卵母细胞凋亡的分子机制

卵母细胞凋亡的分子机制 摘要细胞凋亡是机体生长发育、细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡的过程。由于细胞凋亡在正常胚胎和器官的发育、免疫反应,机体细胞数量的恒定与调控,无功能或异常细胞的清除,以及在多种遗传性与获得性疾病具有举足轻重的作用,故近几年细胞凋亡的研究已成为生命科学研究领域中的热点。卵母细胞是目前研究试管和转基因动物等的主要和最基本的 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 ,本文主要从分子机制对卵母细胞凋亡进行解读,旨在为临床研究提供更多科学的参考资料。 关键词卵母细胞细胞凋亡分子机制 从20世纪80年代末期以来,人们对细胞凋亡的认识逐渐深入,对细胞凋亡发生机理的了解越来越透彻,同时也发现这一过程包含着非常复杂的调控机制。尽管仍有许多问题甚至是关键的问题没有搞清楚,但近几年的研究在凋亡信号转导途径、细胞凋亡的生化反应机制以及细胞凋亡的基因调控等方面都取得了显著的进展。 一、细胞凋亡的生物学特征 从形态学观察,细胞凋亡的变化是多阶段的,细胞凋亡往往涉及单个细胞,即便是一小部分细胞也是非同步发生的。首先出现的是细胞体积缩小,胞间连接消失,与周围的细胞脱离,核质浓缩,核膜核仁破碎;胞膜有小泡状形成,胞膜结构仍然完整,最终可将凋亡细胞分割为几个凋亡小体[1]。 其次,细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA降解, 这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律, 所产生的不同长度的DNA片段约为 180~200 bp的整倍数,而这正好是缠绕组蛋白寡聚体的长度, 提示染色体DNA恰 好是在核小体与核小体的连接部位被切断, 产生不同长度的寡聚核小体片段。实验证明, 这种DNA的有控降解是一种内源性核酸内切酶作用的结果, 该酶在核 小体连接部位切断染色体DNA,这种降解表现在琼脂糖凝胶电泳中就呈现特异的梯状Ladder图谱, 而坏死细胞呈弥漫的连续图谱[2]。 最后,细胞凋亡的生化改变不仅仅是DNA的有控降解, 在细胞凋亡的过程中往往还有新的基因的表达和某些生物大分子的合成作为调控因子[3]。如在糖皮质激素诱导鼠胸腺细胞凋亡过程中, 加入RNA合成抑制剂或蛋白质合成抑制剂即 能抑制细胞凋亡的发生。 二、卵泡、卵母细胞凋亡的特征 卵泡闭锁在形态上出现一系列变化:卵母细胞染色体密集,核出现严重偏位、固缩;透明带膨胀、塌陷;颗粒细胞松散、萎缩并脱落进入卵泡腔内;卵泡液被吸收,卵泡壁塌陷,卵泡膜内层细胞增大,成多角形,并被结缔组织分隔成团索状,分散在卵巢基质中,形成能分泌雌激素的间质腺.在卵泡闭锁过程中,原始卵泡退化的数量最多,但凋亡小体(apoptotic body)被邻近巨噬细胞迅速吞噬,故这一过程并不明显。目前认为,原始卵泡、初级卵泡闭锁主要是由卵母细胞凋亡引起.在卵泡发育后期,有腔卵泡及排卵前成熟卵泡的闭锁,可以是卵母细胞自身凋亡引起也可能是由卵泡中颗粒细胞凋亡引起[4]。实验表明,闭锁卵泡中有凋亡细胞所特有的DNA梯带,正常卵泡则没有,表明在闭锁卵泡中有细胞凋亡发生[5]。 