老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰的改变

老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰的改变 () 动物学报 53 6:1069 - 1075 , 2007 Acta Zoologica Sinica 老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰 3 的改变 33 王丹秋于建宁李少华邵根宝刘红林 南京农业大学动物科技学院 , 南京 210095 () () 摘 要 分别取年轻 C57ΠB6 雌性小鼠 3 - 4 周龄与老龄 C57ΠB6 雌性小鼠 40 - 42 周龄不同发育时期的卵母 细胞 , 利用免疫荧光技术观察其组蛋白不同赖氨酸位点乙酰化的变化 , 并用 RT2PCR 法检测年轻小鼠与老龄小鼠 ) (() 卵母细胞不同发育时期 Hdac1 与 Hdac3 组蛋白去乙酰化酶mRNA 的相对 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达量 。结果显示 : 1年轻小鼠和 老龄小鼠卵母细胞组蛋白 H4ΠK12 、H4ΠK16 、H4ΠK5 及 H3ΠK14 的乙酰化水平均随发育进程逐渐升高 , 在完全生长期乙酰化水平达到峰值 , 至 M ?期 , 除 H4ΠK12 外 , 其它三个位点的乙酰化全部消失 ; 与年轻小鼠相比 , 完全生 () 长期时老龄小鼠卵母细胞组蛋白乙酰化水平较低 ; 2在完全生长期之前 , 年轻小鼠和老龄小鼠卵中 Hdac21 与 Hdac23 mRNA 的表达量呈逐渐降低趋势 , 但老龄小鼠在 M ?期有所升高 。与年轻小鼠相比 , 老龄小鼠完全生长期 ( ) 前各时期卵母细胞中 Hdac1 mRNA 的表达量均极显著降低 P < 0101; 而 Hdac3 mRNA 的表达量二者之间无显著 差异 。结果表明 : 老龄小鼠卵母细胞中组蛋白乙酰化和组蛋白去乙酰化酶表达出现了异常变化 [ 动物学报 53 () 6: 1069 - 1075 , 2007 。 Hdac1 Hdac3 荧光实时定量 PCR关键词 老龄小鼠 卵母细胞退化 组蛋白乙酰化 Changes in histone acetylation during oocyte development in old 3mice WAN G Dan2Qiu , YU J ian2Ning , L I Shao2Hua , SHAO Gen2Bao , L IU Hong2 33 Lin College of Animal Science and Technology , Nanjing Agricultural University , Nanjing 210095 , China Abstract The changes in the acetylation of histone were observed in oocytes at different developmental stages. They were detected from 32 to 42week2old C57ΠB6 mice and 402 to 422week2old C57ΠB6 mice respectively by immunofluorescence staining. The mRNA expression levels of Hdac1 and Hdac3 in oocytes at different developmental stages in young and old mice were ( ) ( ) examined by RT2PCR. Our results showed : 1The acetylation levels of histone H4ΠK12 , H4ΠK16 , H4ΠK5 and H3ΠK14increased gradually with the growth of the oocytes and reached the maximum at fully grown stage , then it almost disappeared except that of H4ΠK12 at M ? stage . Compared with young mice , the acetylation levels of histone in fully grown oocytes decreased in old () mice . 