第四章实验动物的育种繁殖

第四章实验动物的育种繁殖第一节实验动物育种繁殖基本技术第二节近交系动物的育种繁殖第三节封闭群动物的育种繁殖第四节杂种一代和重组近交系的育种繁殖第五节携带特定基因品系的育种繁殖转基因动物培育技术克隆动物培育技术实验动物繁殖：根据遗传学原理有目的地改变实验动物遗传组成的过程。采取能保持遗传稳定性的特定的配种和交配方法，繁衍实验动物后代的过程。实验动物育种：第一节实验动物育种繁殖基本技术一、遗传性状的判断二、群体的遗传组成定三、定向选择四、繁殖方法五、性别鉴定六、性成熟与配种年龄七、动情周期与发情鉴定八、配种方法与交配识别九、妊娠诊断与妊娠期遗传性状：生物体能世代相传的形态特征、生理特征、代谢类型、行为本能等。质量性状：数量性状：指明显的不连续变异的性状，如毛色。通常由一对等位基因控制。指连续的界限不清楚的性状，如体重。受微效多基因控制。一、遗传性状的判断1、质量性状的判断通过杂交、互交、回交、纯交等方法，按孟德尔遗传定律来分析判断。通过繁殖 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 的数据，按孟德尔遗传定律来分析判断。杂交试验判定法：繁殖记录法：杂交：不同纯合子之间的交配。如AA×aa。互交：杂合子之间的交配。如Aa×Aa。回交：杂合子与纯合子之间的交配。如Aa×AA，Aa×aa。纯交：相同纯合子之间的交配。如AA×AA，aa×aa。杂交试验判断小鼠白内障基因1只白内障小鼠（?）113只白内障小鼠1只正常小鼠332只白内障小鼠115只正常小鼠34只白内障小鼠36只正常小鼠3：1的分离比1：1的分离比父母基因型可能为Aa显性3：基因型可能为A-隐性1：基因型可能为aa父母基因型可能为Aa和aa显性1：基因型可能为A-隐性1：基因型可能为aa隐性(aa)显性(AA)（Aa）（aa）（Aa）（aa）(AA)(Aa)（aa）1只正常小鼠（?）2、数量性状的判断通过遗传力分析来判断数量性状的遗传性。遗传力：指遗传因素的影响在整个表型中所占的比例，即遗传方差对表型方差的比值，用百分数表示。h2=VGVPVP=VG+VE二、群体的遗传组成定1、基因频率、基因型频率和表型频率假设100个个体的群体中基因频率、基因型频率和表型频率表型基因型基因显性隐性AAAaaaAa数量901030601012080频率0.90.10.30.60.10.60.4在一个无限大的群体中，如果没有近交、突变、迁移等因素的作用，则群体的基因（型）频率保持不变。即(p+q)2=p2+2pq+q2=12、Hardy-Weinberg定律三、定向选择定向选择：按照培育目标有计划地选择某种（些）特殊性状的个体作为亲本的过程。以个体为单位，从群体中选择最满意的个体。以家系为单位，按家系平均表型值高低顺序选择。根据个体表型值和家系平均表型值，分别从不同家系中选择。家系内选择：个体选择：家系选择：五个家系个体表型值分析随机繁殖：即近亲交配，指血缘关系极为相近的个体之间或遗传组成极相似的个体之间进行的交配繁殖。常有全同胞兄妹交配、父女或母子交配、堂兄妹交配等。用于近交系育种繁殖。两个不同的近交系品系之间进行的交配。用于杂种一代育种繁殖。近亲繁殖：异系杂交：群体中每个个体都有同样的机会同另一性别中的任何一个个体进行交配（即随机进行的交配）。用于封闭群育种繁殖。四、繁殖方法近交系数：某群体动物由于近交而造成等位基因纯合的比率。Fn=1-(1-△F)nn为近交代数△F=19%血缘系数：群体中个体之间基因组成的相似程度。