在卵母细胞成熟的各阶段,尤其在多胎动物,有大量的卵泡发生生理性闭锁, 颗粒细胞和卵母细胞发生凋亡.卵母细胞凋亡的特征表现有:细胞表面微绒毛消失;胞质凝集,核发生固缩成大团块,核碎裂成几部分;细胞碎裂成几个由质膜包围部分细胞器与核碎片结构,共同构成了凋亡小体,透明带破裂后,被侵入的吞噬细胞吞噬。 从形态学上讲,细胞凋亡贯穿于胎儿和成年期的卵泡当中,在次级和窦状卵泡中的颗粒细胞中可以检测到。这个过程当中的机制可以假设包含以下几个方面:(1)“质量控制”以剔除减数分裂异常现象。(2)缺乏存活因子。(3)自我牺牲的过程。 三、细胞凋亡的一般机制 细胞凋亡一般存在着两种机制[1]:一种是通过和在细胞表面受体与死亡因子结合而引起的细胞凋亡,另外一种是线粒体介导的细胞凋亡。 死亡受体介导的细胞凋亡是通过将死亡受体(如Fas,TNFR,IFN和TRAIL 受体)结合到配体上产生的,这种结合启动了受体的结扎和凋亡信号通过死亡区域:死亡效应结合域和半胱天冬酶补充的区域的传递。死亡区域主要存在于细胞中蛋白中,例如:FADD,TRADD,RIP以及一些跨膜蛋白(TNF-R1, TRAIL-R1/DR4和TRAIL-R2/DR5)中。 线粒体介导的凋亡主要是启动Bcl-2蛋白是细胞色素c从线粒体中释放出来,细胞色素c与Apaf-1结合到半胱天冬酶9,之后引起级联反应,导致细胞死亡。 上面图表简单详细的说明了两种细胞凋亡的机制。 四、卵泡发育动力学 我们对卵子发生、卵泡发生、卵母细胞的丢失、卵泡选择和闭锁仍是不完全的。在人类,卵巢中卵泡的储量在胎儿时期已经建立起来了,之后在卵泡发生的过程中不断的丢失,在出生前,三分之二的卵母细胞通过细胞凋亡的形式失去了。因此,细胞凋亡是卵巢功能和发育中必不可少的成分。另外,在胎儿时期,细胞凋亡主要存在于卵母细胞中,而成年时期主要是颗粒细胞引起的细胞凋亡。下面的示意图准确的说明了这一情况。 (一)胎儿时期的卵泡发育 在怀孕第四周的不久,原始生殖细胞从卵黄囊转移到了生殖脊,并增殖到7000000个细胞,在怀孕的下半个时期,细胞数量减少到1000000。因为卵母细胞的凋亡,这个细胞的数量显著下降,在怀孕的第14到28周细胞凋亡率最高,之后会下降。另外线粒体质量对卵母细胞生存或者死亡起着至关重要的作用。有研究表明,显微注射颗粒细胞提纯的线粒体可以减少这些细胞的凋亡,出生后,大多数卵母细胞死亡,到青春期,已经丢失了75%。 (二)成年的卵泡发育 在每一个的月经周期中,都有一定数量的原始卵泡开始发育,并且通常只有一个卵泡排卵,而其他卵泡通过凋亡性细胞死亡而闭锁。在一个女人的一生当中,只有450个卵泡会排卵。在青春期到绝经期直接,大约有250000个卵泡注定要闭锁。 (三)卵泡发生 卵泡的发生和生长依赖于颗粒细胞、膜细胞和基质细胞自分泌和旁分泌的信号因子,这些因子包括BMP-4,Bcl-2,Kit,FGF,NOBOX, NTS/TrKb,XIAP,GDF-9,NAIP,AHP,GATA-4,SCF和TRAIL等(见表二和表三)。在这些因子当中,BMP-4和它的受体BMPR-IB对卵泡生长是至关重要的,因为实验证明它可以促进原始卵泡生长以及原始卵泡到初级卵泡之间的转换。 (四)卵泡闭锁和黄体溶解 与卵泡闭锁的相关因子,既包括促凋亡和抑凋亡的因子,而卵泡闭锁与否,取决于他们直接的平衡。黄体溶解和Bcl-2/Bax以及TNF有关。 