[doc] 紫外分光光度法测定海蟑螂中腺苷含量
紫外分光光度法测定海蟑螂中腺苷含量
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ChinJ
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MarDrugs,2005February,Vo1.
24No.1中国海洋药物杂志2005年2月第24卷第1期
紫外分光光度法测定海蟑螂中腺苷含量
宣伟东,卞俊,曾华武,肖靖
(海军药学专科中心.上海200434J
摘要:目的建立海蟑螂中药理作用成分腺苷的含量测定方”2x.方法海蟑螂全体经37”C水温浸提取,硅胶
薄层层析分离,用紫外分光光度法于260nm处测定腺苷吸光度.结果在1.
O,2O.0g.mL一的范围内腺苷
的浓度和吸光度呈良好线性关系(r—O.9998,n一6),平均回收率为99.3%(RSD=1.
9%,n一3).结论本法
简捷,准确,适用于海蟑螂中腺苷的含量测定.
关键词:海蟑螂;腺苷;紫外分光光度法;含量测定
中图分类号:R917文献标识码:A文章编
号:1002—3461(2005)01—0040—03
DeterminationofadenosineinLigiaexoticawithultraviolet
spectrophotometry
XUANWei—dong,BIANJun,ZENGHua—WU,XEAOJing
(ResearchCenterofPharmacy,Navy,thePeople’5LiberationA,Shanghai200434,
China)
Abstract:ObjectiveToestablishaUVmethodofdeterminationofadenosineinLigiaexotica.
MethodsAdenosinewasextractedwith37?
waterandseparatedbyTLCsilicagel.theab—
sorbancewasdetectedat260nmwithUVspectrophotometry.ResultsThecabibrationcurve
foradenosionwaslinearwithintherangeof1.O,20.Og?mL_.,r一0.9998(n
一6),the
averagerecoverywas99.3,RSD=1.9(n一
3).ConclusionThemethodwassimple,con—
venientandaccuratefordeterminationofadenosineinLigiaexotica.
Keywords:Ligiaexotica;adenosine;ultravioletspectrophotometryassay
海蟑螂Ligiaexotica(Roux)属甲壳
纲,海蟑螂科,又名海蛆,海岸水虱,水陆两
栖,长年生活在海岸边.有消积,活血,解毒
之功效.在沿海地区民间常以海蟑螂为主
药,经瓦焙干炮制后,采用口服或外敷,用于
跌打损伤,消肿止痛,或治小儿疳积,痈疮肿
毒.本中心曾对海蟑螂的药理活性进行研
究,其提取液经动物实验证明具有显着的消
炎止痛作用[1].经对其有效部位进行成分分
析表明,海蟑螂全体中含有较高的腺苷成分,
可能与其药理活性有关.本文采用紫外分光
光度法测定海蟑螂中腺苷的含量,为海蟑螂
的药用开发提供质量控制依据.
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40?
1仪器与试药
岛津UV一240紫外分光光度计;海蟑螂
采集自浙江舟山市沿海,经本中心蔡定国主
任药师鉴定为节肢动物门,甲壳纲,海蟑螂科
海蟑螂Ligi10mL,于37?水浴中温浸
24h,过滤,残渣加蒸馏水10mL再温浸24h,
过滤,合并滤液,4O?真空干燥浓缩至约
lmL,转移至2mL容量瓶,蒸馏水定容得海
蟑螂提取液[1].用微量注射器取该提取液
80L,点样于10×20cm薄层硅胶板上,以氯
仿一醋酸乙酯一异丙醇一水(8:2:6:0.5)为展
开剂,腺苷标准品为对照,直立上行展开.紫
外灯下检测后,刮取与标准样品Rf值一致的
斑点硅胶,置10mL带盖试管,精密加入
5mL蒸馏水,剧烈振摇2min后,以3000r?
图1腺苷测试品和标准品的紫外吸收光谱
min离心30min,小心吸取上清液,即得测
试样品溶液[2,3].标准样品溶液和测试样品
溶液在200~320nm范围内进行紫外扫描得
紫外图谱(见图1),由图可知样品紫外吸收
图和标准样品重合良好,表明样品中其他成
分对吸光度几乎无干扰.
2.3线性关系
精密量取标准品溶液,配制成浓度分别
为1.0,4.0,8.0,12.0,16.0,20.Og?mL_1
的腺苷溶液,以蒸馏水为参比,于260nm处
测定吸光度,结果见表l.以浓度(g?
mL_1)为纵坐标Y,吸光度为横坐标X,绘制
标准曲线(见图2),回归后得浓度一吸光度线
性方程:
Y一17.2406X一0.2323r一0.9998
显示在1.O,2O.Og?mL_1的范围内,
腺苷的浓度和吸光度呈现良好的线性关系.
0020.406l
f衄nn”
图2腺苷吸光度一浓度标准曲线
表1腺苷标准品吸光度值
1.0
4.0
8.0
12.0
16.0
20.0
0.068
0.238
0.493
0.712
0.934
1.172
0.068
0.239
0.493
0.712
0.934
1.173
2.4精密度与稳定性试验
取腺苷标准品溶液,加水配制成浓度为
5g?mL_.,以水为参比,于260nm处测定
吸光度.重复平行测定5次,得到吸光度值
RSD为0.629/5.另取该腺苷标准品溶液,以
水为参比,每隔lh测定吸光度,重复平行测
定9次,得吸光度的RSD为0.61.结果
显示本试验方法精密度良好,标准品溶液在
8h内有较好的稳定性.
2.5样品测定
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41?
Chin.,MarDrugs,2005February,Vo1.
24No.】中国海洋药物杂志2005年2月第24卷第1期
按测试品溶液制备方法制备3批测试
品,以水为参比,于260nm处测定吸光度值.
另取含量分别为2.0,6.0ptg?mL-1的腺苷
标准品溶液,依法测定吸光度,以外标二点法
计算得到测试品腺苷浓度,经换算得海蟑螂
中腺苷的含量(见表2).
表2海蟑螂腺苷含量测定结果
2.6加样回收率试验
取已知腺苷含量的海蟑螂粉末(批号:
021126)1.0g,共3份,精密称量,加入腺苷标
准品,按测试品溶液的制备方法提取并制备
测试液,按样品测定方法测定吸光度并求得
腺苷含量,计算回收率,结果见表3:RSD为
1.9.
表3回收率试验结果
样品量标准品加入量回收率平均回收率RSD
(g)(g)()()()
1.02240097.9
1.oo750098.699.31.9
1.24560o1o1.5
3讨论
本文采用硅胶薄层层析结合紫外分光光
度法测定了海蟑螂中腺苷的含量.海蟑螂活
性成分经温浸提取,薄层层析分离后得到的
测试品溶液和标准品溶液的紫外吸收图谱完
全一致,表明测试品溶液中主要成分为腺苷,
可以排除其他成分的干扰.本法灵敏度高,
简便易行,可用于海蟑螂药材的质控及药理
筛选的方法之一.
参考文献:
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取方法[P].中国专利.1253780.2000—05—24.
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(收稿日期:2004—03—08)
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