Fab=近交衰退：由于近交而造成保持正常生物适合度的基因组合受到不同程度的破坏，出现了某些不利的性状效应。如生活力、生殖力降低等。五、性别鉴定大、小鼠（离乳仔鼠）：①雄鼠的生殖器距肛门较远，雌鼠较近。②雄鼠的生殖器与肛门之间长毛。③雄鼠的生殖器突起较雌鼠大。④雌鼠乳头较雄鼠明显。豚鼠：雌性阴蒂小，可见阴道口；雄性有阴茎小隆起，无阴道口，但可见龟头。FemaleMale仔兔：雄性肛门距尿道口较远；雌性尿道口与肛门等大，雄性大于肛门；雄性生殖孔呈园形，雌性呈Y形且裂缝及于肛门。六、性成熟与配种年龄七、动情周期与发情鉴定动情周期：哺乳动物性成熟后，卵巢、子宫、阴道等出现周期性的变化，动物表现周期性的动情现象。动情周期动情前期动情期动情后期动情间期（休情期）小鼠动情周期生殖器官变化动情阶段阴道分泌物涂片子宫卵巢和输卵管外阴部变化动情前期(10hr)大量有核上皮细胞、少量角化上皮细胞充血和膨胀增大，上皮细胞有丝分裂旺盛，少量白细胞卵泡增大并膨胀，有相当多的液体，在生发上皮和卵泡细胞内有少数的有丝分裂阴门开口，初期阴门肿胀，不久变白、枯燥动情期(42hr)视野布满角化上皮细胞，少量有核上皮细胞在发情期膨胀与活动性达到最大限度，然后下降，无白细胞排卵，随后输卵管上端膨胀，在生长上皮和卵泡细胞内有丝分裂旺盛阴门呈白色、枯燥，交配旺期动情后期(12hr)角化上皮细胞及白细胞膨胀下降，上皮内有白细胞、壁萎缩，上皮退化，罕见有丝分裂卵泡发生闭锁，生成黄体，卵在输卵管内。在生发上皮及卵泡细胞内少数有丝分裂个别鼠排出乳白色分泌物动情间期(48hr-72hr)大量白细胞及少量粘液外观苍白，壁萎缩。上皮正常，但含有许多白细胞。子宫腺体有一些分泌物卵泡开始迅速生长，黄体退化阴门变小，阴道壁变薄产（孕）后发情：产后不久出现发情且能接受交配的现象。产后妊娠：边哺乳边怀孕。八、配种方法与交配识别实验动物配种方法两种配种方式：长期同居与定期同居三种配比方式：一雌一雄、多雌一雄和多雌多雄定期同居法交配时间：小鼠、大鼠、地鼠在动情前期交配。豚鼠、兔、犬在动情期交配。兔在动情期交配后10-12h再复配1次。交配判断：常用的方法是阴道涂片。大鼠、小鼠可检查阴道栓。阴道栓妊娠诊断摸胎法：触摸腹部，感受子宫有无胎儿。用于兔等。阴道涂片法：阴道冲洗液涂片镜检看动情期是否消失。用于大鼠、小鼠等。外形观察法：观察腹部是否膨大，体重是否增加。用于大鼠、小鼠等。直肠检查法：手插入直肠触摸子宫胎儿。用于猪等。九、妊娠诊断与妊娠期第二节近交系动物的育种繁殖一、育种方法二、保种方法三、繁殖生产方法一、育种方法初始动物：按定向选择方法从封闭群或近交系中选择1对或多对全同胞兄妹，均具有育种性状。交配方式：常采用全同胞兄妹交配（近交）。配种：雌雄1：1长期同居。育种代数：连续近交20代以上。注意：①系谱记录、繁殖记录。②个体选择。③防止断种。全同胞兄妹交配培育近交系图解F0○—○○○—○○○○—○○○○—○○○○○○○—○○—○○—○○—○○○○○○—○○○○○○○—○○○—○○○—○○○—○○○○○—○○○○○○F1F2F3F20缺一性别断种缺一性别单个（C）和多个（A）近交系的培育二、保种方法做好以下几点：1、在较小的群体中保种（通常小于30对）2、保持详细的系谱记录和繁殖记录3、经常进行遗传监测原则：保持动物的同基因性和基因的纯合性保种方法：全同胞兄妹交配繁殖或亲子交配近交系保种应注意：①、已育成的近交系保种时，群体内必须严格按照全同胞交配方法交配，不得已的情况下可采用亲子交配，但不能计入近交代数。②、已育成的近交系务必注意不能与其他品系进行杂交。