气相色谱中基线漂移原因

当流量和温度设置值改变时，可能会发生基线的波动或者漂移。。果在新的条件下运行之前系统还没有稳定，那么发生基线的波动是正常的。下面例子假设自从上次改变工作条件以后已经经过了足够长的稳定时间。波动和漂移经常会伴随噪声，这个问题我们会在后面讨论。 1 运行期间基线有规律的向上漂移或者向下漂移,这在程序升温过程中最常见。使用单一柱在中档到低档衰减条件下会出现上述问题。如果使用的是双柱系统，请核对信号模式是否设定为正确的柱补偿；或者使用电子柱补偿的单柱系统。柱补偿太小或者太大也是可能的。这种漂移可以通过色谱柱的彻底老化来降到最校在低温下工作会减小漂移但是会延长分析时间。使用温度上限较高的色谱等效柱也是可以的 2 基线不稳定；上下波动可能是系统某处有泄漏。检查隔垫的状况，必要的话就更换它。 检查柱子的连接。如果是在连接检测器的色谱柱端发生泄漏，则两次运行之间的 保留时间是不变的，但是灵敏度降低了。如果是在进样口端发生泄漏，则灵敏度会降低，而保留时间会变长。 噪声就是快速的基线起伏，会加宽基线，使基线出现毛刺状的外观。噪声和毛刺是不同的；毛刺是孤立的事件，不像噪声基本是连续的，后面将讨论有关毛刺的问题。 有些噪声是任何检测器都不可避免的。在高衰减值的情况下噪声是看不到的，但是当衰减减小的时候就会显现出来。噪声会减小检测器的灵敏度，所以它应当尽可能的最小化。 1 在原来很平整的基线上突然出现了噪声考虑最近对系统所做的所有改变。比如减小了衰减，即使绝对的噪声水平没有改变，也会使噪声看起来更大。新的隔垫会因为释放出低分子量物质而产生噪声。如果随进样口温度降低噪声会减小，那么很有可能就是因为这个原因。使用高质量的隔垫并保存在不会使其受到污染的地方。载气受到污染如果最近载气瓶更换过，但是旧的瓶子仍然可用并且还余下部分气体，则可以试着使用旧的瓶子看噪声是否会减校如果新的载气被严重污染并使捕集阱达到了饱和，那么在更换或再生捕集阱之前，使用旧的气瓶基线可能只是改善一点。当使用氮气作为载气时这个问题是很常见的。解决方法是从可靠的供应商那里购买气体。 检测器气体被污染。风扇或者空调吹过 GC 的气流可能会影响检测器出口的气这是可能的，尽管这不是噪声最可能的原因，因为检测器保护得很好。关掉气源或者屏蔽好检测器出口就可确定是否是这个问题。 检测器的连接松动或者它的信号线松动就会产生噪声。检测器被污染也产生噪声。 2 噪声逐渐增强到不可接受的水平这个症兆表明存在逐渐累积的噪声源，而不是如上面所讨论的突然变化。 火焰离子化检测器中容易逐渐积累沉积物。在极端的情况下，随着噪声水平的增加，还会产生毛刺。不完全燃烧的溶剂可能形成炭沉积物。因此应尽量避免使用这样的溶剂。如果 必须使用，则要做好经常清洗检测器的准备。 当来自色谱柱硅酮固定相的流失物在火焰中燃烧时就会形成氧化硅。为了最大限度地避免这个问题，就要使用固定相载量低的色谱柱、选择使用温度上限高的固定相、使用前彻底 老化色谱柱、分析的时候使用尽可能低的柱箱温度。拆开检测器使用一个小刷子来清除这两种沉积物。使用一种溶剂会帮助冲洗掉颗粒状物。 保留时间漂移是指在连续的运行中保留时间持续地增加或者减少。无规律的基线漂移将在后面作为保留时间波动来 1 在一系列分析运行中，保留时间突然增加,原因可能是载气流速或柱箱温度的问题；检查设定值是否正多次进样穿刺后隔垫漏气也是一个可能的原因。如果发生这样的情况，就要在运行分析之前更换隔垫。 载气瓶可能已经接近空了。 2 在一系列运行分析中，保留时间突然减小这很有可能是柱箱温度或者载气流速设定值改变引起的，。 在实际工作中，我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移（或上下波动）的原因，可能有以下几种： 1：柱子的平衡时间长。一般来说，新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。当然，柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂，那么比普通的简单的流动相（例如 二元流动相：甲醇：水，乙腈：水） 2：系统存在漏点。如果系统存在漏点，那么出现基线向下漂移。需要检漏 3：PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有气泡导致基线不稳，只需要看仪器的压力是否稳定就好。 4：流动相脱气。如果流动相没有脱气，基线肯定是不稳的。 5：柱后气泡。在柱子后有气泡产生，导致检测器中的读数有波动。 6；PUMP密封不好。