五、卵巢发育动力学的分子机制 卵巢的发育由一些分子机制精细的调节着,这些机制中有很多促凋亡和抑凋亡的分子所调解的,例如:(1)卵泡闭锁中的Bcl-2家族,TNF和半胱氨酸蛋白 酶,(2)卵泡选择时期的Bcl-2,Bax,FSH,抑制素,Fas配体,(3)黄体溶解过程中的Fas/Fas配体,半胱氨酸蛋白酶-3,Bax,BMP配体和受体。 (一)Bcl-2家族 Bcl-2家族既包括细胞凋亡的抑制因子(Bcl-2,Mcl-1和Bcl-XL)也包括激活因子(Bax,Bcl-2结合的X蛋白),这个家族因子有助于细胞表面和细胞内部死亡信号结合,凋亡小体的形成以及激活半胱氨酸蛋白酶级联效应。 (1)Bcl-2家族概述 ?Bcl-2 (B-cell lymphoma/leukemia-2) 即B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因。 Bcl-2基因是第一个被发现能延缓细胞的生命周期进入S期的原致癌基因(proto-oncogene),其致癌特点不是通过刺激细胞增殖来体现的,而是通过抑制细胞凋亡的发生。 Bcl-2 基因结构包括3个外显子和两个内含子,与ced-9基因有23%的同源性。 其第1个外显子无翻译功能,第2个内含子很大,达225kb,3’有非翻译区。第2、第3个外显子有编码功能,即使在转位以后其编码功能也不受影响。Bcl-2 编码蛋白由239个氨基酸残基组成,分子量26KD ,其348位氨基酸残基突变率很高,而两侧的氨基酸序列相对保守。Bcl-2在进化过程中有高度保守的倾向,Bcl-2 蛋白功能也相对保守,从原虫到人细胞Bcl-2都有阻断细胞凋亡功能。 Bcl-2生理功能是阻遏细胞凋亡, 延长细胞寿命, 在一些白血病中Bcl-2呈过度表达。Bcl-2的亚细胞定位已经明确, 它在不同的细胞类型可以定位于线粒体、内质网以及核膜上, 并通过阻止线粒体细胞色素C的释放而发挥抗凋亡作用。此外, Bcl-2具有保护细胞的功能, Bcl-2的过度表达可引起细胞核谷胱苷肽(GSH) 的积聚, 导致核内氧化还原平衡的改变, 从而降低了Caspase的活性。 (2)Bcl-2家族与卵巢的凋亡 在胎儿时期和成年的卵巢颗粒细胞都有Bcl-2,Bax和c-Myc表达,暗示着说它们的闭锁作用,Bcl-2主要存在于生长卵泡,Bax主要在闭锁卵泡中。 在卵巢中,促性腺激素高水平存在时,会增强Bcl-2的表达二降低Bax的表达,然而bcl-2和Bax的比率决定原始卵泡的凋亡与否。Bcl-2在卵巢中凋亡的作用有以下几个实验得以证明:Bcl-2缺失的小鼠,卵泡数量会减少(Ratts et al., 1995);过量表达的Bcl-2可以导致卵泡凋亡和闭锁的减少(Hsu et al., 1996;Morita and Tilly, 1999);Bax缺失的小鼠具有正常的含有过量颗粒细胞的卵泡(Perez et al., 1999); 相比于正常的卵泡来说,闭锁卵泡中Bax表达量高(Kugu et al., 1998)。 (二)肿瘤坏死因子家族 与卵巢发育有关的肿瘤坏死因子有TNF-a,Fas/Fas配体,TRAIL,TNF诱骗受体同系物。 TNF和表示为TNFR1和TNFR2的细胞表面受体接个,导致受体聚集和信号蛋白的募集。而TNFR2刺激分化,TNFR1诱导细胞毒素效应。