③、为了保持品系内遗传一致性，在近交系保种过程中不许产生更多的亚系，为此，多半采用单线方式或优选法。④、实验动物的近交系是通过极度的近亲交配而培育的，多半繁殖力低。所以必须选择繁殖力高的家系，淘汰繁殖力低的家系。⑤、对动物个体应进行记录和建立系谱。A近交系动物繁殖生产的交通信号灯方(TrafficlightsystemLane-Petter1961)三、繁殖生产方法保种方法随机交配1-4代近交1-2代近交1-4代ABCD“A”基础群(白色标记)，“B”血缘扩大群（绿色标记）“C”扩大群（黄色标记），“D“生产群（红色标记）第三节封闭群动物育种繁殖一、育种方法二、保种方法三、繁殖生产方法一、育种方法育种原理：根据Hardy-Weinberg定律，保持群体基因频率稳定。初始群体来源：较高程度的基因杂合性和具有目标性状的个体组成。有效群体大小：雌雄个体不少于25对。交配方法：随机交配繁殖。培育代数：4代以上。注意：隔离，选择。二、保种方法最大限度避免近交：♂10-25只。循环交配：♂26-100只。随机交配：按随机表编号，随机配对，♂100只以上。最大限度避免近交循环交配三、大量繁殖生产方法基础群(按保种方法繁殖)繁殖群(随机交配繁殖)保种群实验鼠1:1-3长期同居法(或定期同居法)第四节杂种一代和重组近交系的育种繁殖一、杂种一代的育种繁殖二、重组近交系的育种繁殖一、杂种一代的育种繁殖C57BL/6♀×DBA/2♂↓B6D2F1DBA/2♀×C57BL/6♂↓D2B6F1二、重组近交系的育种繁殖第五节携带特定基因品系的育种繁殖一、突变基因的培育和保持二、同源导入近交系的育种繁殖三、分离近交系的育种繁殖裸鼠的繁殖生产一、突变基因的培育和保持用回交系统培育同源导入近交系（目的基因为常染色体显性或共显性）二、同源导入近交系的育种繁殖用杂交—互交系统培育同源导入近交系（目的基因为常染色体隐性基因）用于分离近交系培育的回交（A）和互交系统（B）三、分离近交系的育种繁殖转基因动物培育技术转基因动物（transgenicanimal）是指以实验方法导入的外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能稳定表达遗传给后代的一类动物。Gordon等人首次成功地将含有HSV(单纯疱疹病毒)和SV40(猴空泡病毒40)DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内，得到了带有这种外源DNA顺序TGM。1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等等大小动物。从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤学、免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研究，基因治疗的开发研究等。转基因动物培育的基本原理根据DNA异源重组的性质，借助分子生物学技术和胚胎工程技术，将外源目的基因在体外扩增和加工，再导入动物的早期胚胎细胞中，使其整合到染色体上，当胚胎被移植到代孕动物的输卵管或子宫中后，发育成携带有外源目的基因的转基因动物。转基因动物是动物基因工程在医学生物学研究中的突出成果。近十年来，为分子遗传学、发育生物学、医学遗传学、肿瘤研究及优良经济动物的开发研究等多方面做出了很大的贡献。