尿素氮测定
尿素氮测定(脲酶—改良波氏一步法) [
方法
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学原理]
脲酶使尿素分解产生氨,在碱性条件下,氨被氧化成氯胺,在亚硝基铁氰化钠催化下与苯酚及次氯酸作用,最后生成蓝色的靛粉,与经过同样处理的标准液进行比较,即可计算出样品中尿素或尿素氨的含量。
1、 操作表
加入物 空白管(B) 标准管(S) 测定管(T)
血 清 (ul) —— —— 5
标 准 液(ul) —— 5 ——
酶工作液(ul) 500 500 500
显色剂?(ul) 500 500 500
显色剂?(ul) 500 500 500 按顺序操作各管混匀,置37?水浴15分钟,取出至室温,于550nm,光径1cm,以空白管调零比色。
结果计算: 样本管吸光度(A)2、
尿素(mmol/L)= ×7.14
标准管吸光度(A)
3、 正常参考值:1.79,6.79mmol/L
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注意事项
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(1) 反应溶液的体积比例变化不影响测定结果。
(2) 酶工作液配制:取脲酶试剂与PH8.0缓冲液作1与9混合,即为酶工作液。 (3) 试剂盒4,8?可保存12个月,酶工作液4,8?可保存2个月。 (4) 所用器皿必须无氨的污染。
[厂家] 上海荣盛生物技术有限公司
[质控] 标准血清5ul加入酶工作液,显色剂?,显色剂?,各500ul,混匀,于37?水浴15分钟后,测定其吸光度值。
靶值490
二??四年十一月十一日