TNDR1通过细胞质区域的死亡区域发挥它的效应,和细胞内的传感器结合,导致聚集和激活半胱氨酸蛋白酶,从而导致细胞死亡。第二条死亡信号途径是叫做TRAF的TNA结合蛋白起始的,TRAF作为一个衔接蛋白召集下游分子,下游分子可以通过使IKB是 火而激活NFkB。 Fas/APO-1是TNF家族定位于细胞表面的I型跨膜蛋白,当Fas配体结合到这个受体上的时候,在体外或者体内的敏感细胞中就发生了细胞凋亡。TRAIL是 TNF家族细胞表面的分子,TRAIL诱导的凋亡依赖于半胱氨酸蛋白酶级联效应,并且可以被半胱氨酸蛋白酶抑制剂所阻碍。某种特定的凋亡抑制剂如FLIP的表达 与否决定了TRAIL介导凋亡的敏感性。 (1)肿瘤坏死因子受体相关因子 肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)是细胞质内衔接蛋白,它在细胞内作为信号中介,对细胞的凋亡和生存起着重要作用。尽管对他们的确切机制还不甚清楚,但他们可以调节大的信号复合体的形成,这些复合体中包括衔接蛋白如TRADD,FADD,NIK和JNK激酶以及半光天冬酶家族。 TNF家族成员的生物学作用依赖于它们的作用机制,例如,TNF家族受体与Fas 配体结合,可以导致半胱天冬酶级联效应并引起细胞凋亡。(Bakker et al., 1999; Raisova et al.,2000)。相比之下,TNF-a依赖于它所激活受体类型既可以作为一个促凋亡的分子,也可以作为一个抑凋亡的分子。它可以通过IkB-NFkB信号路径增强XIAP和FLIP的表达,进而促进颗粒细胞的生长。它的促凋亡作用既可以通过激活半胱天冬酶级联效应或者降低Bcl-2蛋白水平来得以实现。TRAIL是TNF 家族的一个新的成员,将TRAIL配体结合到细胞表面含有死亡区域的受体可以诱导凋亡。并且它所诱导的细胞凋亡仅存在于癌细胞中,而不存在正常细胞中。 (2)TNF家族和卵巢凋亡 在卵巢闭锁中,TNF受体家族:TNF-a ,Fas/FasL和TRAIL都起着重要的作用。他们的作用显示了他们不仅表达与凋亡的正常颗粒细胞和闭锁的窦状卵泡中,而且也表达于配体的性腺当中(Driancourt et al., 1998; Kim et al.,1999)。下面的试验证明了它们的作用。相比于正常的卵泡,闭锁卵泡中的颗粒细胞和膜细胞中FasL表达量较高(Porter, 1997);Fas可以诱导颗粒细胞凋亡(Hakuno et al., 1996);在母鸡颗粒细胞中不同种类的死亡区域表达与TNF蛋白有关(Bridgham and Johnson, 2001);TRAIL和它的受体表达于闭锁卵泡的颗粒细胞中(Wada et al.,2003)。 (三)半胱氨酸天冬酶(Caspase) 半胱氨酸天冬酶是高度保守的半胱氨酸蛋白酶家族调节细胞自杀性凋亡的成员。半胱氨酸天冬酶是卵巢凋亡中主要的影响因子。它们在颗粒细胞中一两种途径被激活,一种是细胞表面受体,一种是Bcl-2家族蛋白的成员。实验证明, Caspase-1,Caspase-3,DNA破裂因子,ICE,CPP32和Apaf-1在人颗粒细胞中都有表达(Flaws et al., 1995; Boone and Tsang, 1998; Van Nassauw et al., 1999; Fenwick and Hurst, 2002)。