伪狂犬活疫苗细胞覆盖法接毒试验
今日畜牧兽医
实验研究
伪狂犬活疫苗细胞覆盖法接毒试验
张雪丽.韩佳丽
f保定瑞普生物药业有限公司,河北保定070000) 摘要:用细胞悬液稀释种毒.促进病毒吸附 力,增加细胞单层致密性,提高产毒效价.减少换液 程序.降低成本.
关键词:2?,8?过夜的细胞悬液,伪狂犬活疫 苗.
本文所述的利用细胞悬液稀释种毒技术,是指 在生产细胞产品过程中,先把鸡胚成纤维细胞接人 转瓶培养形成细胞单层后,在接毒前先将种毒用鸡 胚成纤维细胞悬液稀释,再接入转瓶,以便提高更 多的活细胞个体供病毒增殖.提高疫苗效价. 1材料
1.1种毒伪狂犬病病毒,弱毒Bartha—K61株. 瑞普(保定)生物药业有限公司鉴定,保管和供应. 1.2种蛋SPF种蛋.由北京梅里亚提供. 2方法
2.1试验组
2.1.1按常规方法制备鸡胚成纤维细胞.上转 瓶培养.同时留下适量鸡胚成纤维细胞悬液置2? ,
8?保存.备用.
2.1.2用所留下鸡胚成纤维细胞悬液稀释种
毒,按比例接人已形成单层的细胞瓶中,调PH值, 继续培养至当细胞病变达到80%时收获. 2.2对照组
按照《规程》方法进行.
3结果
经检验结果看,实验组与对照组TCID卯对比 至免疫后150天.其HI效价为7.2.见
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
4. 3讨论和
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
表4EDS76京911株的HI抗体效价
情况见下表.
4小结与讨论
4.1利用鸡胚成纤维细胞对伪狂犬病毒的易 感性.用鸡胚成纤维细胞悬液稀释种毒,使毒种第 一
时间接触细胞并吸附.用带毒细胞填补单层细胞 空隙.细胞量的增加使细胞单层更加致密,这样病 毒不但有更多的活细胞可供利用.而且由于细胞单 层的致密使病毒通过细胞间桥的传播繁殖作用更 为加强.
4.2细胞悬液稀释种毒技术应用的效果显着 与否,可能与首次细胞单层的形成好坏,培养液PH 值,接毒量和收获时间有关.要想提高效价,PH值 的调整和细胞病变的观察和收获时间的判定极为 关键,收获的时间提前,推后对滴度影响极大. 4-3本方法也可用于鸡痘细胞苗,鸭瘟细胞苗, 法氏囊细胞苗生产.
(01B1200)~O
苗能够有效抵御该两种病毒的攻击,并且免疫14 天产生免疫力,而且免疫期至少6个月,说明ND一
免疫后不同时间(天)
7142128355O7090l1O13O150 抗体水平(Log2)5.67.58.38.48.77.89.59.29.08.27.2
3,1影响疫苗的免疫效力的主要因素有抗原 的质量和含量,乳化工艺和佐剂的选择.本试验以 10号白油,Tween一80和Span一80作为佐剂.油相 与水相的体积比为3:2.从试验结果来看,疫苗的各 项指标均较好.
3.2从实验结果发现ND—EDS76二联灭活疫 LaSota株和EDS76京911株均具
有良好的免疫原性.如果在生产过
程中改用进口佐剂,则该疫苗的免
疫保护期将更长.
3_3从本试验的HI抗体监测
和攻毒保护试验结果观察,HI抗体
水平反映了鸡群抵抗病毒攻击能力
高低.可以依据抗体水平监测结果来制定合理的免 疫程序.从而有效地控制新城疫和减蛋综合征疾病 的发生.
参考文献(略)
(01B3600)~
8o
2007年第6期
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