。（三）及时发现并随访妊娠期间感染风疹的病例。二、监测病例定义与分类（一）监测病例定义。风疹监测疑似病例定义为：1．具备发热、出疹，并伴有下列两项症状之一者：（1）颈部、枕后或耳后淋巴结肿大（2）关节痛或关节炎2．或传染病疫情责任报告人怀疑为风疹的病例。（二）监测病例分类。对风疹疑似病例主要按照实验室检测和流行病学调查结果进行分类（分类示意图见附件1-1）。1.实验室诊断病例（1）风疹疑似病例血标本检测风疹IgM抗体阳性者。（2）风疹疑似病例恢复期血清风疹IgG抗体较急性期阳转或升高≥4倍。（3）从风疹疑似病例的标本中分离到风疹病毒或检测到风疹病毒基因者。2.临床诊断病例（1）风疹疑似病例无标本，或出疹后5天内采集的血标本检测麻疹/风疹IgM抗体均为阴性，且无其他原因可以明确解释者。（2）风疹疑似病例出疹后6-28天采集的血标本检测麻疹/风疹IgM抗体均为阴性，但与实验室诊断风疹病例有明确流行病学联系，且无其他明确诊断者。3.排除病例（1）风疹疑似病例血标本检测风疹IgM抗体阴性、麻疹IgM抗体阳性，或经实验室确诊为其他发热出疹性疾病者。（2）风疹疑似病例无标本，或出疹后5天内采集的血标本检测风疹IgM抗体阴性，但有其他原因可以明确解释者（如与麻疹实验室诊断病例有流行病学联系）。（3）风疹疑似病例出疹后6-28天采集的血标本风疹IgM抗体阴性，但与风疹实验室诊断病例无明确流行病学联系或有其他明确诊断者。三、监测内容（一）病例报告。传染病法定责任报告单位和责任疫情报告人，发现风疹病例或风疹疑似病例，应按照《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件与传染病疫情监测信息报告管理办法》和《国家突发公共卫生事件相关信息报告管理工作 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 》等规定进行报告。实行网络直报的责任报告单位应于24小时内进行网络报告；未实行网络直报的责任报告单位应于24小时内寄送出传染病报告卡，同时通过电话等方式报至当地县级疾病预防控制机构。（二）病例监测。1.流行病学监测（1）标本的采集与运送医疗单位负责对就诊的风疹疑似病例采集血标本，完整填写标本送检表（见附件1-2），并立即通知县级疾病预防控制中心。在流行病学调查、疫情处理等过程中发现的未就诊风疹疑似病例，由县级疾病预防控制中心负责组织采集血标本。采集的血标本应在24小时内送至县级疾病预防控制中心。县级疾病预防控制中心收到标本后，将血清和标本送检表在48小时内送达本地区血清学实验室。发现暴发疫情时，要快速送检。合格血标本的基本要求是：出疹后28天内采集，血清量不少于0.5ml，无溶血，无污染；2～8℃条件下保存、运送。出疹后5天内采集的血标本检测风疹、麻疹IgM抗体均为阴性或可疑的病例，应在出疹后6-28天采集第2份血标本。在项目实施地区，对于报告的麻疹疑似病例，风疹、麻疹IgM抗体检测均为阴性的，如果血标本为出疹后5天内采集的，为兼顾风疹监测和鉴别诊断，第2份血标本建议在出疹后6-28天采集。当发生风疹暴发疫情时，县级疾病预防控制中心应按要求组织采集出疹早期病例的鼻咽拭子标本，及时送省级实验室进行病毒分离。标本采集和运送方法见《风疹和CRS实验室检测技术指南》。（2）病例调查和个案管理项目地区风疹疑似病例的调查和管理参考麻疹监测相关要求。每例风疹疑似病例都应进行流行病学个案调查。报告单位所在地的县级疾病预防控制中心负责组织开展风疹疑似病例的流行病学个案调查、标本采集和送检工作。对于跨县（区）就诊的病例因返回其现住址等原因无法完成调查、采样的，报告单位所在地疾病预防控制中心应及时将信息反馈至病例现住址所在地县级疾病预防控制中心，由病例现住址所在地县级疾病预防控制中心负责最终完成调查、标本采集和送检工作。负责调查的专业人员应在接到报告后48小时内完成流行病学个案调查，填写“麻疹/风疹疑似病例流行病学个案调查表”（见附件1-3）。（3）主动监测县级疾病预防控制中心和乡镇级预防保健单位，按照《预防接种工作规范》的要求，每旬到辖区内相关医疗单位进行风疹疑似病例的主动监测，并记录主动监测完成情况。2.实验室监测（1）实验室网络项目地区利用现有麻疹实验室网络开展风疹实验室监测，国家麻疹实验室承担风疹病毒基因定型工作、省级麻疹实验室承担风疹病毒分离工作、市级及有条件的县级实验室承担血清学检测工作。血清学检测试剂由项目省进行质量评估后，统一下发。（2）血清学检测承担血清学检测任务的实验室在收到疑似病例血清标本后，应进行风疹IgM抗体检测，风疹IgM抗体阴性的标本应进行麻疹IgM抗体检测。在麻疹监测系统中发现的麻疹IgM抗体阴性的标本，应进行风疹IgM抗体检测。血清学实验室检测结果应于标本采集后7日内向县级疾病预防控制中心进行反馈，县级疾病预防控制中心应及时向医疗机构进行反馈血清学实验室检测结果。（3）病原学检测省级疾病预防控制中心麻疹实验室（以下简称省级麻疹实验室）在接到标本后28天内完成病毒分离工作，分离到的毒株在14天内送中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所风疹实验室（以下简称国家风疹实验室）进行病毒基因定型。国家风疹实验室在收到毒株标本14天内完成基因定型，并将结果反馈给送检单位。（4）实验室生物安全及质量控制参见《全国麻疹监测 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 》。（三）暴发疫情监测。在同一学校、幼儿园、自然村寨、社区、建筑工地、厂矿等集体单位7天内发生10例及以上风疹疑似病例，应按《国家突发公共卫生事件相关信息报告管理工作规范》的要求报告和处理。1.疫情报告疾病预防控制中心发现或接到风疹暴发疫情后，应立即报告同级卫生行政部门和上级疾病预防控制中心。2.病例调查与核实风疹暴发疫情的调查由县级疾病预防控制中心具体实施。县级疾病预防控制中心在发现或接到疫情报告后，应在24小时内到达现场开展调查。对每起风疹暴发疫情的疑似病例均应进行流行病学个案调查，至少采集5例暴发早期病例血清学标本（5例以下应全部采集），采集的标本应立即送到承担血清学检测任务的实验室，核实风疹暴发。同时在每起暴发中采集5例左右新发病例的病原学标本，送省级实验室进行病毒分离。3.主动搜索县级疾病预防控制中心要对当地各级医疗单位，特别是基层医疗单位开展病例主动搜索，必要时开展社区、学校、集体用工单位等主动搜索。当发现有孕妇风疹疑似病例，或有风疹病例密切接触史的孕妇时，应提供相应的医学建议、开展相关监测工作。4.流行因素调查在现场调查过程中，应评估疫情流行特征、疫情发生地及周边地区人群免疫史、病例居住环境、人口流动情况、医院感染情况，综合分析暴发原因。5.预防控制措施评价应对采取的应急接种、医院感染预防控制、传染源管理等措施进行分析，评价控制效果，预测疫情发展趋势，及时调整控制策略和措施。县级疾病预防控制中心在疫情处理完毕后7天内完成调查报告，逐级上报至省级疾病预防控制中心，同时参考《全国麻疹监测方案》的要求，录入麻疹监测信息报告管理系统。（四）孕妇风疹疑似病例的调查与随访。为了及时发现并诊断CRS病例，利于项目地区开展CRS监测工作，在对孕妇风疹疑似病例进行个案流行病学调查时，应对孕妇风疹疑似病例进行登记、随访，若发现有与风疹病例密切接触、可能被感染的孕妇，也可参照进行调查和随访。病例报告在开展风疹病例个案流行病学调查或风疹病例主动搜索时，如果发现孕妇风疹疑似病例，应填写“麻疹/风疹疑似病例流行病学个案调查表”（附表1-3），并填写“孕妇风疹疑似病例登记表”（附件1-4），以保证随时能联系、随访到该孕妇。实验室检测在对孕妇风疹疑似病例开展个案流行病学调查，或发现有风疹病例密切接触史的孕妇时，应采集血标本并尽快开展相关实验室检测。孕妇风疹疑似病例血标本应尽快开展风疹、麻疹IgM检测，对于出疹后5日内采集标本且检测风疹、麻疹IgM均为阴性的，应尽早回访并采集出疹后6-28天血标本进行实验室检测。若发现有风疹病例密切接触史的孕妇，可根据风疹IgM检测结果进行管理，具体见如下示意图：病例随访对于实验室确诊的孕妇风疹病例，应及时告知其检测结果及可能的健康影响（告知项目参见附件1-5），并每2个月随访一次（如有特殊情况及时随访，电话随访或入户访谈），了解相关临床和实验室检查结果、妊娠状况等信息，填写随访表（附件1-6），对其进行随访至分娩或终止妊娠，并对所有这些孕妇所生的婴儿（包括出生时没有可见出生缺陷的婴儿）作为CRS疑似病例纳入CRS监测，具体参照“CRS监测技术指南”。四、 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 管理风疹疑似病例的传染病报告卡信息由病例报告单位录入疾病监测信息报告管理系统，个案流行病学调查信息、血清学和病原学实验室检测结果的报告参照《全国麻疹监测方案》和《预防接种工作规范》相关要求。实验室检测结果由检测单位于检测完成后及时将检测报告反馈至标本送检单位。流行病学调查原始资料由县级疾病预防控制中心保存，实验室检测原始记录由检测单位保存。