新鲜果蔬中还原性VC含量的测定方法优化.doc

新鲜果蔬中还原性VC含量的测定方法优化.doc 新鲜果蔬中还原性VC含量的测定方法优化 摘要:采用紫外分光光度法测定新鲜果蔬中还原型VC含量，探讨了 此方法的最佳测定条件。结果表明，以10%盐酸为提取剂，可在230 nm处 测定果蔬中还原型VC含量，最佳反应温度和时间分别为70 ?和14 min。 优化后的测定方法变异系数小于2.50%，平均回收率为98.99%，VC含量在 0,0.14 mg/50 mL呈良好的线性关系。该方法简单、快速、准确，可用于 果蔬中还原型VC含量的测定。 关键词:紫外分光光度法;VC;水果;蔬菜 中图分类号:0657.32 文献标识码: A 文章编号:0439-8114(2013) 21-5308-03 Determination of the Content of Reduction-type Vitamin C in Fresh Fruits and Vegetables YANG Jin-fenga，b，XIE Tian-zhua，b，WANG Feng-xiaa，b，QI Xue-meib，HU Li-pinga，b (a.Gansu Engineering Technology Research Center for Sweet Cherry; b.College of Life Science and Chemistry， Tianshui Normal University， Tianshui 741000，Gansu， China) Abstract: The method to determine reduced vitamin C in fruits and vegetables by ultraviolet spectrophotometry was constructed， and all determination conditions were optimized. The results showed that vitamin C was determined with the 10% hydrochloric acid as extraction solvent at 230 nm. The optimum reaction temperature and time were 70 ? and 14 min， respectively. The coefficient of variation of the optimized method is less than 2.50%， and the average recovery is 98.99%. The method showed a good linear relationship in the course of 0,0.14 mg/50 mL. The method was simple， rapid， accurate， which can be used for determination of the content of reduced vitamin C in fruits and vegetables. Key words: ultraviolet spectrophotometry; vitamin C; fruit and vegetable 食品中还原型VC的测定方法很多，如高效液相色谱法[1-3]、荧光分 光光度法[4-6]、原子吸收光谱法[7，8]、紫外分光光度法[9-11]、滴定 分析法[12]、钼蓝比色法[13-15]等，其中高效液相色谱法、荧光分光光 度法和原子吸收光谱法要求样品的纯度较高，还需要有昂贵的仪器;紫外 分光光度法中2，4-二硝基苯肼比色法操作麻烦，耗时较长;2，6-二氯靛 酚法操作简便且应用最普遍，但是药品价格昂贵，而且多数果蔬样品溶液 都有颜色，使滴定终点不易判定，使用脱色剂也很难脱色完全，且造成VC 的损失;碘量法需标定滴定碘液，麻烦费时。相比之下，紫外分光光度法 较为简便，易操作。 目前，对紫外分光光度法测定食品中还原型VC已有相关报道，但在 实际应用中，部分试验条件差异较大，无法得到统一的 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 ，因此，本研 究对测定的最大吸收峰、酸性介质、反应温度以及反应时间等条件作了进 一步的分析，确定了紫外分光光度法测定果蔬中还原型VC的最佳试验条件。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 所用样品购买于天水果蔬批发市场，选择了番茄、青椒、黄瓜、草莓、香蕉、苹果5种蔬菜和水果作为待测样品，因为这几种样品在日常生活中比较常见，实际应用价值较大，样品中VC含量相关报道很多。 UV3010型紫外分光光度计(日本日立公司)、FA1004型电子天平(上海越平科学仪器公司)、SYC-15B型超级恒温水浴锅(南京桑立电设备厂)。 1.2 方法 1.2.1 溶液配制 ?0.1%盐酸溶液。取浓盐酸133 mL，加水稀释至500 mL;?100 μg /mL VC 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 溶液。称取0.050 0 g抗坏血酸，以10 mL 0.1%盐酸溶液，并以蒸馏水定容到500 mL容量瓶中;?Cu(NO3)2溶液。准确称取Cu (NO3)2 0.189 0 g，以蒸馏水溶解并定容到500 mL的容量瓶中，使Cu(?)的质量浓度为100 μg/mL。 所用试剂均为分析纯，试验用水均为去离子水。 