1、受精卵雄原核显微注射法2、胚胎干细胞（ES细胞）法3、逆转录病毒感染法4、体细胞核移植法5、精子载体法培育转基因动物的主要方法精子卵细胞受精卵四细胞胚胎囊胚原肠胚转基因动物胚胎干细胞DNADNADNADNA显微注射逆转录病毒感染显微注射逆转录病毒感染或DNA转染或电穿孔一、基因显微注射法培育转基因小鼠的程序母鼠注射PMSG48h结扎公鼠注射HCG↓15d与正常公鼠交配与正常母鼠交配↓↓采集受精卵假孕母鼠↑显微注射↓21d目的基因(DNA)Founder转基因小鼠↓杂交、筛选纯合转基因小鼠同步移植●目的基因的制备与纯化●卵供体母鼠和假孕母鼠的准备●超排卵与取卵●基因显微注射●受精卵移植●目的基因表达整合的鉴定和检测●建系基本步骤显微注射法培育转基因小鼠1．目的基因的制备与纯化目的基因可以来源于：①通过限制性内切酶预先分离的某一基因。②逆转录法得到的cDNA。③人工合成的DNA片段。④聚合酶链式反应(PCR)扩增的特定基因片段。目的基因的克隆可以通过载体方式进行，通常选择质粒作为载体。将目的基因与质粒结合形成重组因子，然后转化至大肠杆菌，扩增质粒，再分离纯化重组质粒DNA，用适当的限制性内切酶消化，制备成线状基因片段备用。目的基因的克隆也可以通过PCR来实现。2．卵供体母鼠和假孕母鼠的准备定期准备相当数量的卵供体母鼠和假孕母鼠以及一批相对稳定的正常公鼠与结扎公鼠。培育转基因鼠所用各类鼠的要求3．超排卵与取卵选择4～6周龄母鼠，注射孕马血清促性腺激素(PMSG)后，隔42～48h再注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)，注射HCG后10～13h剖腹取卵，用培养液保存，置C02培养箱备用。4．基因显微注射用专门的持卵管和注射针，在显微注射仪上操作，将纯化的目的基因(DNA)注射到受精卵的雄性原核内(雄性原核较雌性原核大)。MicroinjectionLaboratory5．受精卵移植转基因受精卵在单细胞至桑椹胚阶段移植到受孕后0．5d的假孕母鼠的输卵管，在囊胚期则移植到受孕后2．5d的假孕母鼠子宫。每只假孕母鼠移植20-30个转基因卵为宜。6．目的基因限达整合的鉴定和检测从假孕母鼠产下的幼鼠尾尖提取DNA，用PCR、Southernblot(DNA印迹)、FISH(荧光原位杂交)等方法在染色体及基因水平上进行整合鉴定；并通过Northernblot(RNA印迹)和Westernblot(蛋白质印迹)等方法在转录及蛋白质水平上进行表达检测。经检测获得阳性Founder小鼠(首建鼠)。7．建系将阳性Founder小鼠与同一品系的正常小鼠交配，检测F1代仔鼠的阳性率，当繁殖到阳性率为50％左右时，即基本上可以判断出外源目的基因为单一位点的整合。经扩大繁殖，从中选择外源目的基因表达效果好、适应性好的转基因小鼠进行近亲繁殖。然后从子代中选择理想的纯合子个体进行全同胞兄妹交配，建立遗传稳定的转基因小鼠近交系。二、逆转录病毒感染培育转基因小鼠构建逆转录病毒载体交配后48h取8细胞胚胎(外源目的基因克隆到载体中)↓逆转录病毒载体转染包装细胞→胚胎转染外源目的基因建系获得转基因小鼠←产仔筛选←胚胎移植假孕母鼠子宫三、胚胎干细胞介导法培育转基因小鼠培育程序分离培育ES细胞→ES细胞基因操作→获取囊胚→ES细胞显微注射到囊胚→胚胎移植→产仔、筛送、建系胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离出来的，能在体外培养的一种高度未分化的多发育潜能的细胞。InjectionofEScellsintoblastocysts将外源DNA与精子一起孵育，精子可捕获外源DNA，并通过受精过程将外源DNA导入受精卵。