DNA拷贝数的计算方法
分步推理如何计算核酸拷贝数
1A260吸光度值=dsDNA 50ug/ml=ssDNA 33ug/ml=ssRNA 40ug/ml
核酸浓度=(OD260)×稀释倍数×(33 或40 或50)=ng/ul
MW 代表克/摩尔,单位dolton:1dolton 即表示1g/mol
1 摩尔=6.02×1023摩尔分子(拷贝数)
平均分子量(MW):dsDNA=碱基数×660 道尔顿/碱基
ssDNA=碱基数×330 道尔顿/碱基
ssRNA=碱基数×340 道尔顿/碱基
得到拷贝数
计算公式
六西格玛计算公式下载结构力学静力计算公式下载重复性计算公式下载六西格玛计算公式下载年假计算公式
:6.02×1023拷贝数/摩尔×(浓度)/(MW g/mol)= copies/ml.
即(6.02×1023)×(g/ml)/(DNA length×660)=copies/ml.
或(6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×660)=copies/ul.
例:3000 碱基质粒,浓度100 ng/ul
MW=3000bp×660dalton/bp=1.98×106daltons,即1mol=1.98×106g(100ng×10-9)g/1.98×106=摩尔数
copy 数=摩尔数×6.02×1023=3×1010copies/ul.
1. dsDNA : (6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×660)=copies/ul= (9.12×1011)×(ng/ul)/(DNA length)
2. ssDNA: (6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×330)=copies/ul= (1.82×1012)×(ng/ul)/(DNA length)
3. ssRNA: (6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×340)=copies/ul= (1.77×1012)×(ng/ul)/(DNA length)