2The expression levels of Hdac21 and Hdac23 mRNA gradually decreased in both young and old mice before the“fully grown”stage , then increased at M ? stage in old mice . Compared with young mice , the expression levels of Hdac1 mRNA in ( ) oocytes before“fully grown”stage decreased significantly in old mice P < 0101; the expression levels of Hdac3 mRNA in oocytes between these mice showed no significant difference . These results indicate that both histone acetylation and the expression () of HDACs show an anomaly in the oocytes of old mice Acta Zoologica Sinica 53 6: 1069 - 1075 , 2007 . ( ) Key words Old mice , Degeneration of oocytes , Hdac1 , Hdac3 , RT2PCR Real2Time PCR, Histone acetylation 对女性而言 , 在 40 岁左右生育能力显著下降虽然主要原因是由于卵子数量的逐渐减少 , 但卵子 () 质量的下降也是重要原因之一 。实验表明 , 年轻女Volarcik and Sheean , 1998 ; Liu and Keefe , 2002, 2007204206 收稿 , 2007206204 接受 () () 3 国家自然科学基金 No130371034This research was funded by the grant from The National Natural Science Foundation of China No130371034] ( ) 33 通讯作者 Corresponding author1 E2mail : liuhonglin @2631net Ζ 2007 动物学报 Acta Zoologica Sinica ( ) (性的体外受精率要高于老年女性 > 40 岁Van 11113 M ?期卵母细胞的获取 ) Zonneveld and Scheffer , 2003。这种衰老相关的卵母 将 3 周龄与 40 - 42 周龄的 C57ΠB6 雌性小鼠各 细胞质量下降 , 往往伴随着染色体异常 、减数分裂 10 只腹腔注射 PMSG 10 IUΠ只 , 间隔 48 h 腹腔注射 () hCG10 IUΠ只进行超 数 排 卵 , 14 h 后 断 颈 处 死 , 剪 紊乱和自发流产的升高 Ursula , 1998, 然而这些 ( ) 取输卵管至 HTF Sigma培养液中 , 撕开壶腹部 , 实验 大 都 只 限 于 对 M ?期 卵 母 细 胞 的 研 究 ( () Volarcik and Sheean , 1998 ; Lin and David , 2002, 获取卵丘 - 卵 母 细 胞 复 合 体 , 在 透 明 质 酸 酶 1 ) mgΠml中消 化 5 min 去 除 卵 丘 细 胞 , 卵 母 细 胞 用对完全生长期及完全生长期前 的 卵 母 细 胞 研 究 不 PBS + BSA 清洗液清洗 。多 , 这其中会有什么异常变化也未见报道 。 112 免疫荧光化学分析 哺乳动物卵母细胞大多形成于胎儿发育时期 , 11211 免疫荧光染色 主要步骤为先将已经脱去卵出生前后阻滞于第一次减数分裂前期的双线期 。小 丘的卵母细胞在含 鼠卵母细胞在生 长 、发 育 过 程 中 积 累 各 种 营 养 物 有 10 mgΠml BSA 的 PBS 中清洗 , 再放于含 317 %多 质 , 同时进行卵质分化及结构建造 , 合成和贮存胚 聚甲 醛 的 PBS 中 室 温 固 定 30 min , PBS 清 洗 后 于 胎早期发育所需的各类信息 , 在此期间卵母细胞经 015 % Triton X2100 中室温孵育 20 min , PBS 清洗后 ( ) 历了核成熟 Elisabeth and Michele , 1999。研究表 ( 在抗 组 蛋 白 乙 酰 化 H4ΠK5 、H4ΠK12 、H4ΠK16 和 明 , 小鼠卵中组蛋白乙酰化参与染色质结构的改变 ( ) ) H3ΠK14多克隆抗体 稀释比例为 1?200中孵育 ( 进而 影 响 基 因 表 达 并 调 控 细 胞 的 功 能 Sarah and ( ) 1 h , 再加 入 二 抗 Cy3 标 记 的 羊 抗 兔 IgG。DNA) Paolo , 2005 ; Rabindranath , 2006, 然 而 衰 老 导 致 μ 检 测 采 用 3 gΠml 的 4 , 62diamidino222phenylindole的卵子质量下降是否有表观遗传学修饰的参与鲜有 () DAPI染色 10 min , 随后将卵母细胞按常规 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 报道 。 压片 , 于荧光显微镜下观察 。每组实验重复 3 次 , 本文利用组蛋白不同赖氨酸位点乙酰化特异性 每次处理至少观察 15 个细胞 。同时用 BSA 代替一 的抗体与免疫荧光技术及荧光实时定量 PCR 方法 , 抗作为阴性对照 , 其它处理过程与实验组相同 。 探讨了老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化 11212 荧光强度定量修饰的变化规律 , 分析了老龄小鼠卵母细胞发育过 ( ) 由图像分析软件 Image J 分别分析每张荧光 程中部分组蛋白乙酰化酶的表达模式 , 以期为探明 图片核区和胞质区任意五个点的亮度值 。