此法不仅可免去复杂而昂贵的设备，且可省去不少繁杂的操作和条件准备。但该法有些结果不能重复。四、精子载体法外源目的基因整合方式●基因随机插入→转基因小鼠●基因剔除（内源基因定点突变）→基因剔除小鼠●基因替换（内源基因定向重组）→基因替换小鼠方法显微注射核移植胚胎干细胞逆转录病毒基因敲除精子介导优点外源基因整合效率较高，不需要载体，目的基因的长度可达100Kb转基因效率高；预测基因表达水平；可以使用定点整合技术外源DNA的整合率高；整合在生殖细胞中的比例也很高。可在整合点整合转移基因的单个拷贝；该方法简单、方便缺点精密仪器，技术操作较难，易造成宿主动物基因组的插入突变供体细胞易衰老ES细胞株不易建立，长期培养后出现分化现象；生产的转基因动物都是嵌合体插入的基因有大小限度；嵌合性很高；外源DNA在动物各种组织中的分布不均应用具有一定局限性有些结果不能重复转基因动物的应用研究基因的结构和功能及其表达与调控。建立人类疾病动物模型。研究人类疾病基因治疗。研制生物反应器，生产天然活性药物蛋白。主要通过乳腺生产（动物乳腺生物反应器），少数通过肾脏和膀胱。1999年，只有三种产品进入临床实验；到2004年，已经有40多种进入临床实验或即将进入市场。美国红十字会预测：到2010年，转基因动物生产的商品将达到350亿美元的销售额，生产的药物将占整个基因工程药物的90%以上。扩大移植供体来源。改良动物品种。用动物乳腺表达外源基因的主要种类产品类别举列血液产品第8因子、第9因子、C蛋白、凝血酶III、抗胰蛋白酶、血纤蛋白原抗体单克隆抗体药物干扰素、人生长激素、Tpa(组织型纤溶酶原激活剂)、EPO(促红细胞生成素)疫苗Malaria组织胶原Collagen营养药乳白蛋白、乳铁蛋白、溶菌酶、人源牛奶工业蛋白质蜘蛛网蛋白、贝类分泌的黏蛋白我国乳腺生物反应器研究情况目的基因名称产品的主要功能承担单位人血清白蛋白血液溶胀剂中国农业大学人干扰素抗病毒因子中国农业大学鸡法氏囊病毒VP鸡疫苗中国农业大学第九因子血友病治疗上海儿童医院EPO细胞因子上海儿童医院人胰岛素原糖尿病治疗新疆牧科院TPA(血纤维蛋白溶酶原激活剂)治疗血栓军事医学科学院人生长激素生长激素不足扬州大学克隆动物培育技术哺乳动物克隆的主要方法:核移植法：胚胎细胞核移植、体细胞核移植、干细胞核移植等。胚胎分割法。人工单性生殖法：雌核发育、雄核发育。克隆动物是指用人工方法得到无性繁殖的在遗传上与亲本动物完全相同的动物。体细胞核移植法培育克隆绵羊一多莉这是世界上首次用体细胞克隆获得的后代，划时代意义在于证明动物成体细胞核仍具有发育全能性。DollywithhersurrogatemotherDollywithherfirstnewborn,BonnieDollyBorninJuly1996attheRoslinInstituteinScotlandFirstmammaltobeclonedfromanadultmammalusingthenucleartransfertechnique277attemptsweremadebeforetheexperimentwassuccessfulDollydiedinFebruary14,2003ofprogressivelungdiseaseattheageof6;whereasnormalsheepcanliveupto12yearsofage.一、核移植法培育克隆动物的操作程序细胞质受体的准备细胞核供体的准备细胞核移植重组胚的体内或体外培养胚胎移植代孕、产仔1．