孕妇风疹疑似病例登记、随访信息录入数据库，并于每月5日前通过E-mail方式逐级上报至中国疾病预防控制中心，原始资料由县级疾病预防控制机构保存。五、监测指标（一）风疹疑似病例48小时完整调查率达到80％以上（二）散发风疹疑似病例血标本采集率达到80％以上（三）风疹暴发疫情血清学确诊率达到90％以上（四）麻疹IgM阴性标本进行风疹IgM检测的比例>90%（五）孕妇风疹疑似病例实验室血清学确诊率>90%（六）实验室确诊的孕妇风疹病例进行随访至分娩（或终止妊娠）的比例>80%附件：1-1.风疹疑似病例分类示意图1-2.风疹疑似病例标本送检登记表1-3.麻疹/风疹疑似病例流行病学个案调查表1-4.孕妇风疹疑似病例或有风疹病例密切接触史孕妇登记汇总表1-5.确诊孕妇风疹感染者医学建议（参考）1-6.孕妇风疹病例随访表附件1-1风疹疑似病例分类示意图附件1-2风疹疑似病例标本送检登记表采检单位一、基本情况患者姓名性别口男口女出生日期年月日（阳历/阴历）发病日期年月日主要临床症状：发热：口是口否发热日期年月日出疹：口是口否出疹日期年月日淋巴结肿大：口是口否部位：口耳后口颈部口枕后关节疼痛：口是口否临床诊断母亲姓名出生日期年月日（阳历/阴历）联系电话家庭住址市县（市、区）乡镇（街）村（路）号二、标本采集 标本类型 编号 采样日期 送检日期 检测日期 报告日期 风疹实验结果 IgM IgG 病毒分离 血清 第一次 第二次 咽拭子 送样人送样日期附件1-3麻疹/风疹疑似病例流行病学个案调查表一、报告卡信息1.1传染病报告卡卡片编号：1.2患者姓名*：（患儿家长姓名：）1.3身份证号：1.4性别*：男女1.5出生日期*：年月日a.如出生日期不详，实足年龄*：年龄单位：岁月天1.6患者工作单位：联系电话：1.7病人现住址属于*：本县区本市其他县区本省其他地市外省港澳台外籍1.8家庭现住址(详填)*：省地（市）县（区）乡（镇、街道）村（居委会）（门牌号）1.9患者职业*：幼托儿童散居儿童学生（大中小学）教师保育员及保姆餐饮食品业商业服务医务人员工人民工农民牧民渔（船）民干部职员离退人员家务及待业其他不详1.10病例分类*：疑似病例实验室诊断病例临床诊断病例1.11发病日期*：20年月日1.12诊断日期*：20年月日时1.13死亡日期：20年月日1.14疾病名称：法定传染病：1.15填卡医生：1.16报告单位：1.17接触者有无相同症状：无有1.18备注：二、流行病学调查信息2.1报告日期*：20年月日2.2调查日期*：20年月日2.3户籍所在地*：本县区本市其他县区本省其他地市外省港澳台外籍户籍地址选择：省地（市）县（区）乡（镇、街道）2.4发病时在现住址县区居住时间*：<7天7-21天22天-3月>3月2.5是否在集体单位（如学校、幼儿园、工厂等）：是否不详如是，所在集体单位具体名称：2.6发热*：是否不详如是，发热日期*：20年月日2.7出疹*：是否不详如是，出疹日期*：20年月日2.8其他临床症状*：咳嗽是否不详卡他症状（鼻塞、流涕、喷嚏等）是否不详结膜炎是否不详麻疹粘膜斑（柯氏斑）是否不详淋巴节肿大（颈后/枕后/耳后）是否不详关节疼痛/关节炎是否不详2.9含麻疹成分疫苗接种剂次*:0剂1剂≥2剂不详免疫史来源：接种证接种卡信息系统家长回忆如接种过，a.首剂次接种时间：_________年______月_______日b.最后一剂接种时间：_________年______月_______日2.10含风疹成分疫苗接种剂次*:0剂1剂≥2剂不详免疫史来源：接种证接种卡信息系统家长回忆如接种过，a.首剂次接种时间：_________年______月_______日b.最后一剂接种时间：_________年______月_______日2.11发病前7-21天是否去过医院*:是否不详若是，医院名称2.12发病前7-21天是否接触其他发热出疹性病人*:是否不详2.13是否与实验室诊断病例有流行病学联系*:是否不详若是，实验室诊断病例为：麻疹风疹其他______2.14是否为麻疹暴发疫情中的病例*:是否2.15是否为一起新的暴发*:是否暴发编码:---三、标本采集情况3.1是否采集第一份血清标本*：是否（跳到第3.3项）采集日期：__________年______月______日3.2是否采集第二份血清标本*：是否采集日期：__________年______月______日3.3是否采集病原学检测标本*：是否（跳到第4.1项）a.鼻咽拭子：是否采集日期：20年月日b.尿标本：是否采集日期：20年月日c.其他标本：_____________采集日期：20年月日四、实验室检测结果反馈信息4.1第一份血标本麻疹IgM抗体检测结果*：阳性阴性待定风疹IgM抗体检测结果*：阳性阴性待定4.2第二份血标本麻疹IgM抗体检测结果*：阳性阴性待定风疹IgM抗体检测结果*：阳性阴性待定4.3麻疹病毒鉴定结果：阳性阴性待定基因型：_________风疹病毒鉴定结果：阳性阴性待定基因型：_________五、病例最终分类：（县级CDC根据实验室检测及流行病学调查结果订正报告卡1.10和1.14项）5.1最终诊断*：待定麻疹病例风疹病例其他5.2病例分类*：疑似病例实验室诊断病例临床诊断病例调查人员签字：调查单位：如果为孕妇风疹疑似病例，首次调查时填写以下补充信息：1．孕妇编号：:--（现住址县区编码+年份+顺序号）2．怀孕日期预产期本次调查时怀孕周数：_____周3.发病时怀孕周数：_____周如有风疹病例密切接触史，接触时怀孕周数：_____周4.第一份血风疹IgG检测结果：阳性阴性待定未检测5.是否接受医学建议咨询：是否6.是否继续随访：是否如是，预约下次随访日期：20年月日如否，原因：调查人员签字：调查单位：附件1-4孕妇风疹疑似病例或有风疹病例密切接触史孕妇登记汇总表单位___________________孕妇类型：口孕妇风疹疑似病例口有风疹病例密切接触史孕妇 编号 姓名 出生日期 详细住址 联系电话 发病或接触感染时怀孕周数 首次调查日期 是否随访 随访次数 末次随访日期 妊娠结果* 妊娠结果发生日期 最终病例分类* 备注 妊娠结果：1.自然流产2.人工流产3.早产4.正常活产5.死产6.失访7.其他（注明）病例分类：1.实验室诊断风疹病例2.临床诊断风疹病例3.排除风疹感染病例附件1-5孕妇风疹感染者/接触者医学建议（参考）您好：风疹是由风疹病毒引起的急性呼吸道传染病，以发热、皮疹及耳后、枕后、颈部淋巴结肿大和疼痛为主要特征，其本身临床症状轻微，主要危害是怀孕期间（尤其在怀孕前三个月）如果感染了风疹病毒，可能会对胎儿产生不同程度的危害，甚至导致一些先天性缺陷，即先天性风疹综合征（CRS）。请您注意下列划√选项：⃞根据您的临床表现、流行病学史、血标本实验室检测结果，经医生综合判断，初步认为您在怀孕期间感染了风疹病毒，建议您：1.进行妇产科检查，咨询医生风疹感染对胎儿的潜在危险。2.接受我们定期随访。3.分娩时联系我们，免费为幼儿进行风疹病毒检测。⃞根据您的临床表现和流行病学史，怀疑您怀孕期间有感染风疹病毒的可能，但本次血标本实验室检测结果尚无法证实为风疹感染，建议您：1._______天后采集第2份血标本，免费为您再次检测。⃞由于您是风疹病人的密切接触者，但经过此次实验室检测未发现您感染风疹病毒，但是风疹病毒的易感者，建议您：1.怀孕期间避免接触发热出疹性病人。2．一旦接触发热出疹病人，或出现发热出疹性症状，及时就医。医院疾控中心二〇年月日附件1-6孕妇风疹病例随访表孕妇编号：:--（现住址县区编码+年份+顺序号）一、基本情况1.1姓名：1.2出生日期：_________年______月______日1.3详细住址：___________________1.4联系电话：1.5孕妇分类：风疹疑似病例孕妇有风疹病例接触史孕妇二、本次随访信息2.1本次随访为：第______次随访，随访日期：_________年______月______日2.2随访方式：入户电话其他_________2.3本次调查时怀孕周数：三、随访结果3.1是否采集血标本：是否，如是采集日期：_________年______月______日3.2本次检测结果：风疹IgM检测结果：阳性阴性待定未检测风疹IgG检测结果：阳性阴性待定未检测3.3本次随访时妊娠进展/结果：.1.自然流产2.人工流产3.早产4.正常活产5.死产6.失访7.继续妊娠8.其他（注明）3.4妊娠结果的发生日期：20年月日，怀孕周数___________3.5其他临床检查项目及结果3.6是否继续随访：是否，如是，预约下次随访日期：20年月日3.7本次调查病例分类：实验室诊断风疹病例临床诊断风疹病例实验室诊断隐性感染病例排除风疹感染调查人员签字：调查单位：附件2先天性风疹综合征监测技术指南（试行）本指南是用于指导风疹及先天性风疹综合征（以下简称CRS）监测项目地区实施先天性风疹综合征监测的技术规范。一、监测目的（一）及时发现并诊断孕期感染风疹的病例，并进行随访和提供医学建议。（二）及时发现并诊断CRS病例，并进行随访和提供医学建议。二、监测病例定义与分类（一）监测病例定义。本项目先天性风疹综合征疑似病例定义为：小于1周岁婴儿出现如下表现之一者：1．先天性心脏疾病。2．听力损失。3．有下列一个或多个眼部征象：白内障；视力减弱；眼球震颤；斜视；小眼球；先天性青光眼；色素视网膜病等。4．母亲在妊娠期证实有风疹感染史者。5．被经培训的临床医生怀疑患有CRS者。所有可疑CRS病例都应经专业的内科医生进行进一步诊断。（二）监测病例分类。1．临床诊断病例专业内科医生检测到下列（a）中的2个并发症，或2个并发症1个在（a）中、1个在（b）中，具备上述条件者为临床诊断病例。（a）白内障和/或先天性青光眼，色素视网膜病等眼部疾病；先天性心脏疾病；听力损失。（b）紫癜；脾(肿)大；小头畸形；智力障碍；脑膜脑炎；放射性骨病；黄疸（出生后24小时内）。2．实验室诊断病例具有临床表现的CRS疑似病例或临床诊断病例，且具备下列之一者：（1）血清标本风疹IgM抗体阳性。（2）咽拭子或尿液等病原学标本中分离到风疹病毒。（3）病原学标本检测到风疹病毒基因。3．先天性风疹感染（CRI）CRS疑似病例未见临床表现，但其血清风疹IgM抗体检测为阳性或病原学检测风疹病毒阳性者。三、监测内容（一）监测对象。家庭现住址在项目实施地区(指无论户籍所在地，居住时间不限)的1周岁以内符合CRS疑似病例定义的婴儿均作为监测对象。（二）病例报告。1．CRS监测医院在项目实施地区选择县级及以上综合医院、儿童医院、产科医院、妇幼保健院、五官科（眼、耳）专科医院、新生儿听力筛查中心等开展CRS监测。每个项目市至少指定两所具备CRS诊断条件的医院，作为CRS监测诊断技术支持医院，负责对项目地区不具备CRS诊断条件医院报告的CRS疑似病例提供诊断技术支持。2．报告方式监测医院相关科室医务人员在发现CRS疑似病例后，应报告本单位预防保健科，同时填写CRS疑似病例报告卡（附件2-1）。保健科在24小时内以最快的方式报告到当地县级疾控机构。报告内容包括：家长姓名、患者姓名、性别、出生日期、现住址、临床初步诊断等。县级疾控机构应建立CRS疑似病例专报记录本（附件2-2），登记接到报告时间、报告人、报告单位、报告内容、记录人等内容。（三）主动监测。1．主动监测医院所有县级及以上综合医院、儿童医院、产科医院、妇幼保健院、五官科（眼、耳）专科医院、新生儿听力筛查中心等均为CRS主动监测医院。项目地区结合AFP监测工作，每旬对上述医院开展CRS病例主动搜索。项目地区可根据实际情况适当扩大主动监测医院范围。2．主动监测内容（1）主动监测医院每旬开展本院的CRS疑似病例主动搜索；县级疾控机构每旬对辖区内主动监测医院开展主动搜索。（2）开展主动监测时，监测人员应到监测医院的儿科、产科、五官科（眼、耳）的门诊和病房、病案室等，查阅门诊日志、出入院记录或病案，并与医务人员交谈，主动搜索CRS疑似病例，并记录监测结果。主动监测记录（附件2-3）由监测单位保存备查。（3）如发现漏报的CRS疑似病例，应按要求立即进行报告。（四）病例调查。1．标本的采集与运送医疗单位负责对就诊的CRS疑似病例采集血标本并报告县级疾病预防控制中心，同时协助疾病预防控制中心完成病原学标本的采集。县级疾病预防控制中心在开展流行病学调查时按操作要求采集病例的鼻咽拭子、尿液等病原学标本。采集的血标本应在24小时内送至县级疾病预防控制中心。血清标本和送检表应在48小时内送达本地区血清学实验室进行抗体检测。病原学标本和送检表应在3天内送省级实验室进行病毒检测。风疹和CRS标本采集和运送方法等见《风疹和CRS监测实验室技术指南》。2．个案调查每例CRS疑似病例都应进行流行病学个案调查。接到病例报告后，县级疾控机构应在48小时内派专业人员对病例开展个案调查，在临床医生配合下，详细填写“先天性风疹综合征疑似病例个案调查表”（附件2-4），记录病例的临床表现、流行病学史、实验室检测结果、最终诊断等。对于跨县（区）就诊的病例,由报告单位所在地的县级疾病预防控制中心负责开展病例的流行病学个案调查，将调查表逐级反馈至病例现住址所在地县级疾病预防控制中心，由现住址疾病预防控制中心完成后续随访工作。报告单位所在地的县级疾病预防控制中心因病例返回其现住址等原因无法完成调查的，应及时将信息反馈至病例现住址所在地疾病预防控制中心，由病例现住址所在地县级疾病预防控制中心负责最终完成流行病学调查、病例随访等工作。3．核实诊断对于报告的CRS疑似病例，应结合临床检查结果、实验室检测结果、流行病学调查结果等进行最终诊断分类。如报告医院无条件进行临床确定诊断，临床医生应配合疾病控制部门向患者家属提供医学建议，到辖区符合条件的医院进行进一步检查，重点针对心脏病、听力、眼科等进行专科检查，确定潜在的出生缺陷。医学建议告知书参考模板见附件2-5。（五）病例随访1.CRS疑似病例血标本检测风疹IgM抗体阴性者，如符合临床诊断病例的诊断标准，或具有流行病学意义，均应在间隔1个月时采集第二份血清和病原学标本，了解病例临床进展及进一步检测结果，力求在随访时能够得出明确诊断，补充个案资料。2．CRS和CRI确诊病例每月随访一次，采集病原学标本，直至连续两次间隔一个月病原学标本检测风疹病毒阴性。3．随访由县级疾控机构完成，并填写“先天性风疹综合征病例随访表”（附表2-6），上报市、省级疾控机构。建议随访者为对该病例进行过调查的人员。（六）实验室监测项目地区利用现有麻疹实验室网络开展风疹和先天性风疹综合征实验室监测。国家麻疹实验室承担风疹病毒基因定型工作、省级麻疹实验室承担风疹病毒分离和鉴定工作、市级及有条件的县级实验室承担血清学检测任务。血清学检测试剂由项目省进行质量评估合格后方可使用。1.血清学检测承担血清学检测任务的实验室在收到CRS疑似病例血清标本后，应于3天内完成风疹IgM抗体检测。应尽快采集每一个刚出生的CRS疑似患儿的血标本，最迟不能超过出生后6个月。6月龄内CRS疑似病例风疹IgM检测阴性者，在第一次随访时采集的血标本应检测风疹IgM抗体以明确诊断。血清学标本在进行检测前，建议分装一份留存，供开展其他检测项目使用。2.病原学检测项目地区省级实验室在进行常规病毒分离的同时，根据《风疹和先天性风疹综合征实验室技术指南》，逐步开展风疹病毒快速鉴定工作。省级疾病预防控制中心实验室在接到标本后28天内完成病毒分离工作，分离到的毒株送国家麻疹实验室进行病毒基因定型。3．实验室生物安全及质量控制参见《全国麻疹监测方案》及《风疹和先天性风疹综合征实验室技术指南》。（七）先天性风疹综合征病例管理一般原则。CRS婴儿可长期排毒，应对12个月以下患CRS的婴儿采取接触隔离的措施，直至婴儿连续两次间隔一个月采集尿液和咽拭子病原学标本风疹病毒培养为阴性时方可取消隔离。四、资料管理与信息交流（一）资料管理。1．先天性风疹综合征疑似病例报告/记录卡分别由报告单位和记录单位保存。流行病学调查原始资料由县级疾病预防控制中心保存，实验室检测原始记录由检测单位保存。2．流行病学个案调查表、随访表信息由县级疾病预防控制中心于调查完成后2日内上报市级疾病预防控制中心，市级疾病预防控制中心录入数据库（另行下发）后，每月5日前E-mail方式上报省级疾病预防控制中心，省级审核后，每月10日前E-mail方式上报国家免疫 规划 污水管网监理规划下载职业规划大学生职业规划个人职业规划职业规划论文 中心（nip1@chinacdc.cn）。各级血清学实验室检测结果均应反馈至县级，并完整填写至调查表中，由市级统一录入。病原学检测结果可由省级录入，并将结果逐级反馈至县级。省级疾病预防控制中心根据流行病学信息和实验室检测结果对病例进行最终分类进行核实。（二）信息交流与反馈。各级疾病预防控制中心应定期交流信息，并在项目地区加强与医院、妇幼等部门的沟通，及时发现存在的问题，提出改进建议，提高监测质量。五、监测评估指标（一）CRS疑似病例调查率>95%。（二）CRS疑似病例血标本和病原学标本采集率均>80%。（三）CRS疑似病例医学建议覆盖率>95%。（四）实验室确诊CRS/CRI病例随访的比例>80%。（五）CRS疑似病例报告率（与监测试点地区平均水平比较）附件2-1.先天性风疹综合征疑似病例报告/记录卡2-2.先天性风疹综合征疑似病例报表2-3.先天性风疹综合征疑似病例主动监测登记表2-4.先天性风疹综合征疑似病例个案调查表2-5.先天性风疹综合征疑似病例医学建议（参考）2-6.先天性风疹综合征病例随访表附件2-1：先天性风疹综合征疑似病例报告/记录卡（各级医疗机构和预防接种门诊用表） 报告时间：200年月日时 报告人： 报告单位： 报告方式：(1)电话(2)传真(3)其它 报告内容：1、一般情况儿童姓名：家长/监护人姓名：性别：（1）男（2）女出生日期：年月日满：月龄____天现住址（详填）*：省市县（区）乡（镇/街道）村（号）联系方式：2、本次就诊情况就诊日期：200年月日就诊科室：接诊医生：3、主要临床表现：(1)先天性心脏疾病(2)白内障(3)青光眼(4)听力损失(5)色素视网膜病(6)紫癜(7)脾(肿)大(8)小头畸形(9)智力缺陷(10)脑膜脑炎(11)放射性骨病(12)黄疸（出生后24小时内）(13)其他__________________临床诊断：就诊类型：（1）住院病人（2）门诊病人如是住院病人，所住病房：4、标本采集情况标本种类:__________________采集日期：200年月日标本现保存在何处？