离子对色谱法测定磷酸肌酸钠的稳定性

中国医院药学杂志 2004年第 24卷第 1期 Chin Hosp Pharm J。2004 Jan，Vol 24，No．1 各 10 mL于 25 mL量瓶中，均加入过量的桂利嗪，振荡 12 h。滤过 ，取续滤液 1 mL置于 10 mL量瓶 中，用溶剂定容 ， 在253．6 nm处测其吸收度，并求 出桂利嗪浓度。以羟丙基一 环糊精浓度为横坐标(X)，桂利嗪浓度为纵坐标(y)，绘制 溶解度曲线，桂利嗪浓度与羟丙基一 环糊精浓度间成线性 关系，进行线性 回归得方程 ：y=0．715×10-4+2．98×10 x，r=0．9987。由此可以确定包合物中桂利嗪与羟丙基母 环糊精 的摩尔 比为 1：1 L 5l。所 以反应为 s+L=SL，贝0有[s] =K1[S]×[Lit／(1+K1[S])+[S] 其中Is] 为药物总浓度，[L] 为羟丙基一 环糊精的总浓度， [s]为桂利嗪的游离浓度，[L]为羟丙基一p环糊精的游离浓 度，K 为反应包合常数。据回归方程得：K1[s]／(1+K1[S]) = 2．98×10～，[S]=0．715×10—40计算得反应包合常数 K1为429．7。 3 讨论 由紫外图谱、红外光谱和熔点均可 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 包合物确已形 成，由紫外图谱和薄层色谱证明包合物无新的化学键生成， · 11 · 仅为物理包合。 羟丙基一 环糊精是 环糊精 的羟丙基衍 生物，与其母 体 环 糊精 相 比较 ， 环糊 精 使桂 利 嗪溶解 度 增 大 3．33 倍[ ，而羟丙 基母 环糊精 可使桂 利嗪溶解 度增 大22．4倍。 由此可见 ，羟丙 基一 环糊精 可使桂 利 嗪溶解 度大 大提 高。 本文为桂利嗪在临床上的应用及剂型改进提供了理论依据。 参考文献： [1] 中国药典 ．二部Is]．2000．699． [2] 丁田平，吴雪梅．药物制剂的新型辅料 2一羟丙基一 环糊精[J]． 国外医药—合成药 ，生化药 ，制剂分册 ，1996，17(2)：107． [3] 毕殿 洲主编．药 剂学 [M]．北 京：人 民卫生 出版 社，第 4版， 2000．113． [4] 张梅，曾婷，赵维 娟．羟乙桂胺一 环糊精包合物 的研制 [J]．中 国医院药学杂志，2001，21(5)：268． [5] 邵伟，袁敏，王大庆，等．黄芩甙一羟丙基一 环糊精包合物的研究 [J]．中成药 ，2001，23(5)：318． [6] 杨彩琴，申世刚，王静，等．桂利嗪-p’环糊精包合物的制备 [J]． 中国药师，2002，5(9)：533． 离子对色谱法测定磷酸肌酸钠的稳定性 [收稿日期 ]2003—02—25 祁广建 ，沈国英2，王毅 ，付志夫 (1．大连市疾病预防控制中心，辽宁 大连 116021；2．大连市卫生监督所，辽宁 大连 116011) [摘要】 目的 用离子对 色谱法对磷酸肌酸钠(P(二s)的稳定性进行测定j方法：流动相 为0．2％磷酸二 氢钠 +0．08％四丁基 季铵磷酸盐水溶液(pH3．3)，C18色谱柱，波长 210 nm。结果：W_S及其降解物浓度在0．3 g。L 时，RSD<1％。在0．075～ 1．2 g·L一 线性 范围内，r=0．9977(P<0．01)。结论 ：方法简便准确 ，可用于 W_S稳定性的测定。 [关键词】 磷酸肌酸钠；稳定性；离子对色谱法 [中图分类号]R927．11 [文献标识码]A [文章编号]1001—5213(2004)01—0011—02 Ion-pair chromatographic testing for the stability of phosphate creatine sodium QI Guang—Jian，SHEN Guo-Ying，WANG-Yi，et al(Dalian Municipal Center for I 煳 Control and Prevention 116021， Liaonin Dalian 116011，China) AⅨ IRACT：0 『ECIW E To determine the stability of P(：S by m~qDs of ion—pair chromatography．