【doc】噻诺啡灌胃对小鼠吗啡行为敏化的影响

【doc】噻诺啡灌胃对小鼠吗啡行为敏化的影响 噻诺啡灌胃对小鼠吗啡行为敏化的影响 药学ActaPharmaceuticaSinica2004,39(12):961—965?961? 噻诺啡灌胃对小鼠吗啡行为敏化的影响 赵文丽,梁建辉,宫泽辉 (1.北京大学中国药物依赖性研究所,北京100083;2.北京毒物药物研究所,北京 100850) 摘要:目的研究ig噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化的影响.方法测定小鼠的自主活动, 观察ig噻诺啡对小鼠 自主活动及急性给予吗啡所诱导小鼠活动增强效应的影响;建立小鼠吗啡行为敏 化模型,观察ig噻诺啡对行为敏化 形成,转化及 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达的影响.结果单次ig噻诺啡(1.25—5.0mg?kg)可剂量依赖性地降 低小鼠的自主活动 (P<0.O1),但多次给药可产生耐受.噻诺啡可有效地抑制急性给予吗啡所诱导的 小鼠高活动件(P<0.05)及小鼠 吗啡行为敏化的形成,转化和表达(P<0.05或P<0.O1).结论噻诺啡可抑制小鼠 中枢神经系统,对阿片类药物的 滥用和成瘾可能具有干预作用. 关键词:噻诺啡;吗啡;行为敏化;自主活动 中图分类号:R971;R964文献标识码:A文章编号:0513—4870(2004)12—0961一O5 Effectsofintragastricadministrationofthenorphineon morphine-inducedbehavioralsensitizationinmice ZHAOWen—li,LIANGJian—huih, GONGZe—hui (J.NationalInstituteOnDrugDependence,PekingUniversity,Beijing100083,China; 2.BengInstituteofPharmacologyandToxicology,Beijing100850,China) Abstract:AimToinvestigatetheeffectsofintragastricadministrationofthenorphine(Then) on behavioralsensitizationtomorphine(Mor)inmice.MethodsLocomotoractivitywasdetectedafter intragastricadministrationofthenorphineorCO— administrationofthenorphinewithMorinmice.Micewere inducedtobebehaviorallysensitivetoMor,andweregiventhecombinationofMorandthenorphineto observetheeffectsofthenorphineonthedevelopment,transferandexpressionofMor— inducedbehavioral sensitization.ResultsAsingleintragastricadministrationofthenorphine(1.25— 5.0mg'kg)dose— dependentlyinhibitedthelocomotoractivityinmice(P<0.01)andtheeffectsofthenorphineon locomotoractivitydevelopedtoleranceafterrepeatedadministration.Co— administrationofthenorphine effectivelyinhibitedMor— inducedhyperactivity(P<0.05)andthedevelopment,transfer,expressionof Mor— inducedbehavioralsensitizationinmice(P<0.05orP<0.01).ConclusionThenorphinewas showntosuppressthecentralnervoussystemandmaybeeffectiveagainsttheabuseandaddictionto opioids. Keywords:thenorphine;morphine;behavioralsensitization;locomotoractivity 反复给予动物阿片类药物,可形成行为敏化 (behavioralsensitization),又称反向耐受(reverse tolerance),表现为随着用药次数的增加,自主活动 和刻板行为的进行性增强.行为敏化是动物药 收稿日期:2004-01-12. 基金项目:国家重大基础研究 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 (2003CB515400). '通讯作者Tel:86—10—82802452,Fax:86—1O一62032624 E-mail:liangih@hotmail.com 物成瘾的主要行为特征之一,根据其建立过程,可分 为:形成期(initiation/development),转化期 (transfer)和表达期(expression).