密封不好，也会导致PUMP头的气泡（好象不可能）和漏夜，基线当然不稳定了。 7：系统的环境。仪器的使用，如温度的变化，流速的变化以及梯度洗脱，当然基线漂移。 8：单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染，能造成流量不准确，压力 波动。故也会波动，漂移。 9：检测器污染或有杂质 二：基线不平原因很多，可根据谱图的表现分析： 一直上扬或下降型：柱环境平衡慢，pH不对，流动相酸挥发等，有时和梯度洗脱也相关； 小幅缓慢波动（5-10min）：温度不稳； 较大幅的波动：考虑流动相不均匀； 很高很宽的峰：流通池有气泡或被污染； 无规则上下波动：如果是旧柱子，考虑柱子污染，不容易冲平。 检查出发点不外乎几点：柱子，流动相，柱温，检测器。 可通过更换条件检查哪里出了问题，看你说的像是流动相的问题，你看看不用TBA，用同样洗脱强度的乙睛-水行不行。 气相色谱小知识（很全面） A 所有组分峰变小 　　可能原因 建议措施 　　1 进样针缺陷 使用新针或无缺陷的针 　　2 进样后漏夜 判断漏夜点，维修之 　　3 MAE UP过大：分流比过大 调整气体流速和分流比 　　4 分析物质分子量过大，底挥发样品时 提高INJ。OVEN（主要柱子的最高使 　　样品的汽化温度过低，或柱温度低 用温度） 　　5 NPD被污染物（二氧化硅）覆盖 更换铷珠 　　6 NPD温度过高（使用或环境温度），气体不纯 更换铷珠：避免高温使用 　　7 不分流进样，分流阀关闭快：初始OVEN温高 　　8 检测器与样品不匹配 　　9 样品的挥发 调整样品的的浓度或选择合适的溶剂 B 峰伸舌 　　峰伸舌多右色谱柱过载 减小进样量（可能需提高仪器的sensitivty 　　使用大容量柱子：提高OVEN，INJ温度： 　　增大气体流速 C 峰高峰面积不重复 　　1 进样不重复，偏差大 自动进样器：加强手动进样的练习 　　2 其他峰型变化引起的峰错位，干扰 　　3 基线的干扰 　　仪器系统参数设定的改变 参数标准化， 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 化 D 负峰 　　1 Detector有数据处理系统信号极性接反 信号连接倒置 　　2 TCD中，样品导热系数大于载气导热系数 选择数据处理中的“负峰处理” 　　3 ECD被污染，可能在正峰后跟随负峰 清洗ECD，更换之（若有必要） E样品的检测灵敏度下降 　　1色谱柱，衬管被污染，使活性物质灵敏度小将 清洗衬管：用溶剂（优级纯甲醇）清洗色谱柱：更换之（如有必要） 　　2进样时样品渗漏（对易挥发物质更甚） 查找渗漏点 　　3 在splite汽化进样中，OVEN初始温度过高 用低于样品溶剂的初始温度;致使样品汽化后扩散加剧，导致撕沸点样品灵敏度下降 使用高沸点溶剂 F 峰分叉 　　1 进样过激，不稳定，形成二次进样 练习手动进样：使用自动进样器 　　2色谱柱安装失败 重新安装 　　3 spliteless或柱头进样，样品溶剂的混合 使用相同的溶剂 　　4柱子温度波动 修理稳控系统 　　5 spliteless进样，量大，时间长。希望用“溶剂 在毛细管色谱柱前端安装5米的去 　　效应“谱带浓缩时，溶剂的固定相的湿润性差 活化，未覆盖固定液的毛细管 　　溶剂将在柱子中形成几米长，厚度不等的溶剂带 　　破坏正常的浓缩，使峰拉宽分叉 G 峰拖尾 　　1衬管，色谱柱被污染;有活性点 清洗，更换之 （如有必要） 　　2衬管，色谱柱安装不党，存在死体积 注射甲烷，峰若拖尾，则重新安装 　　3色谱柱柱头不平 用金刚砂切割，使之平 　　4固定相的极性指标与样品分析不匹配 换匹配的柱子 　　5 样品流通路线中有冷井 消除路线中的过低温度区 　　6衬管或色谱柱中有堆积切割碎屑 清洗更换衬管;切除柱头10cm 　　7 进样时间过长 缩短之 　　8分流比低 增大分流比（至少大于20/1） 　　9进样量过高 减小进样体积或稀释样品 　　10 醇胺，伯胺，叔胺和羧酸类易拖尾 用极性大的色谱柱;样品衍生处理 H保留时间漂移 　　1 温度变化 检查柱温箱的温度 　　2气体流速变化 注射甲烷，测定载气线速度 　　3进样口泄露 检查进样垫;判断其他泄露处 　　4溶剂条件变化 样品，标准品使用相同的溶剂 　　5色谱柱被污染 切除柱头10cm;高温老化，清洗 I分离度下降 　　1色谱柱被污染 方法同上 　　2 固定相被破坏（柱流失） 更换之 　　3 进样失败 检查泄露，维修之检查吹扫时间 　　检查温度的适应性;检查衬管 　　4样品浓度过高 稀释;减少进样量;用高分流比 J溶剂峰拉宽 　　