细胞质受体的准备用去核受精卵、去核2细胞胚、去核卵母细胞为细胞质受体。卵母细胞去核可用化学处理和紫外光灭活染色体的办法，但以显微手术法简便有效。通常借助显微操作仪，将成熟卵母细胞的极体及其下方的少量细胞质(包括卵母细胞中期染色体)吸出。卵母细胞的来源，多采用由卵巢排出或从输卵管回收MⅡ期成熟卵母细胞。2．细胞核供体的准备细胞核供体来源可以是胚胎卵裂球、胚盘细胞系、胎儿成纤维细胞、乳腺细胞等。干细胞(胚胎干细胞)可作为一种良好的细胞核供体。分离囊胚细胞时，采取免疫手术法破坏滋养层吸取内细胞团，再用胰蛋白酶处理获取分散的卵裂球。同样可用胰蛋白酶处理将胚盘分散成单个细胞。绵羊胎儿成纤维细胞的获取办法是，采集妊娠26d龄胎儿组织，用胰蛋白酶处理分散细胞进行培养，用4～6代细胞即可。绵羊乳腺细胞为妊娠3个月的6岁母羊乳腺细胞培养的第3～6代细胞。3．细胞核移植采用仙台病毒和聚乙二醇进行细胞融合，后来多用电融合法。用显微注射法，则将供核细胞移入去核卵母细胞的卵周隙中构成重组胚，然后用电刺激进行细胞融合和用电刺激或化学刺激作激活处理。4．重组胚的体内或体外培养经融合和激活的重组胚移入中间受体作体内或体外培养，观察重组胚的发育率。羊、牛、猪的核移植胚常采用体内培养方法获得桑椹胚和囊胚。羊和牛的重组胚用琼脂包埋后移入休情期的母羊结扎的输卵管中体内培养4～7d，发育至桑椹胚和囊胚。猪的核移植重组胚移入同期化受体母猪输卵管内作体内培养7d，发育为扩张囊胚。大鼠、小鼠和兔的核移植胚多作体外培养，发育至桑椹胚或囊胚。5．胚胎移植按常规方法将体内或体外发育的核移植桑椹胚或囊胚，移植到同种同期化代孕母畜(寄母)的子宫中，待其发育到产仔。二、人工诱导雌核发育技术技术关键：一是使精子的遗传物质失活且保持精子激活卵子发育的能力；二是诱导卵子二倍体形成。使精子遗传物质失活的办法一般是采用辐射处理(如γ线、X射线、紫外线等)。诱导卵子二倍体形成的办法，一是在受精后不久抑制第二极体排出；二是在受精卵第一次卵裂时，抑制有丝分裂。可以用温度(冷休克或热休克)、静水压和化学(秋水仙素、细胞松弛素B等)等方法。在受精过程的原核期中用显微手术操作把雄性原核吸出，再把变成单倍体的卵子用细胞松弛素B处理回复到二倍体之后，再移植到假孕动物，使之发育成胎仔。雌核发育二倍体红鲫的培育红鲫鲤鱼↓↓卵子←精子←紫外灯照射(激活)(遗传物质灭活)(30W,45min)↓单倍体胚胎←冷休克(0～4℃，30min)↓二倍体胚胎→纯合二倍体红鲫(近交系)克隆动物与克隆技术的应用●克隆动物是遗传均一的实验动物（近交系）。●利用克隆技术培育优良畜种和拯救濒危动物。●利用体细胞克隆技术制备转基因克隆动物。●利用克隆技术和胚胎干细胞技术，实现人类治疗性克隆。利用克隆技术将需要进行器官或组织移植病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞内，构建核移植胚，使其发生一定程度的发育，并经过适当处理，对其进行诱导，令其定向发育成供患者移植所需的器官和组织。这样不但可以解决临床移植所需器官和组织来源不足的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ，还能克服异体器官和组织的免疫排斥反应，从而可大大提高器官和组织移植的成功率。提高动物繁殖率人工授精与超排胚移（MOET）技术的推广应用，为动物育种提供了技术支撑。提高动物性能的生物技术用于分子育种的生物技术生物技术在生产上的应用练习题一、名词解释1.