在卵巢中,Caspase-表达于正常黄体中的黄体细胞和滤泡细胞和闭锁卵泡中的颗粒细胞中,在正常卵泡中的颗粒细胞中没有表达。(四)蛋白酶凋亡激活因子-1(Apaf-1) Apaf-1被假定为ced-4基因的同系物,通过结合细胞色素c和caspase-9而诱导细胞凋亡。在卵巢中,Apaf-1在早期窦状卵泡中含量丰富,然而,体外的促性腺 激素完全抑制Apaf-1的表达和颗粒细胞的凋亡(Deveraux and Reed, 1999)。凋亡抑制剂(IAP)家族通过抑制caspase的活性而发挥功能,XIAP的表达和抑制卵泡的凋亡是FSH调控卵泡生长的重要决定剂。通过NFkB信号路径调节FSH诱导的XIAP的表达可以激活磷脂酰肌醇激酶而不是激活传统的IkB激酶。NFkB是一个可以被TNF家族激活的转录因子,它可以调节几种其他不同的抑制蛋白的表达,如A1,它可以抑制caspase的级联作用(Degli-Esposti et al.,1997a,b; Deveraux and Reed, 1999)。 (五)p53路径 p53是一个应急反应基因,编码53kDaB蛋白,作为一个四聚物存在于G1期的细胞质中,并在S期的起始阶段转移到核中。 (1)p53分子属性 这个蛋白有将近7种不同的功能特征,可以激活20中不同的启动子,抑制26种不同的启动子和增强子,可以和大于35中的细胞和病毒蛋白相互作用。P53有异常相似的基因结构,约20Kb长,都由11个外显子和10个内含子组成,第1个外显子不编码,外显子2、4、5、7、8、分别编码5 个进化上高度保守的结构域,P53基因的表达至少受转录及转录后二种水平的调控.在停泊生长或非转化细胞中P53mRNA水平很低,但刺激胞液后mRNA显著增加.持续生长的细胞,其mRNA 水平不随细胞周期而出现明显变化,但经诱导分化后mRNA水平降低,部分是转录后调控。 (2)p53和卵巢凋亡 在闭锁卵泡中凋亡颗粒细胞中p53蛋白的表达说明了p53的作用,以下实验也证明了它的作用:阻断p53的表达,可以显著减少凋亡的颗粒细胞数量和卵泡的闭锁。p53的过量表达可以诱导cAMP刺激的细胞的凋亡,这种作用的机制是: p53调节bcl-2好bax的转录活性,通过改变p53/bax比率和抑制凋亡相关蛋白来实现p53和cAMP的相互作用。 (六)转化生长因子beta家族 由于TGF-beta在决定卵泡命运的关键作用而被受到广泛关注,TGF家族是控制细胞增殖、分化和与细胞外物质相互作用的多功能因子,它的家族成员包括TGF-beta,激活素,抑制素,BMP和GDF-9以及其他结构相关蛋白,一般地,它们通过Smad来识别目的基因的表达。TGF-beta通过两种主要途径传递信号:受体激活和Sma d激活。在卵巢中,TGF-beta配体、受体和介质(Smad)在卵泡发生的过程中显现在一些特殊的点上,这样就暗示了每个这样的配体在卵泡成熟过程中的不同作用(Bristol and Woodruff, 2004)。 (七)抑制素和活化素 在所有的卵泡阶段都有抑制素-a亚单位蛋白的表达,这种表达增强了在大的窦状卵泡中壁颗粒细胞的密度。除了ActRIB和ActRIIB之外,在原始和初级卵泡的颗粒细胞中都有抑制素-betaA和B的表达。此外,抑制素-betaA和B的亚基在次级到大的窦状卵泡的壁细胞中有表达。 (八)GDF-9 GDF-9的TGF-beta家族分泌的一种分子,在卵母细胞中高表达,它的缺点是阻碍卵泡的形成,缺失GDF-9的卵泡不能够募集到更多的壁颗粒细胞来围绕住卵母细胞,同样地,在小鼠缺失GDF-9的初级卵泡中,上调了kit配体和抑制素-a。这些因子受到GDF-9的旁分泌调节。 (九)BMP家族 BMP家族由BMP-2,-3,-3b,-4,-6,-7,-15和受体BMPR-IA,-IB,II 组成。改变了BMP的表达会影响卵泡发生的募集选择和闭锁、排卵和黄体的形成。就这一点而言,BMPmRNA在卵母细胞、颗粒细胞、膜间质和外膜以及黄体都有表达。 (十)Smad 在所有的卵泡中的颗粒细胞的胞质中都有Smad2和Smad4的表达,在卵泡中,颗粒细胞核、卵母细胞和壁细胞核中都有Smad3的表达,Smad3在调节卵泡生长和Bax/Bcl-2的表达起着重要的作用。Smad3缺失的小鼠会出现生育能力的下降(Tomic et al., 2002; Symonds et al., 2003)。 (十一)凋亡家族的抑制剂 凋亡家族的抑制剂包括存活素和凋亡抑制蛋白因子,包括一些通过抑制半胱氨酸蛋白酶来发挥作用的新的凋亡抑制因子。存活素是一个促生长的分子,它能增进细胞周期的循环,在卵巢中,在卵泡生长过程中存活素的高表达出现在从未分化的和前体系卵泡中有丝分裂活性的颗粒细胞中,在这些细胞中,它作为一个双重的角色而存在,它起着调节细胞周期和一直凋亡的作用。 XIAP是此家族中的细胞内促生长蛋白,在卵巢中XIAP的上调对FSH抑制颗粒细胞凋亡其重要作用,并且有助于FSH诱导的卵泡生长。在卵泡生长的过程中,XIAP在颗粒细胞中的表达受促性腺激素的调控。促性腺激素的处理增加了XIAP蛋白的含量并抑制凋亡的产生。 (十二)干细胞因子和c-kit受体 Kit和Mgf分辨编码KIT受体和配体基因,KIT-KIT配体间相互作用对卵母细胞、原始、初级和窦状卵泡具有促生长作用,在胎儿性腺中,KIT-KIT配体具有对卵母细胞的放冷冻作用。在出生后的卵巢中,这种相互作用可以启动卵泡发生,控制卵母细胞的生长和膜细胞的分化,它能保护腔前卵泡不被凋亡,在窦状卵泡中,它可以调节卵母细胞细胞质的成熟和增强膜雄激素的分泌。 SCF是一个对不同细胞也包括卵巢中的细胞的生长、牵移、分化和生长的具有深远影响的生长因子。SCF减少可以部分地原始生殖细胞的凋亡。 c-kit和SCF表达于:原始和初级的卵原细胞中;高表达与腔前卵泡的卵母细胞中,在颗粒细胞和壁细胞中表达量低;c-kit/SCF表达随着卵泡的生长而逐渐降低;在所有的卵泡生长阶段中都特异表达;卵泡开始生长之后表达量降低。然而,在培养液中加入SCF,可以下调BAX的表达,从而显著减少卵母细胞的凋亡。 (十三)抑制素 抑制素是一个受进化保护的调节细胞生存和死亡的蛋白。它定位于线粒体膜上,它的表达与线粒体的不稳定性有关,并且它在卵母细胞,颗粒细胞,黄体以及闭锁的卵泡中都有表达。抑制素水平的升高与细胞凋亡的起始有关。在闭锁卵泡中,抑制素从胞质中转移到核中,而这样的举动与闭锁有关。 (十四)整合蛋白 整合蛋白是一种跨膜分子,它连接细胞和细胞骨架,影响细胞的生存和死亡,它除了粘附性以外,还参与信号传导。它表达于原始卵泡的表面,与细胞外基质和体细胞以及临近的细胞有粘合特性。