1色谱柱安装失败 　　2进样渗漏 　　3进样量高 提高汽化温度 　　4分流比低 提高分流比 　　5OVEN低 　　6 分流进样时，初始OVEN过高 降低初始柱温，使用高沸点溶剂 　　7吹扫时间过长（不分流进样） 定义短时间的吹扫程序 基线问题 A基线向下漂移 　　1 新安装的柱子，基线连续向漂移几分钟 继续老化 　　2 检测器未达到平衡 延长检测器的平衡时间 　　3 检测器或GC系统中其他部分有沉积物被烤出来 清洗之 B 基线向上漂移 　　1色谱柱固定相被破坏 　　2 载气流速下降 调整载气压力;清洗压力和流量调节阀 C噪音 　　1毛细管末插入检测器太深 重新安装色谱柱 　　2 使用ECD，TCD气体泄露引发基线噪音 检查，维修气路 　　3 FID ，NPD ，FPD燃气流速或燃气选择不当 高纯燃气，调整流速 　　4进样口被污染 清洗进样口;更换搁垫;更衬管中的玻璃纤维或硅烷化 　　5毛细管色谱柱被污染 切除首端10cm;用溶剂清洗色谱柱;更换之 　　6检测器发生故障 维修，更换之 　　7检测器电路发生故障 联系生产商或维修机构（专业） D Offset（基线位置的突然改变 　　1电源电压波动 使用稳压器 　　2 电路接口处连接不好 检查，清洗其接口处，拧紧接口 　　3进样口被污染 　　4色谱柱被污染 　　5毛细管末端插入检测器太深 　　6 检测器被污染 E毛刺 　　1 电磁干扰 关闭电磁干扰源 　　2颗粒污染进入检测器 　　3气路密封松动，气体泄露 拧紧松动的密封 　　4检测器内部电路接口或输入，输出信号接口松动 检查，清洗，拧紧接口，更换之 　　积尘或被腐蚀 F Wander（低频率的噪音） 　　1温度，压力等环境条件的波动 找到环境因素变化与基线的关系，然后稳定之 　　2温度控制漂移 测量检测器的温度 　　3 载气中含杂质（温度稳定时） 更换载气或气体净化器 　　4进样口被污染 　　5毛细管被污染 　　6气体流速控制失灵 清洗或更换气体 在实际工作中，我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移（或上下波动）的原因，可能有以下几种： 1：柱子的平衡时间长。一般来说，新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。当然，柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂，那么比普通的简单的流动相（例如 二元流动相：甲醇：水，乙腈：水） 2：系统存在漏点。如果系统存在漏点，那么出现基线向下漂移。需要检漏 3：PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有气泡导致基线不稳，只需要看仪器的压力是否稳定就好。 4：流动相脱气。如果流动相没有脱气，基线肯定是不稳的。 5：柱后气泡。在柱子后有气泡产生，导致检测器中的读数有波动。 6；PUMP密封不好。密封不好，也会导致PUMP头的气泡（好象不可能）和漏夜，基线当然不稳定了。 7：系统的环境。仪器的使用，如温度的变化，流速的变化以及梯度洗脱，当然基线漂移。 8：单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染，能造成流量不准确，压力 波动。故也会波动，漂移。 9：检测器污染或有杂质 10：可能是改变波长后，氘灯能量不足，导致漂移。（一般是高波长区域），也可能是改变波长后，流动相吸收较大，导致漂移。（一般是低波长区域） 扫描的红外光谱图变得有很多毛刺，怎么办？                            前段时间，实验室红外光谱仪扫描出的红外光谱图，毛刺非常厉害！仪器组的同事问我怎么办？    我首先怀疑的是水分干扰所引起的，问她是不是开除湿机足够时间。她说开除湿机足够时间了。再是我问她溴化钾是否干燥过，回答的也是。    我怀疑的是溴化钾没有完全干燥好，因为溴化钾没有干燥好的话，影响是最大的，因为扫描的溴化钾空白有毛刺，势必会造成待测样品的红外光谱图的毛刺。    我于是取了些溴化钾，用研钵将粗的溴化钾颗粒研细，再将其置于400摄氏度温度下干燥4小时，室温干燥条件下冷却。    通过我对溴化钾的干燥处理，再进行空白及样品扫描，问题解决了。    红外光谱的经验是：光谱毛刺，一般是水分惹的祸！ 