基因频率——是某一基因在其位点上全部等位基因中所占的比例，等于这个等位基因的数量除以这个位点上可能出现的所有等位基因的总数。2.基因型频率——是某一基因型在其相对性状的基因型中所占的比例，等于该基因型个体数量除以该群体个体总数。3.表型频率——是群体中出现某性状表现的比例，等于该表型个体数除以群体个体总数。4.近亲交配——简称近交。指血缘关系极为相近(6代以内)的个体之间或遗传组成极相似的个体之间进行的交配，如父女交配、母子交配、兄妹交配等。5.定向选择——指在育种过程中按照培育目标有计划地选择某种(些)特殊性状的个体作为亲本的过程。6.近交系数与血缘系数——近交系数是指某一群体动物由于近交而造成等位基因纯合的比率，也就是说两个等位基因具有共同来源的概率，用符号“F”表示。血缘系数是指群体中个体之间的基因组成的相似程度。7.近交衰退——指由于近交而造成保持正常生物适合度的基因组合受到不同程度的破坏，出现了某些不利的性状效应，如抵抗力、生活力、生殖力等下降。8.异系杂交——指有目的地选择两个不同的近交系品系进行交配。9.随机繁殖——指在一动物群体中，每个个体都有同样的机会同另一性别中的任何一个个体进行交配繁殖。10.动情周期——哺乳类实验动物雌性个体性成熟后，卵巢、子宫、阴道等出现周期性的变化，动物也表现出周期性的动情现象，这种变化周期称动情周期，也称性周期、发情周期。二、判断是非1.1只白内障小鼠与1只正常小鼠交配，产16窝共113只小鼠，其中白内障小鼠57只，正常小鼠56只；再从57只白内障小鼠中挑雌雄鼠1对进行互交，产62窝共447只，其中白内障小鼠332只，正常小鼠115只；可知小鼠白内障由一对隐性基因所控制。(×)3.在一个随机交配繁殖的实验动物群体中，群体每代近交系数的增加量与有效群体大小成反比。(√)4.国际实验动物委员会 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 ，封闭群动物每代近交系数增加量不得超1%。(√)5.全同胞兄妹交配达100代，则其近交系数达100%。(×)6.雌雄小鼠合笼的第二天上午9点以前，见阴道口有乳白色栓塞者，则说明该小鼠已在夜晚配过种。(√)7.为了准确知道小鼠是否配过种(交配是否成功)，可采用阴道涂片法，检查是否有大量精子在阴道涂片中。(√)8.近交系动物育种，只能采用全同胞兄妹交配，不能采用亲子交配。(×)9.采用全同胞兄妹交配方式进行近交系动物育种时，如果同窝的同胞缺配，非同窝的同胞也缺配，则可与亲代回交过渡，但所生子代的代数不能晋级。(√)10.封闭群动物育种和保种的原则是避免群体的遗传杂合性的降低和基因频率的改变。(√)11.扩大繁殖杂种一代动物，则将杂种一代动物的基础群，按雌雄1∶１的配比，采用兄妹交配繁殖。(×)12.重组近交系动物的育种是将两个不同品系的近交系杂交生育杂种一代，然后从杂种一代中选择若干对全同胞兄妹配对，连续进行20代以上的全同胞兄妹交配。(×)三、填空1.影响群体基因频率稳定的因素有群体大小、随机遗传漂变、近亲交配、迁移、突变、选择等。2.定向选择的方法通常有个体选择、家系(间)选择和家系内选择三种3.实验动物的繁殖主要有近亲繁殖、异系杂交和随机繁殖三种。4.实验动物动情周期分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期四个时期。对小鼠阴道涂片检查，发现阴道冲洗物涂片的细胞类型为大量的鳞片状无核角化细胞，少量的有核上皮细胞，说明该小鼠处于动情期。5.