HPLC测定阿折地平及其制剂的含量和有关物质

华西药学杂志 W C J # P S 2006, 21( 6): 581~ 582 作者简介:安华民 ( 1951- ) ,男,河南郑州,副主任药师,从事食品药品的检验工作。 HPLC测定阿折地平及其制剂的含量和有关物质 安华民,王巨才 (河南省食品药品检验所, 河南 郑州 450003) 摘要: 目的 测定阿折地平、阿折地平片及胶囊的含量和有关物质。方法 采用 HPLC法,用 D iamonsilTM C18色谱柱 ( 250 mm @ 4. 6 mm, 5 Lm );流动相为乙腈 - 10 mm o l# L- 1磷酸二氢铵溶液 (三乙胺调 pH 6. 5) ( 82z 18); 流速 1. 0 m l#m in- 1;检测波长 254 nm; 柱温 30e ;进样 20L l。结果 阿折地平与其相邻杂质峰能完全分离; 在 16. 84~ 336. 80Lg# m l- 1范围内,其线性关系良好 ( r2 = 0. 9999)。结论 所用方法简便、准确、专属性好, 可作为阿折地平及其片剂和胶囊剂的含量测定及有关物质的检查。 关键词: 阿折地平片剂; 胶囊剂; 高效液相色谱法; 有关物质 中图分类号: R927 文献标识码: A 文章编号: 1006- 0103( 2006) 06- 0581- 02 Determ ination of content and related substances of A zeln idip ine by HPLC AN Hua- m in, WANG Ju- cai (H enan Institute for Food and Drug Contro l, Zhengzhou 450003, China) Abstrac t: OBJECTIVE To establish an H PLC m e thod for dete rm ina tion of content and re lated substances in A ze lnidip ine tablets and capsu les. METHODS TheHPLC system consisted o f aD iamonsilTM C18 co lum n ( 250 mm @ 4. 6 mm, 5Lm ), am ixture o f aceto- n itrile and so lution o f ammon ium dihydrogen phospha te ( 10 mmo l# L- 1, adjusting pH to 6. 5 w ith tr iethy lam ine) ( 82z 18) as mob ile phase; The flow rate w as 1. 0 m l#m in- 1. The de tection w avelength w as se t at 254 nm. The co lum n tem peraturew as 30e . RESULTS A zelnidip ine cou ld be comp le tely separa ted from o ther im pur ities. The linea r range o f A ze ln id ip ine was 16. 84 - 336. 80 Lg# m l- 1 ( r2 = 0. 9999). CONCLU SION Them ethod is sim ple, accurate. It is su itab le fo r determ ination of con tent and related substances in A zelnidip ine tablets and capsules. K ey words: A ze ln idipine tab le ts; Capsu les; H PLC; Re la ted substance CLC num ber: R927 D ocum ent code: A Art ic le ID: 1006- 0103( 2006) 06- 0581- 02 阿折地平 ( A ze ln id ip ine)为抗高血压的新药,属 1, 4-二氢吡啶钙拮抗剂,可有效地抑制细胞外钙离 子的内流,松弛平滑肌而舒张血管, 起降压作用 [ 1 ]。 为控制产品的质量, 特建立了 HPLC法测定阿折地 平原料、片剂及胶囊剂的含量和有关物质。 1 实验部分 111 仪器与试剂 1100系列高效液相色谱仪 (安捷仑科技公司 )。 阿折地平及其制剂 (河南昊宁制药有限公司 ) ; 阿折 地平对照品 (含量为 9919% )系原料精制而得。乙 腈为色谱纯;其余试剂为分析纯。 112 方法与结果 1. 2. 1 色谱条件 色谱柱为 D iamonsilTM C18柱 ( 250 mm @ 4. 6 mm, 5 Lm ), 流动相为乙腈 - 10 mmo l# L- 1 磷酸二氢铵溶液 (三乙胺调 pH6. 5) ( 82z 18) ;流速 1. 0m l#m in- 1;检测波长 254 nm;柱温 30e ;进样量 20 Ll。理论板数按阿折地平峰计应不低于 2 @ 103,阿折 地平与相邻峰的分离度应符合《中国药典》的要求。 1. 2. 2 方法的专属性 按照一般有关物质的检查 方法 [ 2] ,分别将阿折地平进行酸、碱、氧化、加热和 光照射等降解处理,同时按处方比例配制片剂空白 辅料,分别考察降解产物和辅料的干扰。结果表明, 酸、碱、氧化、加热破坏和光破坏后的阿折地平均产 生了多个明显的杂质峰,均能与主成分很好分离,空 白辅料不干扰测定 (图 1)。 1. 2. 3 线性关系的考察 精密称取阿折地平对照 品适量, 加流动相制成含阿折地平 16. 84、84. 20、 168. 40、252. 60、336. 80 Lg#m l- 1的溶液。照 / 1. 2. 10项条件测定, 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 色谱图。