常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/LHCI，再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 50505050 50505050 甘氨酸分子量=，mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（mol/L）X毫升mol/L邻苯二甲酸氢钾+mol/LHCl，再加水稀释到20毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 55555 5555 邻苯二甲酸氢钾分子量=，mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH LNa2HPO4（毫升） L柠檬酸（毫升） pH LNa2HPO4（毫升） L柠檬酸（毫升） Na2HPO4分子量=，mol/L溶液为28.40克/升。Na2HPO4·2H2O分子量=，mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量=，mol/L溶液为21.01克/升。4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度（mol/L） 柠檬酸（克）C6H8O7·H2O 氢氧化钠(克)NaOH97% 盐酸（毫升）HCl（浓） 最终体积（升）① 210210210210245285266 84838383144186156 1601161064568105126 10101010101010①????使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%?氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（mol/L） pH ??mol/L柠檬酸（毫升） ??mol/L柠檬酸钠（毫升） pH ??mol/L柠檬酸（毫升） ??mol/L柠檬酸钠（毫升） 柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量，mol/L溶液为21.01克/升。柠檬酸钠Na3C6H5O7·2H2O：分子量，mol/L溶液为29.41克/毫升。6．乙酸–乙酸钠缓冲液（mol/L） pH(18℃) ??mol/LNaAc(毫升) ??mol/LHAc(毫升) pH(18℃) ??mol/LNaAc(毫升) ??mol/LHAc(毫升) Na2Ac·3H2O分子量=，mol/L溶液为27.22克/升。7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（） pH ??mol/LNa2HPO4(毫升) ?mol/LNaH2PO4(毫升) pH ??mol/LNa2HPO4(毫升) ??mol/LNaH2PO4(毫升) Na2HPO4·2H2O分子量=，mol/L溶液为85.61克/升。Na2HPO4·12H2O分子量=，mol/L溶液为克/升。NaH2PO4·2H2O分子量=，mol/L溶液为克/升。磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaH2PO4：pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH范围宽；③pH受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于。其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15mol/L） pH mol/L/15Na2HPO4(毫升) mol/L 15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M 20℃ 20℃ 18℃ 0.04M 0.04M 0.04M8.25克0.05M25℃0.1M 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼酸（毫升） pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼酸（毫升） 硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。硼酸H3BO3,分子量=,溶液为12.37克/升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 5050505050 5050505050 甘氨酸分子量=;0.2M溶液含15.01克/升。13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）X毫升0.05M硼砂+Y毫升加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 505050 505050 硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;0.05M溶液为19.07克/升。14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH (毫升) (毫升) 20℃ 37℃ 123456789 987654321Na2CO2·10H2O分子量=;0.1M溶液为28.62克/升。N2HCO3分子量=;0.1M溶液为8.40克/升。15．“PBS”缓冲液 pH H2ONaClNa2HPO4NaH2PO4 1000 1000 1000 100ml8.5g2.2g0.4gpH标准缓冲溶液StandardpHBufferSolutions 名称(Name) 配?制(Compoundingway) 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃ 草酸盐标准缓冲溶液 c[KH3(C2O4)2·2H2O]为L。称取12.71g四草酸钾[KH3(C2O4)2·2H2O]溶于无二氧化碳的水中，稀释至1000ml 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 45℃ 50℃ 55℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 95℃ - - 酒石酸盐标准缓冲溶液 在25℃时，用无二氧化碳的水溶解外消旋的酒石酸氢钾(KHC4H4O6)，并剧烈振摇至成饱和溶液 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃ - - - - - 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 45℃ 50℃ 55℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 95℃ - - 苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液 c(C6H4CO2HCO2K)为L，称取于±℃干燥2～3h的邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）10.21g，溶于无CO2的蒸馏水，并稀释至1000ml（注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃ 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 45℃ 50℃ 55℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 95℃ - - 磷酸盐标准缓冲溶液 分别称取在±℃干燥2～3h的磷酸氢二钠（Na2HPO4）(3．53±0．01)g和磷酸二氢钾（KH2PO4）(3．39±0．01)g，溶于预先煮沸过15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml（注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃ 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 45℃ 50℃ 55℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 95℃ - - 硼酸盐标准缓冲溶液 c(Na2B4O7·10H2O)称取硼砂（Na2B4O7·10H2O）(3．80±0．01)g（注意：不能烘！），溶于预先煮沸过15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。存放时要防止空气中的CO2的进入（注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃ 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 45℃ 50℃ 55℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 95℃ - - 氢氧化钙标准缓冲溶液 在25℃，用无二氧化碳的蒸馏水制备氢氧化钙的饱和溶液。氢氧化钙溶液的浓度c[1/2Ca(OH)2]应在（～）mol/L。氢氧化钙溶液的浓度可以酚红为指示剂，用盐酸标准溶液[c(HCl)=L]滴定测出。存放时要防止空气中的二氧化碳的进入。出现混浊应弃去重新配制 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃ 不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures) 45℃ 50℃ 55℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 95℃ - - - - - -注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。常用pH缓冲溶液的配制和pH值PreparationandpHValuesofCommonpHBufferSolutions 序号(No.) 溶液名称(Solutionname) 配制方法(Preparation) pH值(pHvalue) 1 氯化钾-盐酸 mlmol/LHCl与mlmol/L?KCl混合均匀后，加水稀释至100ml 2 氨基乙酸-盐酸 在500ml水中溶解氨基乙酸150g，加480ml浓盐酸，再加水稀释至1L 3 一氯乙酸-氢氧化钠 在200ml水中溶解2g一氯乙酸后，加40g?NaOH，溶解完全后再加水稀释至1L 4 邻苯二甲酸氢钾-盐酸 把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LHCl混合均匀，加水稀释至100ml 5 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠 把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与?mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml 6 六亚甲基四胺-盐酸 在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g，加浓HCl10ml，再加水稀释至1L 7 磷酸二氢钾-氢氧化钠 把mlmol/L的磷酸二氢钾与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml 8 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml 9 氯化铵-氨水 把mol/L氯化铵与mol/L氨水以2：1比例混合均匀 10 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把mlmol/L的硼酸-氯化钾与ml?mol/L?NaOH混合均匀，加水稀释至100ml 11 氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠 把mlmol/L氨基乙酸-氯化钠与mlmol/LNaOH混合均匀 12 磷酸氢二钠-氢氧化钠 把ml?mol/LNa2HPO4与ml?mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml 13 氯化钾-氢氧化钠 把mlmol/LKCl与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml