■光学显微镜结构
普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。
◆机械部分
(1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。
(2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。
(3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。
(4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
(5)物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。转换物镜后,不允许使用粗调节器,只能用细准焦螺旋,使像清晰。
(6)载物台:放玻片标本的地方。中央有通光孔,两旁各有一个压片夹,用于固定所观察的物体。。
(7)调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。
①粗调节器(粗准焦螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。
②细调节器(细准焦螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。
(8)、倾斜关节:镜柱和镜臂交界处有一个能活动的关节。它可以使显微镜在一定的范围内后倾(一般倾斜不得超过45°)便于观察。但是在使用临时封片观察时,禁止使用倾斜关节,尤其是装片内含酸性试剂时严禁使用,以免污损镜体。
◆照明部分
装在镜台下方,包括反光镜,遮光器。
(1)反光镜:可以转动,使光线通过通光孔反射上来。其两面是不同的:
平面镜:反射的光线较弱,当光线过强需要弱光时使用;
凹面镜:反射的光线较强,当光线过弱需要强光时使用;
(2)遮光器:上面有大小不等的圆孔,叫光圈。每个光圈都可以对准通光孔。光圈用来调节光线的强弱,大光圈:光线强,视野亮,当光线过弱需要强光时使用。小光圈:光线弱,视野暗,当光线过强需要弱光时使用。
一般情况下,光圈和反光镜配合使用,以确保所需要的最佳光线。光线强用小光圈和平面镜;光线弱用大光圈和凹面镜。
◆光学部分
(1)目镜:装在镜筒的上端(直插式),通常备有2-3个,上面刻有5×、10×或15×符号以
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示其放大倍数,长度和放大倍数成反比。
(2)物镜:装在镜筒下端的旋转器上(螺旋),一般有3-4个物镜,长度和放大倍数成正比。最短的刻有“10×”符号的为低倍镜,较长的刻有“40×”符号的为高倍镜,最长的刻有“100×”符号的为油镜。
(3)各类镜头特征比较
镜头种类
有无螺纹
长度
放大倍数
视野大小、明暗
物镜
有
长
大
小而暗
短
小
大而亮
目镜
无
长
小
大而亮
短
大
小而暗
(二)显微镜的使用方法
1.取镜和安放:
①右手握镜臂,左手握镜座;
②把显微镜置与实验台上,略扁左,距桌边2cm便于观察和绘图,装好镜头。
2.对光:
(1)转动转换器,使低倍物镜对准通光孔;
(2)选一较大的光圈对准通光孔,左眼注视目镜,右眼同时睁开。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内,通过目镜,可以看到白亮的视野。
3.低倍镜观察:
(1)把要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本正对通光孔的中心;
(2)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛从侧面看着物镜镜头与标本之间,防止两者相撞);
(3)左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋,使镜筒上升,直到看到物像为止,再稍稍转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
4.使用高倍镜观察的步骤:
(1)低倍镜观察(先对光,后调焦)(2)移动玻片,将要放大的物像移到视野正中央
(3)转动转换器,移走低倍物镜,换上高倍物镜(4)调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜
(5)转动细准焦螺旋,使物像清晰
5、使用后的整理
观察结束,应先将镜筒升高,再取下切片,然后转动转换器,使物镜与通光孔错开,做好清洁工作。清洁完毕,再下降镜筒,使两个物镜位于载物台上通光孔的两侧,呈“八”字形,将反光镜转至与载物台垂直,罩上防尘罩,仍用右手握住镜臂,左手平托镜座,按号放回镜箱中。
【注意事项】
■持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方。
■轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,以免碰翻落地。
■保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,机械部分用布擦拭。
■水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即擦净。
■放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。
■要养成两眼同时睁开的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图。
■不要随意取下目镜,以防止尘土落入物镜,也不要任意拆卸各种零件,以防损坏。使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内。最后填写使用登记表。
■调节粗准焦螺旋使镜筒下降时,双眼要注视物镜与玻片之间的距离,到快接近(约0.5cm)时或者粗准焦螺旋不能再向下转动为止时停止下降