行为敏化建立 过程的各个时期是由不同机制调节的.因此, 研究药物对行为敏化各个时期的干预作用将有助于 探讨药物成瘾的机制和寻找有效的干预手段. 噻诺啡(thenorphine)是一种新型阿片受体部 分激动剂,其化学结构与丁丙诺啡(buprenorphine, 药学ActaPharmaceuticaSinica2004,39(12):961—965 一 种阿片受体部分激动剂)相似(图1).丁丙诺 啡现已广泛地应用于阿片类药物成瘾的治疗. 因此,本文旨在研究噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化的 影响,进一步探讨噻诺啡对阿片类药物的滥用和成 瘾是否具有干预作用. AB CH3)3 Figure1Chemicalstructuresofthenorphine(Then, A)andbuprenorphine(B) 材料和方法 动物昆明种小鼠,5各半,体重l8—22g, 由北京大学医学部动物中心提供.将小鼠随机分 组,每组lO只. 药品盐酸噻诺啡(thenorphinehydrochloride, Then),由北京毒物药物研究所宫泽辉教授提供,溶 于5%Tween8O,ig;盐酸吗啡(morphine hydrochloride,Mor),购自青海制药厂,用生理盐水溶 解,ip.两种药物均在给药前配制,给药剂量均为lO mL?kg,,对照组给予相应的溶剂(vehicle,Veh). 仪器小动物自主活动检测仪(JZZ98一CM),中 国医学科学院制造. 噻诺啡单次给药对小鼠自主活动的影响小鼠 igVeh或Then(1.25,2.5和5.0mg?kg),立即放 人小动物自主活动检测仪中浈0定小鼠的自主活动. 10min记录1次,总计测定160min. 噻诺啡多次给药对小鼠自主活动的影响小鼠 随机分为4组,分别igVeh或Then(1.25,2.5和 5.0mg?kg..),每日1次,连续7d.然后停药7d (无任何处理).d15,每组小鼠给予相应剂量的药 物进行激发实验,观察噻诺啡自身是否产生行为敏 化.d1,d7和d15,在给药20min后立即测定4O min内小鼠的自主活动. 噻诺啡对急性给予吗啡所致小鼠活动增强效应 的影响小鼠随机分为5组,分别igVeh或Then (剂量同上),30min后ipVeh或Mor10mg?kg,, 20min后测定40min内小鼠的自主活动. 噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化形成的影响小鼠 随机分为5组,连续7digVeh或Then(剂量同上), 30min后ipVeh或Mor(20mg?kg).然后停药 7d(无任何处理).d15,所有小鼠ipMor(10 mg?kg)激发,20min后测定40min内小鼠的自 主活动. 噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化转化的影响小鼠 随机分为5组,分别ipVeh或Mor(20mg'kg), 每日1次,连续7d.d8一d14,停用Mor并分别ig Veh或Then(剂量同上),每日1次,连续7d.d15, 所有小鼠ipMor(10mg?kg),20rain后测定4O min内小鼠的自主活动. 噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化表达的影响小鼠 随机分为5组,分别ipVeh或Mor(20mg?kg), 每日1次,连续7d.然后,停药7d(无任何处理). d15,分别igVeh或Then(剂量同上),30min后所 有小鼠ipMor(10mg?kg),20min后测定40min 内小鼠的自主活动. 统计学处理实验结果用互?S表示,用SPSS 10.0软件包进行统计 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 .采用双因素方差分析 (Two—wayAnova)或单因素方差分析(One—way Anova),随后采用LSD检验进行两两组间比较. 结果 1噻诺啡单次给药对小鼠自主活动的影响 图2结果显示,给小鼠ig不同剂量的Then后, 立即测定其活动性,小鼠的自主活动计数与Veh组 相比明显降低,呈剂量依赖性(P<0.01).给药后 50min达到最大效应.给药150rain后,各Then组 小鼠的自主活动计数与Veh组相比差异已无显着 l生 020406080l00l20l40l60l80 t|rain .一.Vehicle(Veh);?一?Thenorphine1.25mg?kg;?一? Thenorphine2.5mg?kg一.:?一?Thenorphine5. 0mg?kg' Figure2Thelocomotoractivityinmiceafter thenorphinewasonceinjectedjg.忍=10,Yc?. P<0.05.P<0.O1.P<0.001Vehgroup byLSDtest mmm??m0铷眦踟 赵文等:噻诺啡灌胃x,』小鼠吗啡行为敏化的影响?963? 