药物分析的方法学验证所要做到的事项（一） 新药申报时，药品质量标准中分析方法必须验证；药物生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法必须进行验证；2005版药典中分析方法验证指导原则只规定了项目和基本方法而没有合格标准:附录XIX A；中国GMP(98)非常关注验证的过程,分析方法验证不完善是常见的问题 药物分析检验时药品生产的GMP的药物分析的方法学验证，是保证药物分析结果准确性的前提和基础，也是实现药物分析检测GMP的必然要素。 构成药物分析中的检测方法验证，这要涉及到以下些方面的内容： 1、分析方法验证成功的前提条件： （！）仪器已经确认、校正并在有效期内 （2）经过培训的人员（3）可靠稳定的对照品 （4）可靠稳定的实验试剂 （5）确认受试溶液的稳定性，在规定时间内无降解。 2、分析方法学验证所要求验证的内容：（1）含量的测定 （2）杂质的含量测定 （3）药物的定性鉴定 （4）药物的含量均匀度测定 （5）药物的微生物检测 （6）药物的细菌内毒素的检测 验证内容： 准确度：准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。 测定回收率R（recovery）的具体方法可采用加样回收试验法来进行测定。加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。数据要求:规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不同浓度样品各测三次 精密度：（重复性、中间精密度和重现性精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。 （1）重复性(repeatability):在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价 （2）中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度 （3）重现性(reproducibility)不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度 （4）数据要求：需报告SD，RSD和可信限。 专属性： 指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度的度量 • 通常通过分析含有加了杂质、降解产物、有关化学物质或安慰剂成分的样品，将所获分析结果与未加前述成分之样品的测试结果进行比较，两组测试结果之差即专属性 •鉴别反应---应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别，不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均应呈负反应 •含量测定和杂质测定---色谱法和其他方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图中应标明各组份的位置，色谱法中的分离度应符合要求 •杂质可获得的情况下，对于含量测定，试样中可加入杂质或辅料，考察测试结果是否受干扰；对于杂质测定，也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质间是否得到分离 检测限： 检测限系指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量。它是限度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该规定浓度即可。 •非仪器分析目视法：用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量 •信噪比法:用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限 •也可采用标准差法：空白值＝0时；①测定背景10次以上，求出标准差σ ②将σ乘以三倍；③在工作曲线上求出3σ相对应的浓度X，即为方法的检出值；空白值不等于0；①测定背景10次以上，求出标准差σ；②将σ乘以三倍；③在工作曲线上求出3σ相对应的浓度X；④将求得的对应浓度值加上空白值即得该方法的检出限 定量限（1imit of quantitationLOQ） •指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求 •常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定方法的实际测定下限 定量限： 指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度要求 •常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定方法的实际测定下限 线性：在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。线形通常用最小二乘法处理数据求得回归曲线的斜率（Slope）来表示。数据要求：至少需要五个浓度考察线形，需提供相关系数、y截距（是检定的可能偏差）、回归斜率及方差等参数，应列出回归方程数和线性图 注意：做线性时，应注意尽量做的点多一点、线性浓度范围宽一点，这样做的好处是：当你在准确度考察时，你做的回收率考察的浓度就大些，配制溶液时就容易操作些，否者，在你做线性考察时，你做的线性浓度范围不宽，那么你在考察回收率时，你采用加入法考察时的浓度变化范围不宽，操作浓度很难控制，造成实际操作困难。我碰到一个在做方法学研究的人，由于她在考察线性时，做的线性浓度不大，在做回收率时，加入后的量造成回收率浓度超出线性考察范围的浓度，我说那样是不行的。因为在做分析计算时又恰恰用了线性关系来计算，结果肯定是值得怀疑，结果是不能令人肯定的！（这是经验总结） 范围：指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高、低限浓度或量的区间。范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。 •原料药和制剂含量测定范围为80%-120%；制剂含量均匀度范围为70%-130%；杂质测定应为被测杂质汇报值到限度的120%；溶出度应为测定范围的±20%，如规定了限度范围，应为下限的-20%至上限的+20%，例如缓释片1h<20%,7h>70%,则验证范围定为0-90%。 耐用性：指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度;如果方法易受到分析条件的影响，或要求苛刻，应注明。典型的变动包括：分析溶液的稳定性，提取时间等。 药物分析的方法学验证所要做到的事项（二）   含量测定方法验证的接收标准 •容量分析法：用原料药精制品(含量>99.5％)或对照品考察方法的精密度，相对标准差一般应不大于0.2％；进行回收率试验。回收率一般在99.7～100.3％之间 •UV法：用适当浓度的精制品进行测定，其RSD一般不大于1％。制剂的测定，回收率一般应在98％～102％之间；线性：吸光度A一般在0.2～0.7，浓度点n＝5。用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，r应达到0.9999(n＝5)，方程的截距应近于零含量测定方法验证的接收标准 •HPLC法： •要求RSD<2％，回收率98％～102％之间。 •线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点n应为5～7，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r应大于0.999，截距应趋于零   分析方法验证步骤： •验证 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 的制订 •验证目的、方法改进背景、 •提供的原料药和产品、仪器概要、试剂、对照品 •待验证的方法，项目，合格标准 •实施人员的培训 •参考文献 •验证的实施 •收集完整的验证过程记录和原始图谱 •复核 •验证报告 •评价该方法是否通过验证 方法确认和方法转移 •对新产品的方法验证通常在产品开发阶段完成；大规模生产后的验证通常包括方法确认和方法转移 •分析方法确认是指当国家标准或药典标准拟变化或已经变化时在本实验室进行的对所涉及产品是否适用的确认实验 •确认之前应对新旧方法进行核对，标明所有变更细节 •检验样品的信息（批号、规格),变更项目的接收标准 •确认试验的样品通常包括正常产品、稳定性产品 •方法转移指检验方法由转移方转移至接收方时进行的实验。 •流动相PH（±0.5) •流动相组成(有机相±5%） •色谱柱（同一厂家的三个批号，或两个不同厂家（同固定相和填充物，尺寸） •温度（20-25C)和流速(±10%） •检测波长(±5nm) 检验项目和验证内容总结 •鉴别试验除专属性、耐用性外，其它都不要求。 •杂质的限度检查除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求 •杂质的定量测定除检测限外，其它都要求。 •含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求 如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化   漂移现象 1．温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定 2．流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等 3．柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡 快速变化现象 1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定 2．泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。 3．流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合 色谱工作者应具备的良好习惯   1、按仪器 说明书 房屋状态说明书下载罗氏说明书下载焊机说明书下载罗氏说明书下载GGD说明书下载 的规程操作     验收仪器时，不仅要清点所有零部件是否齐全，还要检查仪器说明书是否齐备，并妥善保存这些 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 。在独立操作仪器之前，一定要认真阅读有关说明书，并严格按规程操作。这是做好仪器分析的前提条件，而且一旦仪器出了问题，也好与厂商交涉。   2、准备一份色谱柱测试标样     色谱柱性能是保证分析结果的关键。新买的色谱柱，首先要用测试样品评价其性能。如果用色谱柱厂商提供的测试条件测试而结果不合格时，就可要求退货或换货。更重要的是，此后的使用过程中色谱柱性能会变化，当分析结果有问题时，可以用测试标样测试色谱柱，并将结果与前一次测试结果相比较，这有助于确定问题是否出在色谱柱，以便于采取相应的措施排除故障。   3、及时更换色谱柱密封垫     石墨密封垫漏气是GC最常见的故障之一。一定不要在不同的柱上重复使用同一密封垫，即使同一根柱卸下重新安装时，最好也要换新密封垫，这样能保证更高的工作效率。如果装上色谱柱后发现漏气而再更换密封垫，就要花费更多的时间，即使旧垫仍能使用，也要比原来多拧紧一些，弄得不好就会拧断毛细管色谱柱。   4、使用纯度合乎要求的载气     载气一定要用高纯级的，以避免干扰分析和污染色谱柱或检测器。要知道一根色谱柱的价格是一瓶高纯氮气或氢气价格的20倍以上。如果因为要省钱而用普通气体作载气，可能是丢了西瓜拣了芝麻。检测器用辅助气体最好也用高纯级的。虽然在灵敏度要求不高时，可用普通气体，但其代价可能是检测器被污染。   5、定期更换气体净化器填料     变色硅胶可据颜色变化来判断其性能，但分子筛等吸附有机物的净化器就不好用肉眼判断了。所以须定期更换，最好3个月更换一次。如果硅胶与分子筛装在一起，则更换硅胶时也要更换分子筛。   6、使用性能可靠的气体减压器     新的减压器在使用时一定要试漏，在长期的使用过程中也要经常检漏，这是发现问题的一个好习惯。如果不注意这个问题，轻则造成气体浪费，重则出现安全问题，到时悔之晚矣。   7、定期更换进样衬垫     进样口衬垫漏气是GC常见故障之一。另外，衬垫的老化降解也会给分析带来干扰。比如其碎屑掉进汽化室内也可能导致鬼峰。至于多长时间换一次衬垫，则要看所分析的样品性质和分析条件而定。常规实验室一般每天更换一个进样衬垫。无论如何，一个衬垫的连续使用时间不要超过一周。   8、及时清洗注射器     保持注射器清洁能避免样品记忆效应的干扰。更换样品时要清洗，用同一样品多次进样时也要用样品本身清洗注射器。一支注射器暂时不用时（比如下班），更要彻底清洗，否则残留其中的样品可能将针芯粘牢，造成注射器报废。使用自动进样器的用户也应注意此问题，最好是经常更换和清洗注射器。   9、定期检查并清洗进样衬管     仪器长期使用后，进样衬管内会有焦油状物质，这是样品中的不挥发成分造成的。此外还会有颗粒状物质积存（隔垫碎屑，样品中的固体物质）这些都会干扰分析的正常进行。因此要定期检查，及时清洗。注意，在衬管中填充一些经硅烷化处理的石英玻璃毛，既可提高样品的汽化效率，又能防止隔垫碎屑进入色谱柱造成堵塞。   10、更换零部件要逐一进行     修理仪器时，不要一次更换多个部件，那样会造成故障原因的判断失误。