核区亮度 衰老引起卵子质量下降的分子机制提供基础资料 。 的平均值减去作为背景的胞质区亮度平均值 CON2 1 材料与方法 Back , 得到 Cy3 在胚胎的核区的亮度 TOTAL 。每个 时期每个位点各取 20 个卵母细胞 。111 卵母细胞的获取 113 荧光实时定量 PCR ( RT2PCR) 11111 生长卵母细胞的获取 11311 引物 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 将 3 周龄与 40 - 42 周龄的 C57ΠB6 雌性小鼠各 按 照 GenBank 收 录 的 Hdac21 mRNA 全 序 列10 只 断 颈 处 死 后 , 分 别 取 出 其 卵 巢 , 撕 破 卵 巢 , NM 、 Hdac23 mRNA 全 序 列 、 NM 008228 - - 用细针刺破卵泡 , 获得卵丘 - 卵母细胞复合体 , 反 β用010411 、2actin mRNA 全 序 列 EF 095208 , - 复吹打 , 去除卵丘细胞 , 将获得的卵母细胞在 PBS 软件设计引物 , 引物序列如表 1 所Primer Primer 5 () 中 清 洗 三 次 。根 据 Zuccotti et含有 3 mgΠml BSA β μ示 , 由 上 海 英 峻 生 物 工 程 有 限 公 司 合 成 。2actin)( (的 方 法 , 将 直 径 < 50 1995 al1 1991 , m 不 包 mRNA 为内参 。μμ( ) 括透明带归为一类 ; 60m - 75m 不包括透明 11312 RNA 提取与反转录 PCR) 带归为一类 。 ( ) Trizol 试 剂 盒 invitrogen 提 取 细 胞 总 RNA , 11112 完全生长期卵母细胞的获取 μμμ25l 逆转录反应体系含 2 g 总 RNA 模板 个人简介word模板免费下载关于员工迟到处罚通告模板康奈尔office模板下载康奈尔 笔记本 模板 下载软件方案模板免费下载 , 4 l 随 将 3 周龄与 40 - 42 周龄的 C57ΠB6 雌性小鼠各 μμ机引物 Oligo DT , 1015 l DEPC HO , 1 l M2MLV 2 10 只腹腔注射 PMSG10 IUΠ只 , 间隔 47 h 后断颈处 ( ) μ( ) 200 U , Promega , USA, 5 l 5 ×RT 反转 录 酶 死 , 取卵 巢 至 HTF Sigma 培 养 液 中 , 将 卵 巢 撕 ( buffer 250 mmolΠL Tris2HCl p H 813 , 50 mmolΠL 破 , 用细 针 刺 破 卵 泡 , 获 得 卵 丘 - 卵 母 细 胞 复 合 MgCl, 250 mmolΠL KCl , 50 mmolΠL DTT , 215 mmolΠL () 2 体 , 透明质酸酶 1 mgΠml消化 5 min 去除颗粒细 ) μ(Spermidine , 015 l RNase inhibitor 10 000 U , () 胞 , 卵母细胞用 PBS 含有 3 mgΠml BSA清洗 。 6 期王丹秋等 : 老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰的改变1071 μμ) 的反应液 , 混匀 , 42 ?孵育 1 h , 再于 95 ?加热 5Promega , USA, 2l 10 mmolΠL dNTP 。先将 2g 总 μμ( RNA 模板 、4 l 随机引物及 4 l DEPC 水 总体系min , 反应完全后快速冷却于冰上 。RT 产物 - 20 ? μ) 保存 。 10 l80 ?变性 5 min 后立即臵于冰上 , 加入剩余 β表 1 基因 Hdac21 、 Hdac23 与 2acti n 特异性的引物参数 βTa ble 1 Para meters of gene2specif ic primers f or Hdac21 , Hdac23 and 2acti n 基因 引物序列 扩增片断大小 退火温度 Gene Primer sequence Length of amplified sequence Anneal temperature S : 5′2GTGAACTACCCACTGCGAGAC23′ Hdac21 160 bp 60 ? F : 5′2CCAATCCAACGAAGTTAGACT23′ S : 5′2TTGCCCCAGATTTCACACTCC23′ 196 bp Hdac23 5815 ? F : 5′2TCTTCAGCGTCGGCCTCGT23′ S : 5′2GAGGGGGAATCGTGCGTGACATCAA23′ βactin 138 bp 255 ? F : 5′2GGAACCGCTCGTTGCCAATAGTGA23′ 通过免疫荧光法检测年轻小鼠和老龄小鼠卵母11313 PCR 检测 μμ 1215l PCR 反应体系含 015 l dNTP ,上下游细胞 中 的 组 蛋 白 H4ΠK12 、H4ΠK16 、H4ΠK5 及 H3Π μμμK14 的乙酰化情况 , 并通过 Image J 软件分析其荧 引物各 0125l , 0175 l MgCl, 1125 l 10 ×buffer , 2 光强度 。