METHODS The mobile phase waS a mixture of 0．2％ KI-I2PO4 and 0．08％ solution of tetra butyiarnrnonium phosphate(pH3．3)，with the detection wavelength 210 nm of and the eolumn of C18．RESULTS The RSD value was below 1％ when the concentration of W_S and its degradation produets were 0．3 g·L-。。and the test confirmed the results(，．：0．9977，P<0．01)within the linear eoncentration ranged from 0．075 g．L一 to 1．2 g·L-。．CONCLUSION This method is convenient and accurate for testing the stability of W_S． KEY W ORI~ ：phosphate creatine sodium；stability；ion—pair chromatography 磷酸肌酸钠 (phosphate creatine sodium ，W_S)是一种高 效心肌保护药。临床多采用注射用水、5％葡萄糖注射液、 0．9％氯化钠注射液溶解后静注，或在 4℃停搏液中用于心 脏手术。但如果使用不当易产生肌酐 、肌酸和磷酸肌酸酐等 降解物，所以．W_S在上述液体中的稳定性对保证用药安全 至关重要。 1 仪器与药品 Shimadzu HPLC系统(10AD泵，10A紫外检测器，5．03 版工作站、IOA控制器)；7725一I进样器(Rheodyne USA)； 对照品：~ S(Merck公司，批号 725k2712950)；肌酸 (军事医 学科学 院，批 号 950613)；肌酐 (上海 化学 试 剂公 司 ，批 号 F2001215)：磷酸肌酸酐 (Sigma公 司，批 号 61K1218)。受试 品：W_S粉针剂(哈尔滨博莱制药有限公司，批号 20001101， 20001102，20001103)。受试液：注射用 水(密 阳神达药业公 司。批号 020318)；5％葡萄糖注射液、0．9％氯化钠注射液 (青岛金海制药厂，批号 0206072，02082207)；停搏液(中国 人民解放 军总 医院，批 号 011224112)；四丁 基季铵磷 酸盐 (Sigma公司．批号 13677／1 125o2)；其余试剂为AR。 2 测定方法 2．1 对照品溶液的配制 精密称取 W_S、肌酐 、肌酸和磷酸 [作者简介] 祁广建。男。副主任检验师，~ ：0411—4335900，E—mail：Qi—GJ@163．com 维普资讯 http://www.cqvip.com · 12 · 中国医院药学杂志 2004年第 24卷第 1期 Chin Hc*sp Pharm J，2004 Jan，Vol 24，No．1 肌酸酐各15．0 mg，用纯化水制成各为0．3 g·LI1的使用液。 2．2 受试品溶液的配制 取 PCS溶于下列溶液中：(1)2．0 g于12．0 mL注射用水中；(2)4．0 g于 500 mL 5％葡萄糖注 射液中；(3)2．0 g于12．0 mE 0．9％氯化钠注射液中；(4)2．5 g于 1000 mL停搏液中。最终分别用相应的受试液稀释成 0。3 g·LI1供测定用。 2．3 色谱 条件 色谱 柱 ：Shim—VP C18(4．6 rlqlYl×150 rlqlYl，5 tan)，流动相 ：0．2％磷酸二氢钾 +0．08％四丁基季铵 磷酸盐水溶液(用冰醋酸调 pH 3．3)，流速 ：0．9 mE ·rnin 检 测波长：210 rim，进样量 ：20止 ，用峰面积和外标法定量。 2．