5、其它情况 接报单位:接报人： 记录时间：200年月日时附件2-2：先天性风疹综合征疑似病例报表（各级疾控机构用表）省市县报告人年月 编号 报告病例单位名称 患儿姓名 性别 出生日期 家长姓名 家庭详细住址 入院日期 联系电话 临床诊断和主要症状 标本类型 备注 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 母亲 患儿 a b c 注：临床诊断和主要症状:1青光眼，2先天白内障，3先心病(a动脉导管未闭b肺动脉狭窄c其他(填写具体疾病名称))，4听力损失，5色素视网膜病，6智力缺陷，7紫癜，8脾（肿）大，9黄疸，10小头畸形，11放射性骨病，12脑膜脑炎，13其他附表2-3先天性风疹综合征疑似病例主动监测登记表填报单位年月 机构 访视时间 查阅病例数 发现CRS疑似病例数 已报告CRS疑似病例数 漏报CRS疑似病例数 被访视医生 被访视单位负责人签字 访视人 备注 各医疗机构填写 上旬 中旬 下旬 县级疾控机构填写 上旬 中旬 下旬 备注栏可填写发现的漏报病例姓名、性别、年龄及家庭住址等基本情况附件2-4先天性风疹综合征疑似病例个案调查表病例编号：□□□□□□-□□□□-□□□（行政区划编码-年份-病例序号）一、基本信息1.1患者姓名：（患儿母亲姓名：患儿父亲姓名：）1.2性别：男女1.3出生日期：年月日1.4出生体重（克）：1.5家庭现住址(详填)：省地（市）县（区）乡（镇、街道）村（居委会）（门牌号）户籍地址：省地（市）县（区）1.6联系方式：1.7首次报告医院名称：医院级别：县区级医院市级医院省级医院医院类型：综合性医院妇幼保健院专科医院1.8首次报告日期：20年月日时1.9确诊医院名称：1.10确诊日期：年月日1.11诊断医生：1.12病例号：二、婴儿临床表现2.1A组表现A1先天性心脏病*：有/无/不详如是，疾病种类及主要表现：A2白内障*：有/无/不详A3青光眼：有/无/不详A4色素视网膜病：有/无/不详A5听力损失：有/无/不详A6视力减弱：有/无/不详A7眼球震颤：有/无/不详A8斜视：有/无/不详A9小眼球：有/无/不详；2.2B组表现B1紫癜：有/无/不详B2脾(肿)大：有/无/不详B3小头畸型：有/无/不详B4智力障碍：有/无/不详B5脑膜脑炎：有/无/不详B6放射性骨病：有/无/不详B7出生24h黄疸：有/无/不详2.3其它异常：如果有，请描述：三、母亲病史3.1母亲年龄：_______________3.2该婴儿为母亲的第几次妊娠：3.3母亲是否接种过风疹成分疫苗？是否不详如果是，请填写日期：年月日3.4妊娠期是否有发热出疹疾病？是否如果是，出疹时的妊娠月数：_____________________是否经实验室证实风疹？是否3.5在妊娠期是否接触患发热出疹疾病的患者？是否如果是，接触时的妊娠月数：_____________________3.6妊娠期是否有跨县的外出史？是否如果是，外出时的妊娠月数：_____________________外出的地点(县区)：________________________________________四、婴儿标本采集情况4.1是否采集血清标本：是否标本来源：脐带血静脉血采集日期：__________年______月______日4.2是否采集病原学检测标本：是否a.鼻咽拭子：是否采集日期：20年月日b.尿标本：是否采集日期：20年月日c.其他标本：____________采集日期：20年月日五、实验室检测结果5.1血标本5.1.1第一份血标本a．实验室名称：_________________b.血标本收到日期：年月日c．风疹抗体检测方法及检测试剂：________________________d.风疹IgM检测结果：阳性阴性待定e.风疹IgG检测结果：_____UI/ml阳性阴性待定f．其他检测结果,如有请描述:_________________g.县级收到检测结果日期：年月日5.1.2第二份血标本a．实验室名称：_________________b.血标本收到日期：年月日c．风疹抗体检测方法及检测试剂：________________________d.风疹IgM检测结果：阳性阴性待定e.风疹IgG检测结果：_____UI/ml阳性阴性待定f．其他检测结果,如有请描述:_________________g.县级收到检测结果日期：年月日5.2病原学标本5.2.1第一份病原学标本a．病毒分离实验室名称：____________________________________b．标本收到日期：年月日c．病毒分离结果：_________________d.病毒鉴定实验室名称：_________________e.鉴定方法：______________风疹病毒鉴定结果：阳性阴性f.风疹病毒基因型：_____________5.2.2第二份病原学标本a．病毒分离实验室名称：____________________________________b．标本收到日期：年月日c．病毒分离结果：_________________d.病毒鉴定实验室名称：_________________e.鉴定方法：______________风疹病毒鉴定结果：阳性阴性f.风疹病毒基因型：_____________六、病例最终分类：临床诊断CRS病例实验室诊断CRS病例先天性风疹感染排除病例（病名）调查人员：调查单位：完成调查日期：20年月日附件2-5先天性风疹综合征疑似病例医学建议（参考）_________家长：先天性风疹综合征是由风疹病毒引起的一种传染性疾病，一般在妊娠早期感染了风疹病毒，会导致主要器官的先天性畸形，如耳聋、先天性青光眼、白内障、小眼球、小头畸形、脑膜脑炎、智力障碍、动脉导管未闭、心房或室间隔缺损、血小板减少性紫癜、脾肿大、生后24小时内黄疸和放射线性骨病等。中等程度以上的先天性风疹综合征病例出生时就能发现，但轻微的心脏受累或耳聋出生后数月甚至数年后才会表现出来，但早期进行科学的检查能够发现这些潜在的疾病，及早采取治疗措施，避免导致更严重的问题。请您注意下列划√选项：根据您的孩子目前的临床表现，医生认为有患有先天性风疹综合征的可能，建议您带孩子进行进一步专科检查，以确定诊断：1.心内科专科检查2.眼科专科检查3.五官科听力检查4.其他相关科室根据您孩子的临床表现和实验室结果，您的孩子诊断为先天性风疹综合征，医生建议您带孩子进行进一步专科检查，以便早期发现其他的潜在疾患，及时治疗。1.心内科专科检查2.眼科专科检查3.五官科听力检查4.其他相关科室在您的孩子被明确排除先天性风疹综合征或者证明没有风疹传染性之前，建议您采取必要的隔离措施：1.避免您孩子与周围的孕妇接触。2.避免您孩子与尚未接种风疹疫苗的其他儿童接触。3.定期接受疾病预防控制人员的随访。建议您带孩子到下列定点医院进行进一步检查：1.________________________________2．________________________________医生：附件2-6先天性风疹综合征病例随访表病例编号：□□□□□□-□□□□-□□□（行政区划编码-年份-病例序号）一、基本信息1.1患者姓名：（患儿母亲姓名：患儿父亲姓名：）1.2性别：男女出生日期：年月日1.3家庭现住址(详填)：省地（市）县（区）乡（镇、街道）村（居委会）（门牌号）二、随访情况 随访情况 随访次数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 随访日期 是否失访 是否死亡，如是，请填写死亡日期 确诊的先天性心脏病名称，确诊医院，确诊日期 确诊的眼部疾病名称，确诊医院，确诊日期 确诊的听力障碍程度，确诊医院，确诊日期 确诊的其他先天缺陷名称，确诊医院，确诊日期 本次采集病原学标本的名称，采集日期 实验室检测结果 实验室名称 收到标本日期 病毒鉴定方法 风疹病毒鉴定结果 风疹病毒基因分型 结论（请选择并打√） 排除病例 临床诊断病例 CRS/CRI确诊病例排毒期 CRS/CRI确诊病例停止排毒 调查人员 调查单位 完成调查日期 附件3风疹和先天性风疹综合征实验室技术指南（试行）风疹与其它许多发热出疹性疾病临床表现相似，如果仅仅基于临床症状和体征进行风疹的诊断是不可靠的，而且有近50%的风疹病毒感染者表现为亚临床感染。实验室可以使用下列一种或多种方法来提供风疹病毒感染的证据：1.在经认证的实验室中进行风疹IgM抗体的检测。IgM抗体检测是风疹实验室最常用于快速诊断风疹病毒感染的标准方法。但如果在样品采集前8天至8周内患者接种过含有风疹疫苗成分的疫苗，并且在社区中没有风疹传播的证据，也没有其他流行学证据支持，即使风疹IgM抗体检测阳性也不能判定为风疹病毒感染。如果患者感染了细小病毒B19，患传染性单核细胞增多症时嗜异性试验阳性，或类风湿因子阳性，此时风疹IgM抗体检测结果可能出现假阳性。2．