以阿折地平浓度对峰 面积进行回归, 得回归方程为: A = 26109C - 4132 ( r 2 = 019999),线性范围为 16184~ 336180 Lg#m l- 1。 1. 2. 4 回收率实验 取处方比例量的辅料, 按标示 量的 80%、100%、120%定量加入阿折地平对照品, 混匀后加流动相溶解并稀释至 50 m ,l摇匀, 滤过。 取续滤液 20 L l进样,记录色谱图,用外标法计算回 收率 (表 1)。 图 1 空白辅料 ( A)、对照品 ( B)、阿折地平片 ( C)和酸破坏 (D )溶液的色谱图 F ig 1 Chrom a tog ram s of excipients so lution( A ), contro l solution( B), A zelnid ipine tablet so lution( C) and acid decomposition so lution( D) 表 1 阿折地平制剂的回收率 (Lg#m l- 1, n= 3 ) Table 1 Recovery test o f Azelnidipine(Lg#m l- 1, n = 3 ) Preparat ion Added Detected Recovery /% X /% RSD /% T ablets 126. 2 128. 1 101. 5 100. 7 0. 75 126. 4 127. 6 100. 9 157. 8 158. 1 100. 2 158. 2 157. 4 99. 5 189. 2 191. 7 101. 3 189. 8 191. 1 100. 7 C apsu les 116. 0 117. 7 101. 5 100. 9 0. 78 111. 6 113. 2 101. 5 145. 0 146. 1 100. 7 139. 6 138. 8 99. 4 175. 0 176. 9 101. 1 167. 6 169. 7 101. 3 1. 2. 5 重复性实验 取同一批号的样品, 按 / 112190项方法平行制备 5份供试品溶液, 用 / 112110项下的色谱条件测定供试品溶液中阿折地 平的含量,结果分别为 100. 6%、100. 1%、100. 9%、 9915%、100. 5% ,平均含量 100. 3%, RSD = 0. 54% ( n = 5)。结果表明方法的重复性良好。 1. 2. 6 精密度实验 取 / 1. 2. 30项下的 3号溶液, 连续进样 6次, 平均峰面积为 4. 445 @ 103, RSD = 0112% ( n = 6)。 1. 2. 7 稳定性实验 取 / 112130项下 4号溶液, 分 别在 0、2、4、6、10 h进样 4次。平均峰面积为 41448 @ 10 3 , RSD = 0108% ( n= 5)。 1. 2. 8 检出限的考察 精密量取 / 112130项下的 1 号溶液 0. 1 m l置 10 m l量瓶中, 加流动相定容, 摇 匀。分别进样 2. 0、1. 0、0. 5、0. 1 L,l当进样 0. 1 Ll 时, S /N = 3,计算得检出限 0. 17 ng。 1. 2. 9 含量的测定与有关物质的检查 取样品细 粉或胶囊内容物适量 (约相当于阿折地平 8mg) ,置 100m l量瓶中,用流动相溶解并定容,摇匀。作为供 试品溶液。取 20 Ll进样, 记录色谱图。另取阿折 地平对照品适量, 用流动相溶解并稀释制成 8010 Lg#m l- 1的溶液, 同法测定。按外标法以峰面积计 算即得含量。精密称取样品细粉或胶囊内容物适量 (约相当于阿折地平 12 mg ), 用流动相稀释成含阿 折地平 12010 Lg#m l- 1的溶液作为供试品溶液;精密 量取供试品溶液适量,用流动相稀释成含阿折地平 1. 2 Lg#m l- 1的溶液, 作为对照溶液。取对照溶液 10 Ll进样,调节检测灵敏度, 使阿折地平峰高约为 满量程的 10% ~ 25%。再分别取供试品溶液和对 照溶液各 20 L ,l分别进样, 记录色谱图至阿折地平 峰保留时间的 2倍。除溶剂峰外, 供试品溶液如显 杂质峰,各峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积 的 1. 5倍 ( 1. 5% )。含量及有关物质的测定结果 见表 2。 表 2 阿折地平的含量及有关物质的测定结果 Table 2 Content and related substances in A zelnidipine and Azeln-i dipine tablets and capsules S amp le Batch No. Related substan ces /% C onten ts /% * Azeln id ip ine 040316 0. 35 99. 6 040317 0. 46 99. 8 040318 0. 39 99. 9 Azeln id ip ine tab lets 040416 0. 53 100. 4 040417 0. 67 100. 5 040418 0. 49 100. 1 Azeln id ip ine Cap su les 040419 0. 48 100. 7 040420 0. 55 100. 2 040421 0. 64 100. 8 * 原料药的含量为按干燥品计的百分含量;制剂的含量为含阿折地 平标示量的百分含量 2 讨论 阿折地平及其相关杂质均在 254 nm处有较强 吸收,既可测定阿折地平的含量, 又可有效检出共存 的相关杂质,故选择 254 nm作为检测波长。用阿折 地平粗品对流动相比例进行筛选, 当乙腈和水的比 例为 82z 18时, 杂质与阿折地平分离最好,故选择此 比例作为流动相。 参考文献: [ 1] 肖艳萍,孙忠实.钙通道阻滞剂的临床应用评价 [ J]. 中国医 院用药评价与分析杂志, 2003, 3( 1 ): 11- 14. [ 2] 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典 [ S] .二部.北京: 化学工业出版社, 2005.附录ⅩⅨ. 收稿日期: 2005- 11 582 华 西 药 学 杂 志 第 21卷