2噻诺啡多次给药对小鼠自主活动的影响 噻诺啡给药d1,可引起小鼠自主活动的显着性 降低(P<0.01),这与图2的结果一致.连续给药7 d,各Then组小鼠的自主活动计数与Veh组比较差 异无显着性(P>0.05).停药7d,d15给予相应药 物激发后,各组小鼠之间的自主活动计数仍无显着 差别(P>0.05).见图3. Table1Effectsofthenorphineonthe hyperactivityinducedbyacuteadministration ofmorphine(Mor)inmice Dose/mg?kg一Totallocomotor ThenorphineMoractivity/count FivegroupsofmiceweregivenVehorthenorphine(1.25, 2.5and5.0mg?kg)byig,30minlater,themicewere injectedipVehorMor10mg?kgandwereputintothe test(:agesfor20min.Then,thelocomotorcountswere recordedfor40min.n=10.贾4-s.P<0.05vsVeh+Veh group;P<0.05,P<0.()lvsVeh+Mor(10mg?kg) groupbyLSDtest Table2Effectsofthenorphineonthe 口Veh;园 Then.rphine1.25g.kg,;Then.rphine2.5developmentofmorphinesensitizationinmice mg?kg'.;?rhenorphine5.0mg?kg Figure3EffectsotrepeatedadministrationoI thenorphineonlocomotoractivityinmice.Thenorphine (1.25,2.5and5.0mg?kg)orVehwas administratedigoncedailyfor7days.After7drug- freedays(onday15),themicewerechallengedwith correspondingdosesofThenorVeh.n=10.?s. 一P<0.01usVehgroupofthesamedaybyLSDtest 3噻诺啡对急性给予吗啡所致小鼠活动增强效应 的影响 如表1所示,单独ipMor(10mg?kg),可使 小鼠自主活动明显增加.在ipMor(10mg?kg) 前30minigThen,Then可剂量依赖性地抑制单次给 予Mor诱发的小鼠高活动性(P<0.05),Then2.5 和5.0mg?kg可完全抑制Mor所致的小鼠活动 增强效应. 4噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化形成的影响 结果表明,Veh+Mor组小鼠的自主活动计数明 显高于Veh+Veh组,表明实验动物已稳定地建立 了对吗啡的行为敏化.Morip前30minigThen可 有效地抑制小鼠吗啡行为敏化的形成(P<0.01). Then5.0mg?kg可完全阻断敏化的形成过程. 见表2. 5噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化转化的影响 表3结果显示,Mor+Veh组小鼠的自主活动 计数明显高于Veh+Veh组,表明实验动物对吗啡 的行为敏化已建立.Then(ig)可剂量依赖性地抑制 Fromday1today7,themiceweregivenoneofthedrug pairsasfollowsbyigandip:Veh+Veh,Veh+Mor(20 mg'kg),thenorphine(1.25,2.5and5.0mg?kg) +Mor(20mg'kg).After7drug—freedays(onday 15),allanimalswerechallengedbyipMor10mg?kgand wereputintothetestcagesfor20min,thenthelocomotor countswererecordedfor40min.n=10.i?s.P<0.05. 一P<0.01vsVeh+Veh:Jp<0.01vsVeh+Morgroupby ISDtest Table3Effectsofthenorphineonthetransfer ofmorphinesensitizationinmice MiceinthecontrolgroupweregivenVehandtheothermice receivedMor20mg'kgipf0r7(1ays.Fromday8today l4,themiceweregivenVehorthenorphine(1.25.2.5and 5.0mg?kg)byig.Onday15,allanimalswere challengedbyipMor10mg?kg一andwereputintothetest cagesfor20min.Thenthelocomotorcountswererecordedfor 40min.n=10,x4-s.