结果表明 , 随着卵母细胞的发育 , 年轻小 μμ818l ddHO , 012l Taq 酶 。反应程序为 : 94 ? 5 2 鼠和老龄小鼠卵母细胞组蛋白 的 乙 酰 化 都 逐 渐 升 min 预变性 ; 94 ? 30 s , 55 ? 30 s , 72 ? 30 s , 共 高 , 至完 全 生 长 期 达 到 最 大 ; 到 M ?期 , 除 H4Π 30 个循环 ; 72 ?延长 10 min , 4 ?保存 。 ( ) K12 外 , 其它三个位点的乙酰化全部消失 表 2, 11314 荧光实时定量 PCR () 而且这种变化以 H4ΠK5 尤为明显 图 1 , 图 2。与 μμ 25 l RT2PCR 反 应 体 系 包 括 1418 l ddHO ,2 μ年轻小 鼠 相 比 , 老 龄 小 鼠 直 径 < 50 m 与 直 径 为 μμμ 510 l 5 ×buffer , 0175 l 10 mmolΠL dNTP , 012 l + + μμ60 m - 75 m 的卵母细胞中这四个 位 点 的 组 蛋 白 μμ250 mmolΠL Mg , 上下游引物各 015l , 1l 20 × 乙酰化水平没有变化 , 而到完全生长期时老龄小鼠 μ( ) SYBR Green I , 0125l E ×Taq Ta KaRa , J apan, 2 () 卵母细胞中其乙酰化水平降低 表 2。μl RT 产物 。 a表 2 卵母细胞在不同发育阶段组蛋白乙酰化 反应 程 序 为 : 95 ?预 变 性 1 min ; PCR 循 环 , Ta ble 2 Histone acetylation in oocytes at different 95 ? 10 s , 退火 10 s , 72 ?15 s , 读板 , 一共 45 个 a developmental stages 循环 ; 然后再 72 ?延伸 5 min ; 进行融解曲线分析 : (65 ?- 94 ?, 每隔 012 ?读板一次 温度恒定 1 s 后 完全生长期 组蛋白Π b cμμμ M ? < 50 m60m - 75mFully grown stage ) 开始读板。每 个 样 品 做 3 个 重 复 。将 RT2PCR 产 赖氨酸 HistoneΠ 物回收后梯度稀释后作为 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 品 , 制作标准曲线 。年轻 老龄年轻 老龄 年轻 老龄 年轻 老龄 lysine Young Old Young Old Young Old Young Old 11315 数据分析 H4ΠK12 + + - + + + + + + - + - 实 验 结 果 表 示 为 X ? SD , 用 SPSS1310 For ? H4ΠK16 + - + - + + + + + - - Windows 软件进行分析 。其中同一年龄不同发育时 期卵母细胞的 Hdac21 和 Hdac23 mRNA 表达量的差 H4ΠK5 + - + - + + + + + - - 异用 One2Way ANOVA 进行分析 ; 同一发育时期不 H3ΠK14 + - + - + + + + + - - 同年龄间 Hdac21 和 Hdac23 mRNA 表达量的差异用 a : + + 、 + 、 + - 、 - 分别代表荧光强度的很强 、强 、弱和没有荧 光 。b 、c : 指卵母细胞的直径 , 分别代表卵母细胞的不同发育时期 。 独立样本 t2test 进行分析 。 a : very intense , intense and weak fluorescence signals are denoted with + + , + and + - , respectively , and no signal with - . b , c : point to the 2 结果 diameter of the oocytes , represent oocytes at different developmental stages 211 老 龄 小 鼠 卵 母 细 胞 组 蛋 白 赖 氨 酸 位 点 的 respectively. 乙 酰化 图 1 H4ΠK5 在卵母细胞不同发育阶段的乙酰化 μμμ < 50 m 、60m - 75 m 指卵母细胞的直径 , 分别代表卵母细胞的不同发育时期 。AcHΠ4 K5 用乙酰化特异性的抗体 , 核 DNA 用 DAPI 染色 。Fig11 Acetylation of H4ΠK5 in oocytes at different developmental stages μμμ< 50 m , 60 m - 75m point to the diameter of the oocytes , represent oocytes at different developmental stages respectively. Cells were immunostained with ( ) the anti2acetyl histone H4Πlysine 5 H4ΠK5antibody. DAPI staining was used to mark the DNA of the cells. 图 2 不同年龄小鼠各发育阶段的卵母细胞 H4ΠK5 乙酰化的比较 μμ < 50 m 、60 - 75 m 指卵母细胞的直径 , 分别代表卵母细胞的不同发育时期 。