病害学、水生生物学、水与生态学、鱼类增养殖学、名特优水产养殖实习报告

病害学、水生生物学、水与生态学、鱼类增养殖学、名特优水产养殖实习报告 西北农林科技大学动物科技学院水产09级 水产动物病害学实习报告 第六组 吃火锅 2012/6/20 Wednesday 2 鱼病调查与临床诊断 2.1 鱼病调查 2.1.1目的 2.1.1.1鱼病防治技术 2.1.1.2指导渔业生产 ?了解不同养殖种类发病病因 ; ?掌握发病规律与养殖的关系; ?学会正确诊断的基本方法 ; ?掌握用药技术与病害控制技术。 2.1.1.3规划水产发展 2.1.2 常规(定点)流行病学调查 选择养殖常规区域做好定点定期调查工作，根据疾病流行情况，在疾病高发季节(一般为4-11月份，但因地而异)，每个采样点每个月至少采样一次(考虑到时间差异的影响，定为每月10号左右)，每个月至少采样两次(两次间隔时间为15天左右)。采样规模依据渔场规模大小而异。 ?养殖面积10亩以下，投放鱼数一万尾以下，采样数量不低于塘内鱼总数0.05%; ?养殖面积100亩以下，投放鱼数10万尾以下，采样数量不低于0.01%; 3 ?养殖面积100亩以上，投放鱼数10万尾以上，采样数量不少于15尾。 采样同时仔细填写流行病学调查 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 。 2.1.3 工作程序 ?现场调查人员按采样 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 进行常规调查，或接到紧急疫情通知后， 应立即核实情况，进行初步调查。 ?现场调查人员自备采样工具，进行全鱼或部分组织采样，样品进行正确处理，尽快送检。 ?按要求填写流行病学调查表，结合实验室检测结果，分析疫病来源，判断疫情发展趋势，并提出控制措施建议。 ?实验室检测结果呈阳性的养殖场，如果必要，在疫区附近展开追溯和追踪调查。 ?对发生疫情的养殖场，应开展追踪调查，追踪疫点传染源的扩散趋势，了解疫情的发展情况和控制措施的效果。必要时开展分子流行病学调查，追踪病原变异情况。 ?流行病学调查中检测到的阳性样本(尤其是病原分离株)和试验记录均需进行妥善保存。有些需进行进一步研究。 2.1.3.1病料的采集与送检 水生动物病料的采集是疫病调查和检验的前提。采集部位、时机、样品的处理和保存、运送等，都直接关系到检验结果的准确性及可靠性，对水生动物疫病的诊断、流行病学调查和免疫监测等影响极大。一般来说，病料的采集和送检包括以下几个常规步骤: 4 2.1.3.2 采集前准备 采集用的刀、剪、镊子等用具高压灭菌或180?烘8小时以上(只针对RNA病毒而言)，使用前用酒精擦拭、火焰消毒。装载样品的器皿需经高压灭菌或180?烘烤(也可采用无RNase的商品化器皿)，采集血清等液体样品使用一次性针头和注射器。理论上采取一种病料，使用一套器械与容器，采样地点较多的情况下，做好采样计划，准备采集前用具等的消毒。 2.1.3.3病料的采集和保存 ?病料采集的首要原则，样品要足够新鲜，最好是选用濒死的水生动物。死亡数小时后分离病毒或细菌的意义都不大; ?病料采集的部位应视疫病情况而定。理论上，采集有明显病变的组织，不显示肉眼可见病变的组织器官，可多点采样或者整条采集(适用于体型小的个体); ?采集的病料应一种病料一个容器，立即密封。2小时内能进行检测和病原分离的可在4? 