一P<0.01vsVeh+Veh: P<0.05,##P<0.()l,Jp<0.001vsMor+Vehgroupby ISDtest 765432l -=Il00=u爵0-0—l1000一一再-0 ?964?药学ActaPharmaceuticaSinica2004,39(12):961—965 小鼠吗啡行为敏化的转化(P<0.01),表现为各 Then组小鼠的自主活动计数与Mor+Veh组相比明 显降低. 6噻诺啡对小鼠吗啡行为敏化表达的影响 结果显示,与Veh+Veh组相比,Mor+Veh组 小鼠40min内的自主活动记数显着增加,表明实验 动物已稳定建立了对吗啡的行为敏化.Then可有 效地抑制小鼠吗啡行为敏化的表达(P<0.05), Then5.0mg?kg可完全抑制敏化的表达.如表4 所示. Table4Effectsofthenorphineonthe expressionofmorphinesensitizationinmice Miceinthecontrolgroupwere舀venVehandtheothermice receivedMor20mg?kg.'byipf0r7days.After7drug—free days(onday15),themiceweregivenVehorthenorphine (1.25,2.5and5.0mg?kg)byig.30minlater,all animalswerechallengedbyipMor10mg?kgandwereput intothetestcagesfor20min.Thenthelocomotorcountswere recordedfor40min.n=10.面士s.P<0.05.一P<0.O1 Veh+Veh:P<0.05Mor+VehgroupbyLSDtest 讨论 本实验中ig噻诺啡,可剂量依赖性地降低小鼠 的自主活动,表明噻诺啡对小鼠中枢神经系统有抑 制作用.阿片受体非选择性激动剂吗啡,可引起小 鼠高活动性….丁丙诺啡作为阿片受体部分激 动剂,也可使小鼠的活动性增高j.可见,虽然噻 诺啡与吗啡,丁丙诺啡同属于阿片类药物,但其对小 鼠自主活动的影响却与后两者明显不同,这可能与 它们的化学结构不同有关.动物的自主活动状况与 脑内的多巴胺(dopamine,DA)水平有关J,阿片系 统可通过和K受体调节中枢内DA的功能状 况.23.叔丁基被23.噻吩乙基取代(图1),可能 会改变药物对阿片受体作用的性质及亲和力,这可 能是噻诺啡呈现与丁丙诺啡相反的作用,即降低小 鼠自主活动性的主要原因之一.吗啡和丁丙诺啡反 复间断给药均可形成行为敏化l】'm.而本实验中噻 诺啡连续给药后其对小鼠自主活动的作用不但未形 成敏化,反而产生耐受(图3,d7,d15,各组之间无 显着差异).这也是噻诺啡与其他阿片类药物的不 同之处. 单次给予小鼠吗啡主要是通过激动受体,促 进中脑边缘系统(mesolimbicsystem)内DA神经递 质的释放,提高中枢DA水平,引起小鼠高活动 性?"].本实验中,吗啡ip前30rainig噻诺啡可剂 量依赖性地抑制单次给予吗啡所引起的小鼠高活动 性.这可能与两方面的因素有关.一方面,噻诺啡 作为受体的部分激动剂,对受体具有激动和拈 抗的双重特性.本实验的结果可能与噻诺啡的拮抗 特性(即阻断受体,进而阻断了吗啡对受体的 激动作用)有关.另一方面,图2结果已显示,噻诺 啡可非特异性降低小鼠的自主活动,这也可能是噻 诺啡对单次给予吗啡所引起的小鼠高活动性具有抑 制作用的原因之一. 行为敏化与多次给予成瘾性药物所产生的中脑 边缘系统内的神经可塑性变化有关?.中脑边缘 系统起源于腹侧被盖区(ventraltegmentalarea, VTA),投射到伏隔核(nucleusaccumbens,NAC),受 阿片系统的调节.行为敏化的形成过程与VTA 内对药物精神激动作用的反应性进行性增强有 关.本实验中,噻诺啡先于吗啡给药可剂量依赖 性地阻断小鼠吗啡行为敏化的形成,表明噻诺啡对 慢性吗啡诱导VTA内反应性增强的过程具有阻断 作用.敏化的转化过程涉及从VTA到NAC内的神 经生物学改变,是行为敏化巩固所必需.因噻诺 啡在连续给药7d后,其降低小鼠自主活动的作用 产生耐受,故d8一d14给予噻诺啡对行为敏化转 化过程的抑制,并不是噻诺啡在小鼠体内积留的结 果,而是阻断了敏化的巩固过程所致.单次给药所 诱导的小鼠活动性增高与NAC内DA的释放有 关?,而行为敏化的表达则与NAC内DA释放的反 应性增强有关?,故两者是由不同的机制介导的. 吗啡激发前给予噻诺啡可有效地抑制行为敏化的表 达,但本实验中,并不能完全排除噻诺啡单次给药对 小鼠自主活动的抑制作用. 总之,噻诺啡对小鼠行为的影响与其他阿片类 药物明显不同,它可降低小鼠的自主活动,对小鼠中 枢神经系统具有抑制作用,连续使用后该作用产生 耐受,而不产生行为敏化;噻诺啡可有效拈抗单次给 予吗啡所诱导的小鼠高活动性并对小鼠吗啡行为敏 化的形成,转化和表达具有明显的抑制作用,提示噻 诺啡可能对阿片类药物滥用和成瘾具有一定的干预 作用 赵文丽等:噻诺啡灌胃对小鼠吗啡行为敏化的影响?965? 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