设定年轻小鼠完全生长期卵母细胞中的 H4ΠK5 乙酰化的荧光强度值为 1 。 Fig12 Comparison of acetylation of H4ΠK5 in oocytes at different developmental stages in young and old mice μμ< 50m , 60 - 75m : the diameter of the oocytes , represent oocytes at different developmental stages respectively. The fluorescent intensity ofAcH4ΠK5 observed in oocytes at the fully grown stage in young mice was set as 1 . 6 期王丹秋等 : 老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰的改变1073 212 年轻 小 鼠 与 老 龄 小 鼠 卵 母 细 胞 前亦呈逐渐降低趋势 , 但在 M ?期有所升高 。与年Hdac21 与 中 轻小鼠相比 , 老龄小鼠完 全 生 长 期 卵 中 Hdac1 与 Hdac23 mRNA 的表达μ Hdac1 与 Hdac3 mRNA 在年Hdac3 mRNA 的表达量 、直径 < 50 m 卵和直径为RT2PCR 法比较 用 μμ轻小鼠与老龄小鼠不同发育时期卵母细胞中的相对60 m - 75m 的卵中 Hdac1 mRNA 的表达量均极显 ( ) μμ著降低 P < 0101, 而直径 60 m - 75 m 的卵和 表达量 。结果如图 3 所示 : 随着卵母细胞的不断发 育 , 年轻小鼠 Hdac21 与 Hdac23 mRNA 的表达量逐 M ?期卵中 Hdac3 mRNA 的表达量也出现降低 ,但 ( ) ,到 M ?期降至最低 ;而老龄小鼠在 M ?期无显著差异渐降低 P > 0105。 图 3 年轻小鼠与老龄小鼠不同发育阶段的卵母细胞中 Hdac21 ( A) 与 Hdac23 ( B) mRNA 的表达 ( ) 同一年龄不同发育阶段的差异用字母表示 小写字母为年轻小鼠 ; 大写字母为老龄小鼠, 没有相同字母的表示差异显著33 ( ( ) ) P < 0105; 表示同一发育阶段两种年龄间差异极显著 P < 0101。 Fig13 The expression levels of Hdac21 ( A) and Hdac23 ( B) mRNA in oocytes at different developmental stages in young and old mice () Differences between stages at the same age are denoted with letters capital letters for old mouse and small letters for young miceand means 33 ( ) without a common letter indicate significant difference P < 0105between stages ; indicate extreme difference between ages at the same stages of oogenesis. 些研究认为 : 老龄动物的卵母细胞中 , 染色质结构 3 讨论 ( 异常 , 后 成 修 饰 作 用 不 规 则 Toshio and Geppino , ) 2004。卵母细胞退化是衰老造成母源性生育力下降的 主要因素 。退化的卵母细胞通常表现为细胞周期阻 311 老龄小鼠不同发育阶段的卵母细胞中组蛋白 滞 、减 数 分 裂 紊 乱 以 及 一 些 基 因 的 表 达 异 常 乙酰化的变化 ( Hassold and Chiu , 1985 ; Ursula , 1998 ; van 组蛋白乙酰化参与染色质结构的改变进而影响 ) Zonneveld and Scheffer , 2003。目 前 关 于 卵 母 细 胞 基因表达并调控细胞的功能 , 生长卵母细胞中组蛋 退化及其调控机制的研究仍然不够透彻 , 近来的一 白的乙酰化有利于基因转录 , 而成熟卵母细胞中组 蛋白的去乙酰化则通过去除活性基因上的信息来帮Hdac21 与 Hdac23 mRNA 的表达量逐渐降低 , 但 鼠 ( 助染色质重构 , 为受精做充分准备 Kim and Liu ,在 M ?期有所升高 。与年轻小鼠相比 , 老龄小鼠完 ) 全生长期卵中 Hdac1 与 Hdac3 mRNA 的表达量 、直 2003 ; Sarah and Paolo , 2005 ; Rabindranath , 2006。 μμμ径 < 50 现有研究表明 , 老龄小鼠未成熟卵的数目较年轻小 m 卵 和 直 径 为 60 m - 75 m 卵 中 Hdac1 ( ( ) ) 鼠下降 , 而且 SN surrounded2nucleus型卵所占比 mRNA 的表达量均极显著降低 P < 0101, 而直径 ( μμ率增大 , 但并未从基因水平进行深入探讨 Zuccotti 为 60m - 75m 卵和 M ?