应该一次更换一件，经测试后再更换另一件。这样可能更便于准确地判断故障原因，同时避免不必要的开支。   11、做好仪器使用和分析记录并定期归档     这是仪器的履历，应逐日记录，包括操作者、分析样品及条件、仪器工作状态等等。一旦仪器出现问题，这是查找原因的重要资料。  高效液相色谱法含量测定的感受          做了很长一段时间的药物含量的测定，发现的问题也很多，心里的感想也不少，在此，在我我的私家空间里，我聊以感受，以促进自己的进步。     做药物含量的测定，采用高效液相色谱法，关键在于方法的重现性和重复性。而我们在做检测过程中，由于内、外在因素的影响，很难做到较好的重现性和重复性。比如柱子的柱效降低问题、色谱柱的污染、色谱柱的塌陷、管路的污染和堵塞等，从而引起一系列的仪器的变化因素，造成对测量结果的准确度和精确度的影响。    由于不是专人做液相，所以有些人在使用后，没有去好好的冲洗柱子，造成了柱子和管路的污染的累积。当你去去使用时，你会发现，柱子的柱效一下子下来、上不去了，柱压力也居高不下，从而影响了药物保留时间的不重现，保留时间有时候发生波动和漂移，大多没有冲好柱子的情形的结果是：保留时间发生负向漂移，也就是保留时间慢慢的减小，随即而带来了药物成分峰面积的减小。我在仪器分析的时候，我最强求的是仪器柱子的冲洗工作和保养，但是别人可就不这样做，你不是主管，别人也就不一定听你，有何办法。我不是推卸责任，要是我在管理，我一定会首抓的是仪器的维护和保养的。在企业用仪器检测分析的不足之处是：由于检测结果的急迫需要，所以就在检测时，就不注重色谱柱流动相在柱中的平衡，也是造成药物保留时间波动和漂移的根本原因了。其实保留时间的漂移和波动，也间接说明和暗示了流速的波动的变化的可能性。所有这些均影响色谱数据结果的准确性和精确性。     我特意考察了同种药物浓度的同一溶液，在不同间接时间后进行测定峰面积，发现保留时间负向减小时，其峰面积均减小的结论。所以以此来检测时，结果误差在0.5%左右，不能正确和较好的接近真实结果。对于这种情形：大多数企业要求你教快得到分析结果的数据，你一般是先进对照品溶液，平行称量两份药品，各进三针，然后是再进待测品溶液，也是平行称量两份药品，各进两针。这样的话，势必是先测的对照品峰面积偏大，而后测的待试品溶液的峰面积小，从而引起测量结果的数据偏小。我想：在柱子不好的情形下，但是还可满足或没有好柱子而不得不检测下的情形,那就讲求检测的技巧了,我认为:最好先进待试品溶液,中间再进对照品溶液,相对来说,可以减少误差的大小.是不是最好方法中的好方法了.     事情的发展还是应该做到能避免的尽量避免之,那就要求我们在实验中,要注重仪器的保养和维护了,这是最有效的方法了.每天要养成良好的习惯,不管你有多忙,冲洗柱子不可少,不能敷衍了事.试剂过滤器和管路过滤器要定期用异丙醇或10%的硝酸溶液清洗;实验完后,特别是含盐流动相的,要先用10%的甲醇水溶液清洗,至少40分钟以上,再用纯甲醇冲洗30分钟以上.这样才对你第二天的实验有所保证的,切记!   柱压不稳定的可能因素          我们在进行高效液相色谱分析时，最常常碰到的现象就是：色谱柱压的不停的上下波动的现象，而柱压的不停的上下波动造成的结果就是：一是主峰保留时间也产生不同程度的上下波动，二是主峰的峰面积也不断变化，所以结果是：含量检测结果不准确。     考察色谱柱压不停的上下波动的现象的原因可能有多种，可能是色谱仪器泵的本身泵压不稳定；也可能是排压阀的密封圈破损，引起些微的密封不严实；也可能管路的杂质部分堵塞；也可能是流动相还没有完全平衡；或者是柱温的波动等。    所以在考察柱压波动时，可以综合以上因素，进行各个排除 更换流动相的最佳方法       在做高效液相色谱分析时，最常碰到的事情：就是要换流动相和水或有机熔剂，在更换流动相和水或有机熔剂时，你是怎么做的呢？     我的经验就是：（反相色谱柱）在试验前，我首先是（1）排上次冲柱子管道中的有机溶剂，让有机溶剂和气泡从排液管排出，再冲10%甲醇水，冲足甲醇水达到基线平衡后，换流动相，再打开排液阀，排出管道中甲醇水，关闭排液阀门，让流动相冲至基线平衡。（2）实验完毕后，移走流动相，换上10%甲醇水，打开排液阀，排出管道中的流动相，冲10%甲醇水近1小时，再换上色谱甲醇，打开排液阀，排出10%甲醇水，再冲色谱甲醇40分钟。     我上面那样做的目的是，能让管道中的流动相尽快替换，节约交换时间，达到快速平衡和排液，提高了工作效率！更容易达到系统平衡，最大优点是：可防止试验中色谱系统的漂移，特别是药物保留时间的漂移！