因此在三级卵泡中颗粒细胞的凋亡与卵巢卵泡中整合蛋白的表达有关。缺失整合蛋白的三级卵泡中颗粒细胞会出现凋亡。(十五)内皮素 内皮素是对颗粒细胞和黄体细胞起作用的一类血管活性肠肽。它们包括有 ET-1、ET-2和ET-3三种异构肽,在血管收缩,有丝分裂发生和类固醇类激素的生成有着不同的作用。在黄体溶解的过程中,ET-1水平上升,并作为诱导剂诱导细胞凋亡。ET也可以影响黄体细胞前列腺素的合成和分泌。 (十六)胰岛素样生长因子和它的受体 胰岛素样生长因子和它的受体在健康得到窦状卵泡的颗粒细胞中有表达,在小鼠中,IGF-I对于完整卵泡的生长发育是必须的,而在闭锁卵泡它的转录水平很低,并且在黄体中不存在,对于颗粒细胞增殖的刺激与维持,IGF-I起着十分重要的作用。 (十七)新生卵巢同源编码基因(Nobox) Nobox是在卵泡发生过程中表达的卵巢特异性同源基因,这个基因长14kb,由8个外显子编码的,Nobox优先地高水平表达于原始和生长的卵母细胞中。缺失Nobox的卵巢,加速了出生后卵母细胞的丢失,并且不能使原始卵泡转变为生长卵泡得以持续。缺失Nobox会使卵泡被纤维组织代替并且下调GDF-9的水平。 (十八)神经凋亡抑制蛋白(NAIP) NAIP是在卵巢卵泡发生过程中可以阻止颗粒细胞死亡的蛋白,由促性腺激素诱导产生,在大鼠卵巢中,从原始阶段的卵泡一直到格拉夫式卵泡的颗粒细胞中都有NAIP的表达,而在闭锁卵泡中则没有,用反义寡聚核苷酸抑制NAIP的表达可以引起形态正常的排卵的卵母细胞数量的减少,意味着NAIP在通过增强颗粒细胞生长,进而间接地促进生殖细胞的生长发育。 (十九)GATA-4 GATA-4是一个调节细胞增殖的一个锌指转录因子,在胚胎发育过程中, GATA-4mRNA和蛋白定位于颗粒细胞,在年龄最小的卵巢中表达量最高,随着年龄增长而逐渐降低,在成年大鼠中下调GATA-4的表达,会引起卵泡的闭锁。因此,GATA-4作为一个促生长因子而存在与卵巢中。 (二十)干扰素 干扰素是具有抗病毒和抗恶性细胞瘤增殖功能的细胞因子,包括IFN-a, IFN-beta,IFN-deata。他们通过使细胞对凋亡因子和几种主要凋亡途径中的蛋白敏感而发挥作用。在卵巢中,Fas可以阻止在黄体细胞中诱导的凋亡;IFN-deata 的下调可以产生Fas,进而使这些细胞凋亡;IFN-deata预处理的颗粒细胞和无透明带的卵母细胞共培养可以诱导颗粒细胞的凋亡。 总之,细胞凋亡在卵巢生长的许多方面都是主要的,并且主要通过以下几条分子途径进行的:Bcl-2家族,TNF,半胱氨酸蛋白酶等。这些途径当中的分子可以被分为四类:(1)卵泡生长的因子:Bcl-2,TGF-beta,c-Kit,NOBOX, NTS,存活素,XIAP,AHR,BMP,GATA-4,SCF和GnRH,(2)卵泡闭锁相关因子:Fas,半胱氨酸蛋白酶,TNF,TVB,Par-4,p53,抑制素,c-Myc,干扰素和ET,(3)卵泡选择和丢失的相关因子:Bcl-2,Bax,FSH,抑制素, Fas配体和半胱氨酸蛋白酶,(4)黄体生成的相关因子:Fas/Fas配体,半胱氨酸蛋白酶-3。Bax,抑制素,BMP配体和受体,PGF2。 参考文献: [1] Zhao Zq. 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