4 实验步骤 受试 品溶液在室温(25℃ ，停搏液在 4"C， 25℃)放置 ，于 0，1，2，4，6，8，12及 24 h取样测定不 同时间 P( 的含量和 pH值 (每点测定 2次 ，共 3个批号)。以 0 h 峰面积含量的均值为 100％，来计算不同时间各被测组分的 百分比含量。 3 含量测定 3．1 方法学考察 3．1．1 特异性 对照 品分离度测定 的结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明，4种组分 R>1．5符合测定要求，见图 1。同时对 4种受试液进行空白 与添加 PCS对照品测定 ，结果未发现干扰 ，见 图 2。 1 t／mm 图 1 对照品色谱图 1一肌酐 ；2一肌酸；3一磷酸肌酸酐 ；4一PC5 Fig 1 Chromatogram of chemical reference substance 1——creatine；2——kreatinin；3—’phosphorikreatinin；4—’PCS 3．1．2 精密度实验 (1)P( 及其降解物的精密度：取浓度 为0．3 g·LI1对照品溶液( =5)，每次进样 20 ，测定值 RSD依次为：肌酐0．31％；肌酸0．47％；磷酸肌酸酐0．85％和 PCS0．74％。(2)P( 在不同受试液中的精密度 ：进样 20 0．3 g·L 的受试品溶液( =6)，其测定值 RSD依次为注射 用水0．32％：0．9％氯化钠注射 液0．26％；5％葡萄糖 注射 液 0．31％和停搏液0．74％。 l I 八 — T1—广—r_T1_ — T1—厂— T1_ 2 4 6 2 4 6 t／nfm t／min C D 图 2 PCS在 4种受试液中的色谱图 1一注射用水空 白+PCS；2—5％GS空 白+PCS；3—0．9％NS空 白+ PcS；4一停搏液空白+PC5 Fig 2 Chromatogram ofPCSinfour subjects 1一blank of water[or injection+VCS；2一blank of 5％GS+PC_S；3一 blank of 0．9％NS+I~ S；4一 blank of stopped heart beating solution+ PCS 3．1．3 线性实验 在0．075～1．2 g·LI1范 围内，PCS线性 良好 ，回归方程为：y=1012935+17847335X r=0．9977。 3．2 稳定性实验 按“实验步骤”操作。PCS在不同受试液 中 0～24 h间的含量变化，以 0 h含量为 100％( =6)，24 h 的测定值依次为：(92．2±0．4)％(注射用水)、(82．3± 2．0)％(5％葡萄糖注射液)、(90．4±0．5)％(0．9％氯化钠注 射液)、(96．2±1．2)％ (25℃停搏 液)、(99．7±3．3)％(4"C 停搏液)。不同受试 品溶液 0--24 h的 pH变化 ( =6)依次 为 ：(8．39±0．18)～ (8．02±0．38)(注 射用 水 )、(7．81± 0．06)～(7．42±0．05)(5％葡萄糖注射液 )、(8．00±0．07)～ (7．60±0．10)(0．9％氯化钠注射液)、(8．76±0．oo)～(8．76 ±0．oo)(25℃停搏 液)、(8．62±0．oo)～(8．62±0．00)(4℃ 停搏液)。测定结 果表明受试液 的温度 、pH对 PCS的稳定 性有直接影响。其降解产物的含量随着 PCS含量的降低而 升高，主要降解物为肌酸。PCS在偏碱性和低温下的受试液 里稳定 ，没有降解物生成。 4 讨论 采用离子对色谱法考察了 PCS在临床使用条件下的稳 定性。该法可同时测定 PCS和其 3种降解物的含量，受试 液不干扰上述 4种组分的测定，结果准确可靠。实验中发现 PCS在0．9％氯化钠注射液和停搏液中 tR值提前，这与受试 液中钠离子的强度有关【¨。本实验所选 的受试液及 P( 在 其中的浓度均根据临床使用要求来确定的。 参考文献 ： [I] 张玉奎，王杰，张维冰，译．实用高效液相色谱法的建3~t1[M]．第 2版．北京：华文出版社 ，2001．334． [收稿 日期】2003一O1—28 可 可 维普资讯 http://www.cqvip.com