■使用高倍镜观察时,不能转动粗准焦螺旋:
1.显微镜的放大倍数等于目镜的放大倍数与物镜的放大倍数的乘积。放大倍数指的物体的宽度和长度的放大倍数,而不是面积和体积的放大倍数。
例1.一个细小物体若被放大50倍,这里“被放大50倍”是指该细小物体的( )
A.体积B.表面积 C.像的面积 D.长度或宽度
答案:D
例2.如果使用10倍的目镜和10倍的物镜在视野中央观察到一个细胞,在只换40倍物镜的情况下,该细胞的物象比原先观察到的细胞直径放大了( )
A.4倍 B.16倍 C.100倍 D.400倍
答案:A
2.掌握目镜和物镜的结构特点以及镜头长短与放大倍数之间的关系。
目镜是无螺纹的,物镜是有螺纹的;镜头长度与放大倍数的关系:目镜的长度与放大倍数成反比,物镜的长度与放大倍数成正比;物镜越长与装片之间的距离就越短,物镜越短与装片之间的距离就越长。
例1.有一架光学显微镜的镜盒内有2个镜头,甲的一端有螺纹,乙无螺纹,甲乙分别为( )
A.目镜、物镜 B.物镜、目镜 C.均为物镜 D.均为目镜
答案:B
例2.显微镜头盒中的4个镜头。甲、乙镜头一端有螺纹,丙、丁皆无螺纹。甲镜头长3厘米,乙镜头长5厘米,丙镜头长3厘米,丁镜头长6厘米。请问:使用上述镜头观察某装片,观察清楚时物镜与装片之间距离最近的是 ;在同样的光源条件下,视野中光线最暗的一组镜头是 。
解析:根据显微镜的结构可知,甲、乙镜头一端有螺纹为物镜,丙、丁无螺纹为目镜。物镜越长,放大倍数越大,工作距离越短,即与装片之间的距离越近。目镜越短,放大倍数越大。在同样光源条件下,显微镜的放大倍数越大,视野中光线越暗。
答案:乙;乙和丙。
3.显微镜成像的特点:
(1)显微镜下成倒像(上下左右同时颠倒)。成像原理图解如下:
光线→反光镜→遮光器→通光孔→标本(一定要透明)→物镜的透镜(第一次放大成倒立实像)→镜筒→目镜(再放大成虚像)→眼
(2)物像移动与装片移动的关系:由于显微镜下成的像是倒立的像,所以物像移动的方向与载玻片移动的方向是相反的。举例:物像在视野右下方,仍向右下方移动玻片标本,物像移到视野中央。
(3)低倍镜、高倍镜下成像特点:
镜头长度
工作距离
视野亮度
视野范围
细胞大小
细胞数目
低倍物镜
短
远
亮
大
小
多
高倍物镜
长
近
暗
小
大
少
例1.如果在载玻片上写一个“b”,那么在视野中看到的是( )
A.b B.d C. p D.q
答案:D
例2.在显微镜的低倍镜下看到一个细胞偏向左上方,在换高倍镜观察前应该把该细胞移到视野中央,具体说法是( )
A.向左上方移动载玻片B.向右上方移动载玻片
C.向左下方移动载玻片D.向右下方移动载玻片
答案:A
例3.将低倍镜换成高倍镜后,一个视野内( )
A.细胞数目增多,体积变大,视野变暗,视野变小
B.细胞数目减少,体积变小,视野变暗,视野变大
C.细胞数目增多,体积变小,视野变亮,视野变大
D.细胞数目减少,体积变大,视野变暗,视野变小
答案:D
4. 视野亮度的调节:光线强时,用小光圈、平面镜调节;光线弱时,用大光圈、凹面镜调节。
例1. 在光照明亮的教室里,用显微镜观察植物细胞时,在显微镜视野中能够清晰看到细胞壁,但看不清内容物。为便于观察此时应( )
A.改用凹面反光镜、放大光圈 B.改用凹面反光镜、缩小光圈
C.改用平面反光镜、放大光圈 D.改用平面反光镜、缩小光圈
答案:D
5. 放大倍数的变化与视野中细胞数量变化的关系。
第一种情况:一行细胞数量的变化,可根据放大倍数与视野成反比的规律计算。
第二种情况:圆形视野范围内细胞数量的变化,可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。
例1.当显微镜的目镜为10X、物镜为10X时,在视野直径范围内看到一行相连的8个细胞。若目镜不变,物镜换成40X时,则在视野中可看到这行细胞中的( )
A.2个 B.4个 C.16个 D.32个
答案:A
例2.当显微镜的目镜为10X、物镜为10X时,在视野中被相连的64个分生组织细胞所充满,若目镜不变,物镜换成40X时,则在视野中可看到分生组织细胞中的( )
A.2个 B.4个 C.8个 D.16个
答案:B
6.分析视野中的污点的位置
玻片移,污点移,则污点在玻片上;
物镜换,污点移,则污点在物镜上;
目镜转,污点移,则污点在目镜上。
例1.某同学用显微镜观察玻片标本时,发现视野中有污物存在,移动玻片时污物不动;换上高倍物镜,污物仍存在。那么污物在( )
A.玻片上 B.物镜上 C.目镜上 D.反光镜上
答案:C
练习
1下面是用显微镜观察时的几个操作步骤,要把显微镜视野下的标本从下图中的A转为B,其正确的操作步骤是( A )
①移动玻片标本 ②调节光圈和反光镜 ③转动转换器 ④转动细准焦螺旋 ⑤转动粗准焦螺旋
A.①③②④
B.②③④⑤
C.④③①⑤
D.③②⑤④
2用显微镜观察一个细小物体时,这个细小物体若被放大100倍,这里“被放大100倍”是指细小物体的( C)
A.表面积
B.体积
C.长度或宽度
D.像的面积
3显微镜的视野中央出现一污点,移动装片和目镜,污点均不动,则污点可能在( D )
A.装片上
B.反光镜上
C.目镜上
D.物镜上
4 如图2.1-2所示,A、B为物镜,C、D为目镜,E、F为物镜与标本间的距离。欲获得最大放大倍数的效果,其正确的组合是( C )
图2.1-2
A.A、C、E
B.B、D、F
C.B、C、E
D.B、D、E
5 要将视野左上方的物像移到视野中央,则推移装片的方向是 ( D )
A、右下方 B、右上方 C、左下方 D、左上方
6. 右图是用显微镜观察植物细胞的叶绿体和细胞质流动实验中的两个视野,要把视野中的物像从甲图转为乙图,下列操作步骤中必须要做的是( D )
1 转动粗准焦螺旋②重新对光③移动装片
④换另一个装片⑤转动转换器
A. ③② B. ④②
C. ①⑤ D. ③⑤ (甲) (乙)
7. 如右图所示,某学生在一个视野中看到了一行细胞。此时显微镜镜头的读数是10和10,如果将镜头换成10和50,那么在一个视野中可以看到的细胞数目是(B)
A、1个 B、2个
C、4个 D、50个