冰箱中保存，超过2小时的应在-20?冰箱中冻结保存(-80?中保存可延长病原存活时间); ?组织学检测的样品立即浸泡在10,中性甲醛缓冲固定液或95,酒精内固定，固定液体积应是组织块体积的10倍以上，固定24小时后，更换一次固定液，在室温下保存; ?装病料的容器应贴上标签，标签应防止因冻结而脱落，标签标明采样时间、地点; ?对于没有实验条件的采样点，样品必须尽快寄送。在短时间内(夏 5 季不超过12小时)能送到检验单位时，可将装有病料的容器，放入盛有冰块的保温瓶/箱内送检。在短时间内不能送检的(不宜超过24小时)，供细菌学检查的材料，放入灭菌的30,甘油生理盐水中保存; ?供病毒学检查的材料，放入灭菌的50,甘油生理盐水中保存(可加入青链霉素，防止细菌生长); ?供病理组织学检查的材料，放入10,甲醛或95,酒精中保存。 2.1.3.4病料的送检 将盛病料的容器密封后贴上标签，注明内容物或代号，装入塑料袋内，再放人加有冰块的冷藏箱(瓶)中，迅速送检;有条件的话，采用干冰泡沫箱保存效果更佳，尤其适用于较长时间的运输(可以将采集的样品直接放到干冰中或低温冰箱中急冻，并以冷冻状态送出)。在送检病料的同时，应附剖检记录或 说明书 房屋状态说明书下载罗氏说明书下载焊机说明书下载罗氏说明书下载GGD说明书下载 一份，注明病史、病症、剖检情况、病料的部位、名称和编号及送检人的姓名、单位、送检日期等，供参考。 2.1.3.5水质的检测 水质是影响养殖好坏的关键因素，水质的恶化会直接导致条件菌的暴发。供水质检测的水样最好在投饵区附近或塘中央位置采集，并且离塘底不超过0.5米范围为宜。采集的水样最好当场检测。由于塘水在一天之内都有不同程度的变化，因此本项目中水样采集时间最好在上午7点至10点之间。 2.1.3.6养殖环境中细菌的检测 6 采集的水样除了当场检测水质指标外，用于细菌数量检测的水样放冰箱中4?保存，用保温瓶或泡沫箱低温寄出。 将水样倍比稀释后涂布培养基或选择性培养基，计算细菌落数量(cfu/mL)，再使用PCR方法检测病原菌个数，折算出水样中病原菌的含量(cfu/mL)。 2.2疾病临床诊断与处置 2. 2.1健康鱼类表征 ?各器官如眼睛、口、鳃盖、鳍条等外观的颜色均正常。打开鳃盖观察，鳃丝为鲜红色、结构清楚、形态完好、粘液适中。 ?解剖各脏器观察病理现象。健康状态下: 肝胰脏:灰黄色、弥散在盘曲的肠道之间。 肠道:粗细均匀富有弹性、含食物，肠壁薄厚适中，无充血现象。 脾脏:褐紫色，紧贴肝胰脏和肠道之间。 肾脏:位于背部紧贴脊柱，从前到后呈带状结构，淡紫色并有鲜红色的血管分布。 性腺:病变不明显。 鳔:病变不明显。 2. 2.2发病鱼类表征 检查的病样要活体或濒死，寄生在体表或体内的病原体，往往由于寄主的死亡，也会很快地随之死去，一经死去的病原体，身体形状就会改变，或完全崩解腐烂。如有许多症状在活体或刚死的鱼体上是很明显的，但死亡已久的鱼体内外各种器官、组织腐烂变质，原来所 7 表现的症状已无法辨别。因此，用来作为检查的鱼，要求是活体或刚死的。如果是死鱼，只要揭开鳃盖观察，发现鳃瓣还鲜红，表明鱼死亡不久，还可以用来检查。 ?临床行为症状 独游不成群;浮头;顶水;不摄食等。 ?病理现象症状 体表、鳃盖、鳍基部出血;腹水;花斑肝或鳃等。 2. 2.3 临床诊断方法 2. 2.3.1注意事项 ?所有用具在对某一条鱼，甚至同一条鱼的不同器官接触过的，都要洗干净后才可用在另一条鱼或另一器官上，避免病原体从一条鱼带到另一条鱼，或从一种器官带到另一种器官，避免诊断时产生病原体寄生部位的互相污染混淆。 ?解剖获得的器官应保持其完整性，分开放置，并保持其湿润，同时还要注意防止各器官间病原体的相互污染。 ?检查时，应按照一定的程序进行，并按要求写明标签，否则会发生混乱或遗留。不能肯定的病变标本或病原体，应留下标本，以备日后进一步研究。 2.2.3.2检查方法 ?为了进一步了解水产动物疾病的发病原因和确定病原体的种类，必须对其进行解剖和检查病原体; ?水产动物病原体的种类不同，大小相差很大。例如寄生虫性病原体， 8 有些种类用肉眼可辨别，最小的寄生虫，一般的光学显微镜都可辨出来; ?病毒性病原体和细菌性病原体，特别是病毒性病原体，不仅肉眼不能看到，就是普通光学显微镜也不能辨别它们。对病毒性病原体和细菌性病原体的检查，除用肉眼和光学显微镜检查它们所表现的一些可能是这些病原体引起的症状外，还必须通过病毒学方法和细菌学方法才能检查和确定其病原体。 2.2.3.2.1肉眼检查法(目检法) 水产动物生了病，除由于病原体对水产动物在生理上引起的反应而表现出种种异常的活动，即所谓病象外，寄生在水产动物体表和体内的病原体，引起寄主患病部位产生一定的病变，我们通常称这种病象和病变为症状。 ?有许多症状是可以凭目检而加以判断和鉴别的，如水霉及一些大型的寄生原生动物、蠕虫、甲壳动物、水蛭等; ?绝大部分的病原体，特别是病毒病原体和细菌病原体，肉眼是看不到的，但可以根据病鱼的外表反映出来的症状来判断和辨别。例如，一般病毒性和细菌性鱼病，常会表现充血、发炎、脓肿、腐烂、鳍基充血、蛀鳍和竖鳞等症状; ?寄生虫性鱼病，常会表现出黏液过多，出血，有的还有点状或块状的胞囊等。 2.2.3.2.2光学显微镜检查法(镜检法) 镜检法包括用光学显微镜、解剖镜、放大镜等检查法，是比目 9 检更深入一步的工作。无论有明显的症状或没有症状表现，都要通过镜检。 对病毒性病原体和细菌性病原体的检查，经过目检的病鱼，拟进行病毒或细菌分离培养之前，也需要通过镜检，仔细检查病鱼有无大量寄生虫和特异的症状。 检查那些比较大的寄生虫性病原体，用放大倍数低的显微镜或解剖镜即可。在野外调查中，最好同时配备双筒解剖镜。检查时，除一些已经从器官或组织上分离出较大的寄生虫可直接放在小玻璃皿或玻片上观察外，一般要把寄主的器官组织或内含物压成薄层才能观察，就是通常说的制片。 ?玻片压展法 玻片压展法适用于检查鱼类体外和体内的所有器官、组织或内含物中的鱼病病原体。但对于检查鳃上的病原体却不大适宜，因为鳃组织经过压展，反而不容易找到和取出里面的病原体。 ?载玻片压展法 用盖玻片盖上放在载玻片上的器官、组织或内含物，然后轻轻压平成一薄片的方法。这种方法适用于低倍或高倍显微镜检查。方法是用小剪刀或镊子取出一小块组织或小滴内含物，放在一片干净的载玻片上，滴入一小滴清水或盐水(滴入的水量以盖上盖玻片后水不溢出盖玻片的周围为度)，盖上盖玻片，轻轻地压平后，先在低倍显微镜下检查，如发现有病原体或可疑现象，再用高倍显微镜仔细观察。对于病变部位或病变器官，最好能检查病变部位或器官的几个不同 10 点，一般至少从三个不同点取材检查。 ?检查步骤 检查程序取得病鱼或无症状的鱼应按如下程序进行检查: A.病鱼标本的编号 B.记录时间和地点 C.鉴定病鱼标本的种名 D.称重量 E.测量大小 F.记录鱼的年龄 G.记录鱼的性别 H.外部形态结构观察与镜检 I.