风疹病毒IgG抗体阳转或滴度四倍及四倍以上升高（急性期血清在发病后尽早采集，恢复期血清在2-3周后采集）但如果在样品采集前8天至8周内患者接种过含有风疹疫苗成分的疫苗，并且在社区中没有风疹传播的证据，也没有其他流行学证据支持，则不能判定为风疹病毒感染。（注意：双份血清必须进行平行检测）。3．在合适的标本中检测到风疹病毒基因组。如上所述的标本，常可直接用RT-PCR检测风疹病毒。迟于病毒分离标本采集时间3-4天的标本仍可用于RT-PCR。对于因为冷藏运输导致病毒分离可能为阴性的标本，采取RT-PCR可能会有阳性结果。4．风疹病毒分离阳性。对于风疹疑似病例来说，可采集咽拭子标本进行风疹病毒的分离；对CRS病例进行实验室确诊时，可以采集鼻部标本、喉部标本、血液、尿液等标本进行风疹病毒分离，也可在活组织检查或尸体解剖时采集组织标本进行病毒分离。一、标本的采集、运输、接收和处理出现临床症状后，在正确的时间内进行标本采集对于实验结果的解释和得到正确结论非常重要。当采集标本用于血清学诊断来确定是否为风疹和先天性风疹综合征（CRS）病例时，最好同时采集用于病毒检测的标本。由于每种标本采集都有不同的要求，因此采集什么类型的标本取决于当地资源、用于标本运输和保存的设备等条件。这些需要病毒学、流行病学工作者和临床医生的密切配合以及制定详细的计划、责任分配和培训。（一）标本的记录对于所有采集到的标本,需要完整填写标本送检表，参见附录1。（二）用于抗体检测的血清学标本1.用于风疹IgM检测的血标本卫生机构于出疹后28天内采的首份血均为合格血。但是，在出疹后的5天内，部分患者风疹特异IgM抗体检测可能出现阴性结果，应在出疹后6-28天内再采集第二份血标本。在以下情况下实验室可能需要采集第二份血标本进行核实诊断：（1）第一份血标本出疹后5天内采集，并且ELISA的IgM抗体检测结果为阴性。（2）IgM抗体ELISA检测多次结果均为可疑。（3）最初检测结果为阴性，但临床上要求确切诊断的病例。第二份血应在出疹后6-28天内采集。如果第二份血采集时间与第一份血采集时间相隔10天以上，那么第二份血在检测IgM抗体的同时，还可以用定量方法检测IgG抗体水平与第一份血相比是否升高。2.用于CRS疑似病例检测的血标本应尽快采集每一个刚出生的CRS疑似患儿的血液标本（1ml）。新生儿出生后无菌采集的脐带血（避免母血污染）也可用于风疹IgM抗体检测，当检测阳性时，应尽早采集静脉血复核。在出生后最初的6个月内，几乎所有CRS患儿的风疹IgM检测呈阳性；而在出生后6个月-12个月内，只有60%的CRS患儿的风疹IgM检测呈阳性。为了监测，单份血液标本用来证实CRS通常是足够的。然而，如果第1份标本的风疹IgM检测为阴性，而对于确实存在临床或流行病学意义的CRS可疑病例，则需要采集第二份血标本。CRS疑似病例除检测风疹IgM抗体外，还可检测风疹IgG抗体来进行诊断，因为CRS病例的IgG抗体持续时间超过母传风疹IgG抗体预期衰减的时间。应在预计母传风疹IgG抗体消失时，并在常规风疹疫苗接种之前采集血清标本进行风疹IgG抗体的检测。3.血标本的采集和处理步骤（1）静脉穿刺取血收集于无菌管中（儿童和成人取3ml，婴幼儿取2ml），并立刻在无菌管上标明患者的姓名、采血日期和ID号。并确认所标记的信息与病例调查表盒实验室登记表中的信息相符。（2）全血在进行血清分离前可置4–8℃保存24小时，但不可冷冻保存。（3）待全血凝集后，于1000×g离心10分钟分离血清。如没有离心机，可将全血放于冰箱内（4-8℃），直到凝块彻底收缩与血清全部分离开（不能超过24小时）。（4）在无菌环境下，用小口吸管（避免吸到红细胞）将血清小心转移至外螺旋盖带垫圈的无菌管中。管壁标签应标明病人姓名或病例号、标本采集日期和标本类型。（5）在采集和处理血液标本的整个过程中，要严格遵循无菌原则和实验室生物安全原则。4.血清标本的保存和运输（1）血清标本的保存血清在运输之前应置于4–8℃保存，保存时间不能超过7天。如果需要保存更长时间，则应置于-20℃或更低温度冷冻保存，运送过程中要放置冰袋保温。反复冻融会对IgM抗体的稳定性产生不利影响。通常情况下，血清标本在采集后尽快运送到实验室，不要为了采集下一批标本而推迟运送时间。（2）血清标本的运输将装有血清的密封小管标记好后，置于可密封的塑料袋或小盒，同时放入吸收性材料（如：脱脂棉）以防漏液(图12A)。然后再将装有标本的密封袋放入绝热容器中。标本送检单应放入另一个塑料袋中，用胶带固定在绝热容器的顶部(图1)。如果使用冰袋（冰袋已冷冻），可先将冰袋放置于绝热容器的底部和周围，标本放置在中间，然后再在标本顶部放置冰袋。标本采集者跟实验室协商安排标本运送时间。确定之后，要通知标本接收者标本运输日期和运输方式。实验室收到血清标本后应尽快进行IgM检测。血清短期保存<7天可置于4℃，长期则应置于-20℃或更低温度下保存。图1.血清标本的包装。A：密封袋或盒中的单个标本的包装；B：多个标本放入绝热容器中的包装（三）用于病毒分离的标本对于风疹病例，用于风疹病毒分离的标本应在出疹后尽早采集。推荐采集咽拭子标本来进行风疹病毒分离。虽然风疹在出疹前1周至出疹后1周内都可能从咽部分离到风疹病毒，但出疹后1至3天采集的标本病毒分离成功率最高。风疹病毒对热敏感，标本如不冷藏保存会导致病毒感染力显著下降。因此，样本采集后尽快在冷藏状态下运送到实验室。对CRS病例进行实验室确诊的时候，可采集鼻部标本、喉部标本、血液、尿液等标本进行检测，也可在活组织检查或尸体解剖时采集组织标本进行检测。CRS患儿在很长时期内都可以排出风疹病毒，>80%的CRS患儿在出生第一个月时能从鼻咽分泌物中分离到风疹病毒，1-4月龄时检出率为62%，5-8月龄时检出率为33%，9-12个月龄时检出率为11%。因此，为了保证标本的病毒分离成功率，应在出生后尽快采集，最多不要超过出生后半年。CRS病例在排出风疹病毒时是有感染性的，因此医院内工作人员要进行风疹免疫，这样可以避免风疹在医院内的传播。1.用于病毒分离的咽拭子标本的采集和运输用于病毒分离的咽拭子标本应于出疹后尽快采集，这时的病毒含量最高；（1）用无菌棉拭子用力在咽后壁擦拭，获得上皮细胞。然后，将拭子置于装有病毒运输液的外螺旋盖带垫圈的冻存管中（病毒运输液通常为2ml左右，如果量过多会稀释病毒，降低接种细胞时病毒的滴度，影响病毒的分离率；如果量过少则不足以应付多种检测方法）；（2）咽拭子标本应于采集后48小时内冰盒冷藏（4～8℃）送至实验室；（3）如果标本不能及时运送，应摇动拭子使细胞洗脱于病毒运输液中，可丢弃拭子；（4）于4～8℃条件下，48小时内运达实验室。并将全部标本都置于-70℃保存；如果没有低温冰箱，运送之前也可于4℃保存。由于冰晶会使病毒失活，所以标本应避免反复冻化或保存于-20℃。如果没有-40℃或-70℃冰箱，建议将标本置于4℃冰箱保存。如果标本已冷冻收集于2-3ml细胞培养液或PBS中，则保持标本冷冻状态送达实验室。如果收到的是原始拭子，向管中加入2mlDMEM，用涡旋振荡器振荡混匀，静置1小时，使病毒从拭子上洗脱。然后将拭子于管壁用力挤压，尽量排出液体。液体中如有大量碎片，通过离心去除。得到的标本收集于外螺旋盖带垫圈的冻存管中，保存于-70℃。2.用于病毒分离的尿液标本的采集和运输采集10-50ml尿液收集于无菌容器中，离心前于4-8℃保存。可以通过离心收集细胞沉淀然后重悬浓缩病毒。尿液离心前切勿冷冻。全尿可置于密闭容器中4℃运输，但最好于24小时内离心。4℃，500xg(约1500rpm)，离心5至10分钟。保存2-3ml上清（如果沉淀未检测出，上清也可以用来进行检测），于-70℃保存；沉淀物用2-3ml无菌运输液、组织培养液或PBS重悬。重悬物可保存于4℃，48小时内送至相关实验室。或者，用病毒运输液重悬后冻于-70℃，在干冰存在条件下置于密封性好的螺口管内运送。3.试剂的配制（1）病毒运输液(Virustransportmedium，VTM) Hanks×10基础盐溶液 100ml 无菌去离子水 900ml 无菌20%的牛白蛋白 10ml 无菌青链霉素溶液(PSS) 10ml 用4.4%的碳酸氢钠调PH值到7.4 无菌操作，向去离子水中加入Hanks×10基础盐溶液，20%的牛白蛋白和PSS。用4.4%的碳酸氢钠调PH值到7.4，每次加入后充分混匀。向每个25ml容量的螺口瓶里分装2ml液体，并确保拧紧瓶盖。4℃存放不超过6个月。（2）青霉素链霉素溶液(PSS)溶解1×106单位的青霉素和1克链霉素在100ml的PBS中，分装5ml-20℃保存。1ml上述PSS液加入100ml培养液中，最终浓度青霉素为100单位，链霉素为100mg/ml。（四）用于RT-PCR诊断的标本所有收集、运送到实验室用于病毒分离的标本，都可用于RT-PCR检测。二、实验室检测方法（一）血清学检测检测血清中麻疹或风疹特异性IgM抗体是风疹实验室快速诊断的标准方法。检测恢复期对比急性期血清特异性IgG抗体升高的方法也可用于对感染进行证实，但要求两份血标本取样时间需相隔10～30天，并对两份血清标本进行平行检测。由于第二份血常常难以获得，所以检测单份血的IgM抗体就成为首选方法。如果IgM抗体检测结果不能下结论时，就有必要在第一份血（急性期血）采集时间间隔10-30天后采集第二份血（恢复期血），检测IgG抗体滴度是否升高。不过，第一份血清标本应于出疹后10日内采集。并且，用IgG检测法对风疹感染进行实验室证实时，要求风疹特异性IgG滴度出现4倍升高或阳转。IgG抗体检测法要求在同一时间、使用同一试剂对急性期和恢复期血清IgG抗体同时进行检测。不同实验判定抗体滴度升高的标准不同，EIA的吸光度不等于抗体滴度，吸光度增加与抗体滴度增高不成线性关系。对于CRS病例的实验室确诊，血清学方法包括检测风疹IgM抗体，或IgG抗体持续时间超过母传风疹IgG抗体预期衰减的时间。对于CRS病例来说，通常在出生后几年内都可检测到IgG抗体，但是使用IgG来证实CRS病例时，需要具备两个条件：母传IgG抗体的消失；同时无后天的风疹病毒感染。如果在未打疫苗的情况下，10月龄时未检测到IgG抗体，可排除CRS诊断。1.风疹IgM抗体检测：如使用德国维润/赛润风疹IgM检测试剂盒。（1）检测原理：用抗原包被微量板孔，制成固相载体。加患者血清到板孔中，其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合，形成免疫复合物。除去多余物质后，加入碱性磷酸酶标记的IgM抗体，使之与上述免疫复合物反应。洗板，除去多余的结合物，加入底物（对硝基苯磷酸盐）。其与酶结合的免疫复合物反应，产生有颜色产物，颜色强度与特异性抗体含量成正比。（2）操作步骤：RF吸附：取血清标本10µl加到含500µl标本稀释液的EP管中，震荡混匀；从混匀稀释液中取100µl加到一新EP管中，分别再加入40µl的RF-吸附剂（T4）和60µl标本稀释液，震荡混匀，血清终稀释浓度1:100；于室温吸附15Min或4℃过夜。上样：将稀释的样本，和立即可用的对照血清/标准血清，加到微量孔内，每孔100µl。孵育：将样品于湿盒内37℃（±1℃）孵育60分钟（±5分钟）；孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔（使用自动洗板机或手工洗板）：吸去或甩去洗液；每孔内加入300微升洗液；吸去或甩去洗液；重复洗涤过程3次（共4次）；将微孔板翻转过来在纸巾上拍打，使微孔中不再含有液体。加入酶标记抗体：于相应孔内（底物空白除外）加入100微升IgM酶标记抗体；湿盒内37℃（±1℃）孵育30分钟（±1分钟）。孵育后，以洗液清洗板孔（洗涤见上）；加入底物：于每孔内加入100微升底物溶液（包括底物空白孔）；·湿盒内37℃（±1℃）孵育30分钟（±1分钟）。终止反应：每孔内加入100微升终止液，轻微振荡微孔板以混合溶液。读取吸光度：以底物空白为空白对照液，60分钟内读取405纳米的OD值，建议参考波长范围为620-690纳米（例如650纳米）。质控标准：底物空白的OD值必须＜0.25；阴性对照必须为阴性；ELISA定量试验：标准血清的平均OD值必须在有效范围内，此范围已在试剂盒专用的质量控制证书中给定（减去底物空白之后！）ELISA定性试验：阳性对照的平均OD值必须在有效范围内，此范围已在试剂盒专用的质量控制证书中给定（减去底物空白之后！）如果未达到以上标准，则试验无效且必须重做。（3）结果判定每个试剂盒内均备有一个标准曲线和一个评估表，因而每一个OD值都可得到一个抗体活性值。标准血清的参考值和有效范围已在评估表格（质量控制证书）中给定。所有的OD值在评估前必须先减去空白孔（A1）。方法1：定性评估：为确定临界值范围，请将已测得标准血清的OD平均值与质量控制证书上给出的数据相乘（见专用公式），例如：OD=0.502xMW(STD)临界值上限OD=0.352xMW(STD)临界值下限如果得到的标准血清的平均消光度值是0.64,那么临界值的范围即为0.225-0.321。方法2：定量评估抗体活性：计算标准血清两个OD值的平均值，并检查其是否在给定的有效范围内；然后，根据标准血清的平均OD值在下表中确定对应的数据栏；用已测得的患者样品OD值查出“IU/ml或U/ml”栏中对应的抗体活性。方法3：利用SERIONeasybase4PL软件/SERION评估软件进行自动评估：输入4个参数和标准血清的参考数值后，联机软件能立即自动计算出样品的抗体活性。2.风疹IgG抗体检测：如使用德国维润/赛润风疹IgG检测试剂盒。（1）检测原理：用抗原包被微量板孔，制成固相载体。加患者血清到板孔中，其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合，形成免疫复合物。除去多余物质后，加入碱性磷酸酶标记的IgG抗体，使之与上述免疫复合物反应。洗板，除去多余的结合物，加入底物（对硝基苯磷酸盐）。其与酶结合的免疫复合物反应，产生有颜色产物，颜色强度与特异性抗体含量成正比。（2）检测步骤：血清1:100稀释后，将稀释的样本，和立即可用的对照血清/标准血清，加到微量孔内，每孔100µl。孵育：将样品于湿盒内37℃（±1℃）孵育60分钟（±5分钟）；孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔（使用自动洗板机或手工洗板）：吸去或甩去洗液；每孔内加入300微升洗液；吸去或甩去洗液；重复洗涤过程3次（共4次）；将微孔板翻转过来在纸巾上拍打，使微孔中不再含有液体。加入酶标记抗体：于相应孔内（底物空白除外）加入100µlIgG酶标记抗体；湿盒内37℃（±1℃）孵育30分钟（±1分钟）。孵育后，以洗液清洗板孔（洗涤见上）；加入底物：于每孔内加入100微升底物溶液（包括底物空白孔）；·湿盒内37℃（±1℃）孵育30分钟（±1分钟）。终止反应：每孔内加入100微升终止液，轻微振荡微孔板以混合溶液。读取吸光度：以底物空白为空白对照液，60分钟内读取405纳米的OD值，建议参考波长范围为620-690纳米（例如650纳米）。质控标准：底物空白的OD值必须＜0.25；阴性对照必须为阴性；ELISA定量试验：标准血清的平均OD值必须在有效范围内，此范围已在试剂盒专用的质量控制证书中给定（减去底物空白之后！）ELISA定性试验：阳性对照的平均OD值必须在有效范围内，此范围已在试剂盒专用的质量控制证书中给定（减去底物空白之后！）如果未达到以上标准，则试验无效且必须重做。（3）结果判定每个试剂盒内均备有一个标准曲线和一个评估表，因而每一个OD值都可得到一个抗体活性值。标准血清的参考值和有效范围已在评估表格（质量控制证书）中给定。所有的OD值在评估前必须先减去空白孔。（二）分离和鉴定风疹病毒使用图2检测策略进行风疹病毒的分离和鉴定。图2.分离和鉴定风疹病毒检测策略1.逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法鉴定风疹病毒（1）RNA提取可使用商业化试剂盒来提取RNA，如使用QIAGENViralRNAMiniExtractionKit（CAT：52904）从临床标本或病毒分离培养物中提取病毒RNA；向一支1.5ml离心管中加入560μl的AVL缓冲液（含CarrierRNA）；再向这支离心管中加入140μl临床标本或病毒分离培养物，充分混匀至少15s；室温下（15℃~25℃）放置10min，然后瞬时离心；加入560μl纯乙醇，充分混匀至少15s，瞬时离心；小心加入约630μl的混合溶液至QIAamp柱中（试剂盒附带），将QIAamp柱套在收集管上，然后8000rpm离心5s，使液体通过滤膜；弃去收集管中的液体，重复第6步骤；弃去收集管中的液体，小心加入750μl的AW1缓冲液，8000rpm离心5s，使液体通过滤膜；弃去收集管中的液体，小心加入750μl的AW2缓冲液，8000rpm离心5s，使液体通过滤膜；弃去收集管中的液体，13000rpm再次离心1min；将QIAamp柱放入一支干净的1.5ml的离心管中；向膜上加入40μl的EB缓冲液，然后室温下静置2~5min；在离心机中以8000rpm的速度离心1min，离心下来的液体即为所需的核酸溶液。（2）RT-PCR扩增1）引物序列合成RV11（上游）：5′-CAACACGCCGCACGGACAAC-3′RV12（下游）：5′-CCACAAGCCGCGAGCAGTCA-3′图3.RT-PCR法鉴定风疹病毒示意图2）实验 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 ：在PCR记录纸（实验记录纸）上记录本次实验操作者姓名，实验日期，所鉴定标本的名称以及标本的顺序，与PCR仪排列的顺序一致。标记好加标本和对照的PCR管（阳性对照，阴性对照和试剂对照）。A：阳性对照：无感染性的对照RNA。B：细胞对照：使用未接种病毒的细胞悬液，最好使用与扩增病毒所用的细胞类型与代数相同的细胞。每一次实验设2个细胞对照。C：试剂对照：用去离子水代替标本。