1.2.2 样品处理及测定方法 将样品用去离子水洗净后擦干、切碎，准确称取10.00 g于研钵中，加入10 mL 0.1%盐酸溶液，快速研磨成匀浆后转入50 mL容量瓶中，用0.1%盐酸溶液定容后用高速冷冻离心机以10 000 r/ min离心10 min，取10 mL的上清液于50 mL容量瓶中，加入0.30 mL的Cu (NO3)2溶液后，于70 ?恒温水浴锅中加热16 min，取出后冰水冷却，以空白试剂为参照，在230 nm处测定。 1.2.3 试验 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 ? 提取剂的选择。分别吸取2.00 mL的2%草酸、2%偏磷酸、10%盐酸、2%草酸:1%盐酸(1?1，V/V)，于50 mL容量瓶中，用去离子水定容，以去离子水做空白在200,350 nm处进行扫描，选出VC的最佳提取剂;?最大吸收峰的选择。准确吸取3.00 mL的VC标准溶液于50 mL容量瓶中用去离子水定容，然后以去离子水作空白置于1 cm石英比色皿中，在190,400 nm的波长范围内多次进行连续光谱扫描，确定VC最大吸收峰;?温度对反应的影响研究。取5个容量瓶，分别加入2 mL标准VC溶液和0.3 mL Cu(NO3)2溶液，于20、40、60、80、100 ?下恒温水浴10 min，按试验方法测定光吸收值，考察温度对催化反应的影响，选出铜离子破坏VC的最佳温度;?时间对反应的影响分析。吸取2 mL的标准VC溶液和0.3 mL的硫酸铜溶液，于70 ?下分别加热2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 min，然后用冰水冷却，测其吸光度值，分析时间对反应的影响，选出铜离子破坏VC的最适时间;?精密度及回收率的测定。吸取2.00 mL的样品液于50 mL的容量瓶中，将样品测定3次，测定吸光度值，计算精密度; 吸取2.00 mL的样品液于50 mL的容量瓶中，加入VC标准溶液0.5 mL，分析样品的回收率。 2 结果与分析 2.1 提取剂的选择 VC是一种不稳定的维生素，在测定时需要选择一种较好的提取剂，以延长VC的稳定时间，提高VC的提取效率，不同测定VC的方法，所采用的提取剂也不同，最常用的VC提取剂有10%盐酸、2%草酸、2%偏磷酸、2%草酸?1%盐酸(1?1，V/V)等。对10%盐酸、2%草酸、2%偏磷酸、2%草酸? 1%盐酸(1?1，V/V)在200,350 nm进行波长扫描，发现10%盐酸溶液在此波长范围内的吸光度值最小，在230 nm下盐酸则没有吸收值，因而不会影响VC的光吸收。故本试验选择10%盐酸溶液作为VC的最佳提取剂。有文献表明，VC在盐酸溶液中具有较好的稳定性[9]。 2.2 最大吸收峰的选择 吸收峰的大小决定着方法的灵敏度，只有选择正确的波长，才能减少系统误差，提高测定的准确度。由图2可知，随着波长的增大，VC在230 nm处有最大吸收峰，故选择230 nm作为测定波长。 2.3 温度对反应的影响 由图3可知，常温下VC就可分解，但不能很快分解，20 ?时吸光度值很大;20,60 ?时随着温度的上升，吸光度值直线下降，说明升高温 ,80 ?度加快了还原型VC与铜离子的反应，从而加快了VC的分解;在60吸光度值较低，且较稳定，说明还原型VC已基本破坏完全，测得值接近于铜离子的吸光度值;在100 ?时吸光度值又有所增加，这可能是氧化后的VC被转化为古洛糖酸的缘故。70 ?处于温度较稳定区段的中间位置，选择这个温度有利于加热时控制温度，可使试验的测量结果更为准确，因此选择的最佳反应温度为70 ?。 2.4 时间对反应的影响 加热时间对反应影响较大，随着加热时间的增加，还原型VC会不断地被破坏转换成氧化型VC，当还原型VC被破坏完全时，吸光度值会稳定下来，但如果继续加热，氧化型VC进一步转化成古洛糖酸，会使吸光度值增加。由图4可知，在反应的前12 min，随着时间的增加，吸光度值逐 渐减小;加热时间在12,16 min吸光度值基本稳定，说明此时VC已被完全破坏;在反应超过16 min 以后，吸光度值又略有增加。反应时间为14 min时吸光度值最低，VC破坏得最完全，可使最终的测量结果更准确，故本试验选择最佳加热时间为14 min。 2.5 标准曲线 在优化的试验条件下，准确吸取VC标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于50 mL的容量瓶中，定容后摇匀，放置14 min后在230 nm波长处测定吸收度(A230 nm)，得到浓度C(mg/50 mL)对吸光度A230 nm的标准曲线回归方程 为A230 nm=1.554 9C， R2=0.995 6(图5)。结果表明，VC浓度在0,0.14 mg/50 mL吸光度值与VC含量呈良好的线性关系，服从比尔定律。 2.6 精密度及回收率试验 表1的结果表明，优化后的方法测定果蔬中的VC，测定结果较可靠，且重复性较好，变异系数小于5%，说明优化后的测定方法有较高的精密度，重现性好。平均回收率为98.99%，回收率较高，见表2。 3 小结与讨论 通过试验，确定了紫外分光光度法测定果蔬中还原型VC的最佳条件，从而建立了一种简便、快速的测定还原型VC的方法。优化后的方法的精密度、准确度均符合要求，适用于果蔬中还原型VC含量的测定。 参考文献: [1] 刘贵花，潘富友.RP-HPLC直接测定水果中维生素C含量[J].科学技术与 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 ，2009，9(18):5307-5310. 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