检查鱼的各个器官 2.2.3.2.3注意事项 在解剖病鱼的过程中，要注意如下几点: ?为了避免鱼病病原体从一个器官的破口带到另一个器官上，当把各个器官逐个取出时，在操作上要特别小心，不要把器官的外壁弄破，尤其是肠管、胆囊、膀胱等器官，如果把它们的外壁稍微弄破，里面的液体含物，就会大量流出来，污染其他所有的器官，里面的病原体，随着流出的液体含物到处污染，就无法查明病原体原来寄生的部位，从而影响对鱼病诊断的正确性; ?对某一条鱼，甚至同一条鱼的不同器官接触过的用具，要洗干净后才可用在另一条鱼或另一器官上，这是为了避免把病原体从一条鱼 11 带到另一条鱼，或从一种器官带到另一种器官，避免诊断时产生病原体寄生部位的混乱。这一点必须要求严格做到; ?在检查过程中，对每一个器官，都要首先用肉跟仔细观察它的外部，如发现有病原体，可用镊子或解剖针把它挑出，放到预先准备好的器皿里，并记明从哪个器官取下的。如发现可能因病原体引起的症状(如白点、溃烂等)，而用肉眼又无法判定时，可用镜检;如仍无法决定，则把这部分组织剪下保存起来，以便进一步作病理检查，如果器官不大，可把整个器官保存。检查每一条病鱼的各个器官，通常按照如下的顺序进行:体表黏液;鳍条;鼻腔;血藏;鳃部;口腔;体腔;脂肪组织;消化管(包括胃肠和盲囊);肝脏;脾脏;胆囊;心脏;鳔;肾脏;膀胱性腺眼;脑;脊髓;肌肉。 流水镇瀛湖风景区参观 乔老板 共40口网箱，规格6m*12m 养殖种类有草鱼 黄颡鱼 斑点叉尾鮰 鳜鱼 放养夏花鱼种 消毒剂:采用挂袋法 二氧化氯 溴制剂 苯制剂 氯制剂 戊二醛 成鱼采样方法:只剪去鳃的一小部分，可以不盖盖玻片，直接观察 网箱里的鱼多受到机械损伤(运输擦伤)，体表粘液增多，成为细菌 12 的培养基，且易感染水霉(孔雀石绿) 浮于水面的一般是有问题的鱼，可以根据比例计算患病比例 采用挂袋消毒(二氧化氯效果最好) 免疫抑制剂有地塞米松(激素类) 养殖种类有 黄颡鱼 框鳞镜鲤 蒙古红鲌 匙吻鲟 斑点叉尾鮰 餐条 丁桂 花鲢 金诺水产 55口网箱 6*6 采用双层网(防逃) 根据放养规格确定网孔大小 水源为丹江口水库 养殖种类有鲈鱼 鳜鱼 框鳞镜鲤 斑点叉尾鮰 养殖面积 3400m2 水深3m 产量6000-8000斤/口 一口网箱成本4000-5000元 可用10年 网衣8年可用 根据鱼的投饵量和摄食情况判断养殖鱼类健康状况 一周期产量可达30万斤/3亩 富兴 养殖种类 匙吻鲟 黄颡鱼 青波鱼 框鳞镜鲤 丁桂 杂交鲟 13 实习感受和体会 在安康水产示范站实习的47天是我大学以来难忘而又重要的几天。短短不到两个月我深刻地认识到“ 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 到用时方恨少”、“时间是检验真理的唯一 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 ”这两句话的深刻含义。在这里，理论知识永远是不够的，并且有很多理论上的空白教科书上并没有写;理论知识在事实面前显得有些空洞，有时候碰上的一些突发情况不能简单用已有知识解释。碰上鱼苗离奇大量死亡了，我们无法简单以缺氧或感染鱼病做结论，而是在提出问题的可能起因后以试验为依托，检验假设的真实性，然后再得出自己的判断。鱼类表现出来的症状可能只有1种或几种，但其病因却往往是多项的。无论是以后搞生产还是从事科研工作，我们在问题面前应实事求是，认真对待，坚持理论与实际相结合～