3）RT-PCR扩增在冰面上融化标本和各种PCR试剂cDNA合成：配下列试剂主溶液5×PCRBuffer····························································2.0μldNTPs（2.5mMeach）················································1.5μlRNA酶抑制剂（RNasin,40U/μl）··································0.5μlAMV逆转录酶（10U/μl）···········································1.0μl下游引物RV11(0.1μg/μl)·············································1.0μl下游引物RV12(0.1μg/μl)·············································1.0μl7.0μl取3μl病毒RNA溶液与试剂主溶液混合，每次实验要设立阴性对照.，然后在PCR仪上进行逆转录，反应步骤为：42℃反转录45min，95℃变性5min灭活逆转录酶。PCR扩增：配制下列主溶液MasterMIX(Promega)·················································12.5μlRV11(0.1μg/μl)·························································1.0μlRV12(0.1μg/μl)·························································1.0μlcDNA······································································2.5μlRNaseFreedH2O························································8.0μl25.0μl在PCR仪上进行扩增反应，反应步骤如下：95℃······································································2min95℃·······································································15s45℃·······································································30s×35个循环72℃·······································································30s72℃·····································································10min4℃·······································································Soak（3）电泳分析1）将已经聚合的3%的琼脂糖凝胶放在电泳装置上；2）在帕拉膜（Parafilm）上加上6×电泳载样缓冲液（每个反应需1μl）。再加上5μl的PCR反应产物与之混合；3）将电泳缓冲液倒在电泳装置中，用吸尖将样品与载样缓冲液的混合溶液加到孔中；4）盖上盖子，接通电源，以10V/cm电压（恒定电压）电泳，大约35~40min，直到溴酚蓝跑到凝胶的底部的时候，停止电泳；5）将胶取出，并注意保持凝胶的方向；6）在1μg/ml的溴化乙锭溶液中染色15min，——注意：溴化乙锭溶液是有毒、致畸、并且致肿瘤的物质，操作时要加小心，并戴双层手套。如果储存在避光的容器中，溴化乙锭溶液可以重复使用；7）在蒸馏水中涮一下凝胶；8）在紫外透射仪下观察PCR产物电泳结果，并照相作记录。2.Real-timeRT-PCR方法鉴定风疹病毒RNA提取：步骤同RT-PCR法鉴定风疹病毒中的RNA提取步骤。使用荧光Real-timeRT-PCR试剂，配制如下主溶液H2O····························································3.5μl2×PCRBuffer···············································12.5μlEXTAQHS····················································0.5μlRT-Enzyme····················································0.5μlRVProbe(终浓度为100nM)·······························1.0μl上游引物(终浓度为500nM)·······················1.0μl下游引物(终浓度为500nM)······················1.0μlRNA······························································5μl25μl反应条件42℃··································································30min95℃····································································2min95℃····································································15s×40个循环60℃···································································1min（4）结果分析条件设定和结果判断阈值设定原则以阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线的最高点，结果显示阴性为准，或可根据仪器噪音情况进行调整。Ct值无数值的标本为阴性样本Ct值≤35.0的样本为阳性Ct值≥35.0的样本建议重做。重做结果无数值者为阴性，否则为阳性。风疹病毒的分离。3.风疹病毒的分离（1）试剂配制：DMEM生长液（GM）和DMEM维持液（MM） 试剂 GM MM DMEM(4,500mg/L葡萄糖(高糖) 85ml 93ml L-谷氨酰胺200mM 1.0ml 1.0ml 胎牛血清 10.0ml 2.0ml NaHCO3溶液（7.5%） 2.0ml 2.0ml P.S溶液（抗生素） 2.0ml 2.0ml（2）病毒分离的细胞系：推荐使用Vero或Vero/SLAM细胞进行风疹病毒的分离。Vero细胞：非洲绿猴肾细胞Vero/SLAM细胞：是一种转染编码人SLAM（信号淋巴细胞激活因子）基因质粒的Vero细胞，是由日本九州大学的YusukeYanagi博士研发的。分离风疹病毒的敏感性和Vero细胞相同。（3）细胞传代[在实验台上]检查细胞的质量，是否为长满单层的健康细胞或是否出现污染现象；[在洁净工作台中]用EDTA溶液轻洗细胞2次。轻轻倒掉细胞培养瓶内的生长液，轻轻加入3mlEDTA溶液，轻洗单层的细胞。倒掉EDTA溶液，再重复1次。[在洁净工作台中]用消化液（胰酶/EDTA）处理细胞；将胰酶/EDTA（0.25%胰蛋白酶1ml和1:5000EDTA溶液5ml混合）加入到单层细胞上，使消化液均匀地分布在细胞层上。37℃孵箱中孵育约5min；把培养瓶放到37℃孵箱，作用约5min，当在显微镜下观察细胞变圆时，将液体倒入废液缸。用手掌轻拍培养瓶，使细胞自瓶壁脱落。[在洁净工作台中]用生长液重悬细胞；按事先定好的分瓶比例，通常是将1瓶细胞分成3瓶（1：3），所以用30ml生长液重悬细胞（一个底面积25cm2细胞培养瓶加入10ml生长液即可），生长液中的血清可终止胰蛋白酶的作用。用无菌吸管轻吹细胞悬液数次，直至细胞团被吹散，分别取10ml至底面积25cm2的细胞培养瓶中。在细胞培养瓶上标明实验者的姓名、细胞名称、传代日期及细胞代数；盖紧细胞培养瓶或培养管的盖子，置于37℃孵箱培养；细胞一般3d左右将长成单层，通常每5~7d传代一次。细胞每周至少传一次，传代后几天可换维持液以防止细胞过度生长。细胞复苏后最多传代15代。（4）风疹病毒的分离风疹病毒的孵育最好在35℃进行，因为一些风疹毒株在这个温度下生长最好。如果不能在35℃中孵育，37℃也是可以选择的。如果样本中病毒量过低，传代时不直接接种培养液，而是冻融感染细胞使细胞裂解后传代（即含有细胞内和培养液中的病毒）。准备细胞铺满85-90%的25cm2的方瓶，倒掉液体加入2ml含1%胎牛血清的PBS液和0.5-1ml的标本液（为盲传第一代）。35℃孵育1小时，然后倒掉液体加入5ml的含5%胎牛血清的DMEM-PS液体。注意:如果有污染问题，用0.2µm的滤膜过滤临床标本去除真菌和细菌。也可以在接种前向1ml的临床标本中加入0.1ml浓度为1000µg/m的庆大霉素、0.1ml浓度为100µg/m的两性霉素b和5µl浓度为1000×的青/链霉素4°C放置30分钟。35°C孵育7天，每天观察细胞，发现污染现象丢弃（如絮状、液体发黄、细胞漂浮）。风疹CPE（细胞变圆、分离）大多观察不到。接种后第七天吸出0.5ml液体接种到新的细胞中，为盲传第二代（注意：与麻疹不同，风疹病毒颗粒可以释放到细胞外，因此培养液或磕下细胞都可以直接用于病毒传代）。另外-70℃保存第一代的培养液1ml。第二代观察7天后，取细胞悬液用于RT-PCR或Real-timeRT-PCR检测，同时保存1ml的培养液。如果检测结果为阳性，通常冻存一管第二代病毒液。取0.5ml病毒融解液接种到新的细胞中（剩下的0.5ml病毒液和盲传第一代保存的病毒液作为备份使用），35℃孵育一周后去5-10ml的病毒液-70℃保存，可用于分子流行病学研究。如果检测为阴性，再盲传一代，共盲传3代，然后再次进行RT-PCR或Real-timeRT-PCR检测，如果仍为阴性，则记录标本为风疹阴性。如果样本中病毒量过低，传代时不直接接种培养液，而是冻融感染细胞使细胞裂解后传代（即含有细胞内和培养液中的病毒）。填写风疹病毒送检表（附录2），将保存的病毒分离物在冷藏条件下及时送至国家麻疹/风疹实验室进行序列分析。（5）几个概念：A：毒性反应：如果在接种后1-2d内细胞快速地调亡，这可能是由于标本中含有毒性物质而导致的非特异性毒性反应。这些已接种标本的细胞瓶应在－20℃冻存，融化后取0.5ml接种到同一类型细胞中（此时是第二代）。如果又出现了毒性反应，那么应该取原始标本用PBS稀释10倍，再次接种到同种细胞中。这时应被认为是第一代。B：微生物污染：由于细菌污染而造成培养液混浊或细胞死亡，用0.2µm的滤膜过滤临床标本去除真菌和细菌。也可以在接种前向1ml的临床标本中加入0.1ml浓度为1000µg/m的庆大霉素、0.1ml浓度为100µg/m的两性霉素b和5µl浓度为1000×的青/链霉素4°C放置30分钟。C：盲传：一周之后传代细胞会老化，甚至细胞对照也出现了病变。这时已接种标本的细胞瓶应在－20℃冻存，融化后取0.5ml接种到同一类型的新鲜单层细胞中，再观察7-10d。与麻疹病毒不同，在对大多数临床标本进行风疹病毒分离时，即使在传了几代之后也不易观察到细胞病变。因此，如果在盲传三代后使用RT-PCR或Real-timeRT-PCR检测结果为阴性的话，那么认为这个标本是阴性的。三、生物安全根据2006年1月11日卫生部制订的《人间传染的病原微生物名录》，风疹病毒的危害程度分类为第三类，病毒培养和未经培养的感染性材料的操作应在BSL-2级实验室进行。灭活材料和无感染性材料的操作可在BSL-1级实验室进行。风疹病毒相关标本的运输属于B类包装，航空运输UN编号为UN3373。操作鼻咽拭子、尿液和血液标等临床标本时要注意生物安全，要在II级生物安全柜中进行标本处理、病毒分离和病毒鉴定，无风疹疫苗免疫史的人员要进行风疹疫苗免疫。所有操作应遵守国家相关法律法规。附录1风疹疑似病例血标本送检及实验室检测结果登记表（参考）地区（市、州、盟）县（市、区、旗）送样单位：送样人：送样日期：年月日标本运输方式：1.冷藏2.干冰3.其他________收样单位：收样人：收样日期：年月日 标本编号（1） 病例编号（2） 姓名（3） 性别（4） 出生日期（5） 现住址（6） 末剂风疹疫苗时间（7） 出疹日期（8） 是否为暴发病例（9） 是否有接触史 第几份血标本（10） 采样日期（11） 标本状况（12） 风疹IgM抗体检测 风疹IgG抗体检测 备注 检测结果（13） 报告日期（14） 检测结果（15） 报告日期（16） 说明：1．向实验室送检血清标本使用本表。标本编号由采样单位编写。第1-12项病例及标本基本信息由送检单位填写用于检测单位标识病例，收样日期及第12-16项由检测单位填写。2．现住址：填写至县级即可。第几份血标本：指采集该病例的第几份血标本，第一份血标本填写1，第二份血标本填写2。3．标本状况:由收样实验室判断并填写，①合格②不合格。合格指出疹后28天内采集，无溶血，无污染，在冷藏条件下保存、运输。4．检测结果：①阳性②阴性③待定。附录2CRS疑似病例血标本送检及实验室检测结果登记表（参考）地区（市、州、盟）县（市、区、旗）送样单位：送样人：送样日期：年月日标本运输方式：1.冷藏2.干冰3.其他________收样单位：收样人：收样日期：年月日 标本编号（1） 病例编号（2） 姓名（3） 母亲姓名（4） 性别（5） 出生日期（6） 现住址（7） 症状出现日期（8） 就诊日期（9） 临床症状（10） 病例定义（11） 第几份血标本（12） 采样日期（13） 标本状况（14） 风疹IgM抗体检测 风疹IgG抗体检测 备注 检测结果（15） 报告日期（16） 检测结果（17） 报告日期（18） 说明：1．向实验室送检血清标本使用本表。标本编号由采样单位编写。第1-13项病例及标本基本信息由送检单位填写用于检测单位标识病例，收样日期及第12-16项由检测单位填写。病例定义：①可疑CRS病例②临床证实CRS病例2．现住址：填写至县级即可。第几份血标本：指采集该病例的第几份血标本，第一份血标本填写1，第二份血标本填写2。3．标本状况:由收样实验室判断并填写，①合格②不合格。合格指出生后6个月内采集，血清量不少于0.5ml，无溶血，无污染，在冷藏条件下保存、运输。4．检测结果：①阳性②阴性③待定。附录3风疹疑似病例咽拭子标本送检及实验室检测结果登记表（参考）地区（市、州、盟）县（市、区、旗）送样单位：送样人：送样日期：年月日标本运输方式：1.冷藏2.干冰3.其他________收样单位：收样人：收样日期：年月日 标本编号（1） 病例编号（2） 姓名（3） 性别（4） 出生日期（5） 现住址（6） 末剂风疹疫苗时间（7） 出疹日期（8） 是否暴发（9） 采样日期（10） IgM检测结果（11） IgG检测结果（12） 标本状况（13） 病毒分离所用细胞 标本鉴定结果 省级报告日期（18） 风疹病毒鉴定 国家报告日期（21） 野毒株命名（22） 备注（23） 种类（14） 代次（15） RT-PCR(16) Real-timeRT-PCR(17) 结果（19） 基因型（20） 说明：1．向省级送检病原学标本和向国家级送检病毒分离物可通用此表。第1-12项病例及标本基本信息由送检单位填写用于检测单位标识病例2．现住址：填写至县级即可。3．标本状况：由收样实验室判断并填写，①合格②不合格。4．细胞种类：①Vero-slam细胞②Vero细胞③其他详注。标本鉴定结果：①阳性②阴性③待定。5．风疹病毒鉴定结果：①阳性②阴性③待定。风疹病毒基因型鉴定和野毒株命名：由国家麻疹实验室负责。附录4CRS疑似病例病原学标本送检及实验室检测结果登记表（参考）地区（市、州、盟）县（市、区、旗）送样单位：送样人：送样日期：年月日标本运输方式：1.冷藏2.干冰3.其他________收样单位：收样人：收样日期：年月日 标本编号（1） 病例编号（2） 姓名（3） 母亲姓名（4） 性别（5） 出生日期（6） 现住址（7） 症状出现日期（8） 就诊日期（9） 临床症状（10） 病例分类（11） 标本种类（12） 采样日期（13） IgM检测结果（14） IgG检测结果（15） 标本状况（16） 病毒分离所用细胞 标本鉴定结果 省级报告日期（21） 风疹病毒鉴定 国家报告日期（24） 野毒株命名（25） 备注（26） 种类（17） 代次（18） RT-PCR(19) Real-timeRT-PCR(20) 结果（22） 基因型（23） 说明：1．向省级送检病原学标本和向国家级送检病毒分离物可通用此表。第1-15项病例及标本基本信息由送检单位填写用于检测单位标识病例2．现住址：填写至县级即可。病例分类：①CRS疑似病例②CRS临床诊断病例③CRS实验室诊断病例eq\o\ac(○,4)先天性风疹感染（CRI）标本种类：①咽拭子②尿③其他注明。3．标本状况：由收样实验室判断并填写，①合格②不合格。4．细胞种类：①Vero-slam细胞②Vero细胞③其他详注。标本鉴定结果：①阳性②阴性③待定。5．风疹病毒鉴定结果：①阳性②阴性③待定。风疹病毒基因型鉴定和野毒株命名：由国家麻疹实验室负责。欢迎您的下载，资料仅供参考！致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习资料等等打造全网一站式需求有风疹病例密切接触史的孕妇血标本风疹IgM阳性参照孕妇风疹病例管理，随访调查血标本风疹IgM阴性间隔10-30天采集第二份血标本检测风疹IgM、IgGIgM阴性，或IgG阴性/无4倍升高IgM阳性，或IgG阳转/4倍升高提供医学建议参照孕妇风疹病例管理风疹疑似病例风疹病毒/基因阳性或血标本IgM阳性IgG抗体4倍升高血标本风疹IgM阴性实验室诊断病例麻疹IgM阳性麻疹IgM阴性或未检测出疹后6-28天采集标本出疹后5天内采集标本有其他明确原因无流行病学联系或有其他明确诊断有流行病学联系且无其他明确诊断排除病例临床诊断病例排除病例无其他明确原因无标本PAGE。