期卵中 Hdac3 mRNA 的表 ( ) ) 达量也降低 , 但无显著差异 P > 0105。这 可 能 and Silvia , 2005。本试验显示 , 与年轻小鼠相比 , μμμ 老龄小鼠直径 < 50m 与直径为 60m - 75m 的卵 意味着在未成熟 的 卵 中 , 老 龄 小 鼠 基 因 的 转 录 下母细胞中组蛋白乙酰化水平没有变化 , 而到完全生 降 , 但具有基因特异性 。老龄小鼠完全生长期卵中 长期时老龄小鼠卵母细胞中组 蛋 白 乙 酰 化 水 平 降 组蛋白的低乙酰化及转录活性的下降及 M ?期卵中 低 , 说明老龄小鼠卵母细胞中组蛋白乙酰化的异常 Hdac21 与 Hdac23 mRNA 表达量的突然增加可能与 ( 变化可能从完全生长期时开始启动 , 这需要进一步 其减数分裂中染色质结构异常密切相关 Elisabeth ) 的研究证实 。 et al . , 1999 ; Liu and Chang , 2002, 其中机制还有 待实验进一步研究 。 最新研究发现 , 与年轻小鼠相比 , 老龄小鼠卵 母细胞在 M ?期组蛋白去乙酰化不完全 。同时在年 ( )参考文献 References 轻小鼠的 M ?期卵母细胞中加入组蛋白去乙酰化酶 ( ) Akihide A , Akihiro T , 2006 . Histone deacetylase 3 HDAC3is recruited to ( ) 抑制剂 TSA Trichostatin A以抑制组 蛋 白 去 乙 酰 target promoters by PML2RARa as a component of the N2CoR co2 化 , 结果发现胚胎 产 生 非 整 倍 体 的 比 率 显 著 升 高 repressor complex to repress transcription in vivo. Biochem. Biophys. Res. Communi . . 345 : 1 471 - 1 480 . () Akiyama et al . , 2006。以上发现说明老龄小鼠 MAkiyama T , Nagata M , Aoki F , 2006 . Inadequate histone deacetylation during oocyte meiosis causes aneuploidy and embryo death in mice . ?期卵母细胞组蛋白修饰的异常可能是其非整倍体 () PNAS 103 19: 7 339 - 7 344 . 频率升高的原因之一 。本试验也发现 , 在老龄小鼠 Akiyama T , Jin Moon KIM , 2004 . Regulation of histone acetylation during meiotic Maturation in mouse oocytes. Mol . Reprod. Dev. 69 : 222 - M ?期的卵中 , 组蛋白去乙酰化不充分 , 而且组蛋227 . 白乙酰化异常是在完全生长卵 母 细 胞 中 开 始 出 现 ( ) Annemieke JM , De Ruijter , 2003 . Histone deacetylases HDACs : characterization of the classical HDAC family. Biochem. J . 370 : 737 - 的 。研究结果进一步证实老龄小鼠 M ?期卵母细胞 749 . 中部分组蛋白乙酰化状态异常可能是其卵子质量低 Elisabeth C , Michele B , 1999 . Gene Expression and chromatin organization during mouse oocyte growth. Dev. Biol . 207 : 76 - 85 . 下的原因之一 。Hassold T , Chiu D , 1985 . Maternal age2specific rates of numerical chromosome abnormalities with special reference to trisomy. Hum. 312 Hdac21 与 Hdac23 mRNA 在年轻与老龄小鼠 () Genet . 70 1: 11 - 17 . 不同发育阶段的卵母细胞中的表达 Kim JM , Liu HL , 2003 . Changes in histone acetylation during mouse oocyte () meiosis. J . Cell Biol . 162 1: 37 - 46 . ) ( 组蛋白乙酰化是 HAT 组蛋白乙酰转移酶与Lin L , David L , 2002 . Ageing2associated aberration in meiosis of oocytes ) (HDAC 组蛋白去乙酰化酶共同作用 、相互平衡 ( ) from senescence2accelerated mice . Human Reprod. 117 10 : 2 678 - 2 685 . ( 的 结 果 Kim and Liu , 2003 ; Tomokiko and Kim , Liu H , Chang HC , 2003 . Metaphase ?nuclei generated by germinal vesicle transfer in mouse oocytes support embryonic development to term. ) 2004, 其中 HDAC1 与 HDAC3 在卵巢中表达较多() Human Reprod. 18 9: 1 903 - 1 907 . () Annemieke and De Ruijter , 2003, 且基因 Hdac1 与Liu L , Keefe DL , 2002 . Ageing2associated aberration in meiosis of oocytes ( ) from senescence2accelerated mice . Hum Reprod. 17 10 : 2 678 - Hdac3 均 与 染 色 质 组 装 及 转 录 抑 制 密 切 相 关2 685 . (Akihide and Akihiro , 2006 ; Omisanjo and Biermann , Omisanjo OA , Biermann K , 2007 . DNMT1 and HDAC1 gene expression in ) impaired spermatogenesis and testicular cancer . Histochem. Cell Biol . 2007。有文章报道 , 与年轻小鼠相比 , 老龄小鼠 () 127 2: 175 - 181 . 成熟 卵 母 细 胞 中 与 Dnmt1 基 因 共 同 抑 制 转 录 的 Rabindranath D , 2006 . Chromatin modifications in the germinal vesicle Hdac22 基因表达上升 , 而且与 细 胞 衰 老 相 关 的 组 ( ) () GVof mammalian oocytes. Dev. Biol . 292 1: 1 - 12 . Sarah K , Paolo S2C , 2005 . Chromatin remodelling and epigenetic features of 蛋白乙酰转移酶基因 Myst1 与 Mrgx 的表达也有所 () germ cells. Nature 434 31: 583 - 589 . ( ) 上升 Toshio and Geppino , 2004。但目前尚未有关 Toshio H , Geppino F , 2004 . Age2associated alteration of gene expression 于 Hdac1 与 Hdac3 与卵母细胞衰老直接联系的研究 ( ) patterns in mouse oocytes , Human Mol . Genet . 13 19 : 2 263 - 2 278 . 报道 。我们比较了 Hdac1 与 Hdac3 mRNA 在年轻小 () Ursula E , 1998 . Genetics of oocyte ageing. Maturitas 30: 143 - 169 . 鼠与老龄小鼠不同发育时期卵母细胞中的相对表达 Volarcik K , Sheean L , 1998 . The meiotic competence of in vitro matured human oocytes is influenced by donor age : evidence that folliculogenesis 量 。结果显示 : 随着卵母细胞的不断发育 , 老龄小 is compromised in the reproductively aged ovary. Hum. Reprod. 13 () 1: 154 - 160 . 6 期王丹秋等 : 老龄小鼠卵母细胞发育过程中组蛋白乙酰化修饰的改变1075 van Zonneveld P , Scheffer GJ , 2003 . Do cycle disturbances explain the age2 Zuccotti M , Yanagimachi H , 1991 . The ability of hamster oolemma to fuse related decline of female fertility ? Cycle characteristics of women aged with spermatozoa : its acquisition during oogenesis and loss after over 40 years compared with a reference population of young women. fertilization. Development 112 : 143 - 152 . () Hum. Reprod. 18 3: 495 - 501 . Zuccotti M , Anna P , 1995 . Chromatin organization during mouse oocyte Zuccotti M , Silvia G , 2005 . Chromatin organisation and nuclear architecture growth. Mol . Reprod. Dev. 41 : 479 - 485 . in growing mouse oocytes. Mol . Cell . Endocrinol . 234 : 11 - 17 .