近交系动物育种最常采用全同胞兄妹交配方式、雌雄1∶1的配比进行，连续交配繁殖20代以上。6.近交系动物保种的方式有单线系统、平行线系统和修饰平行线系统三种。通常采用修饰平行线系统进行保种。7.按照交通信号灯方法繁殖生产的近交系动物，将设立基础群、血缘扩大群、扩大群和生产群。其中基础群设白色标记，采用全同胞兄妹交配繁殖；血缘扩大群设绿色标记，采用近交繁殖1～4代；扩大群设黄色标记，采用近交繁殖1～2代；生产群设红色标记，采用随机交配繁殖1～4代。8.根据国际实验动物委员会规定，封闭群动物每代近交系数增加量不得超过1%，则每代封闭群动物的数量不能少于25对。9.封闭群大、小鼠繁殖群的繁殖方法，常采用长期同居法和定期同居法两种。10.对于显性基因的培育与保持，如果纯合时对两性的生存和生育有影响而杂合时对某一性别有影响则采用杂合子与正常纯合子交配繁殖。对于隐性基因的培育与保持，如果纯合子对两性的生存和生育有影响而杂合时无影响，则采用杂合子与杂合子交配繁殖。裸鼠一般采用杂合子交配或隐性纯合子雄鼠与杂合子雌鼠交配繁殖。四、单项选择1.某近交系小鼠中出现1只白内障小鼠。将这只白内障小鼠与正常小鼠杂交，产3窝共25只小鼠，其中白内障小鼠12只。又从12只白内障小鼠中挑雌雄小鼠1对配种，产5窝共41只，其中白内障小鼠30只。根据遗传的基本规律可知白内障由(B)A、1对隐性等位基因所控制B、1对显性等位基因所控制C、2对隐性等位基因所控制D、2对显性等位基因所控制2.在黑色豚鼠群体中出现1只白色豚鼠。将这只白色豚鼠与黑色豚鼠交配，产6窝共22只豚鼠全部为黑色。再从这22只黑色豚鼠中挑选雌雄性个体配种，繁殖出237只豚鼠，其中黑色豚鼠178只，白色豚鼠59只。根据遗传基本规律可知豚鼠的白色性状由(A)A、1对隐性等位基因所控制B、1对显性等位基因所控制C、2对隐性等位基因所控制D、2对显性等位基因所控制3.由100个个体组成的群体中，基因型AA的个体有30个，基因型Aa的个体有40个，基因型aa的个体有30个，基因A对基因a为完全显性。该群体基因A的频率为(D)A、0.2B、0.3C、0.4D、0.54.某实验动物群体有5个家系共25个个体，从每个家系选留2个表型值最高的个体共10个个体作亲本。这种选择方法是(C)A、个体选择B、家系(间)选样C、家系内选择D、以上都不是5.近交系动物的保种繁殖采用的繁殖方法是(A)A、近亲繁殖B、异系杂交C、随机繁殖D、以上都不是6.杂种一代动物的育种繁殖采用的繁殖方法是(B)A、近亲繁殖B、异系杂交C、随机繁殖D、以上都不是7.封闭群动物的保种繁殖采用的繁殖方法是(C)A、近亲繁殖B、异系杂交C、随机繁殖D、以上都不是8.关于大、小鼠离乳仔鼠的性别鉴定，下列说法哪一项是正确的(D)A、雌鼠的生殖器距肛门较远B、雄鼠的生殖器距肛门较近C、雌鼠生殖器与肛门之间长毛D、雄鼠生殖器与肛门之间长毛9.对大鼠阴道涂片，经染色镜检，视野布满大量有核上皮细胞和少量角化上皮细胞。此大鼠的动情周期处于(A)A、动情前期B、动情期C、动情后期D、动情间期10.对大鼠作妊娠诊断的方法是(B)A、摸胎法B、阴道涂片法C、外形观察法D、直肠检查法11.雌性小鼠交配成功的标志是(C)A、阴道口留有血迹B、阴道口留有奶酪状、芳香味栓塞C、阴道口留有乳白色栓塞D、粪盘上可见乳白色碎裂的栓塞12.雌性大鼠交配成功的标志是(D)A、阴道口留有血迹B、阴道口留有奶酪状、芳香味栓塞C、阴道口留有乳白色栓塞D、粪盘上可见奶油色碎裂的栓塞13.近交系动物通常采用的保种繁殖方式是(D)A、单线系统B、双线系统C、平行线系统D、修饰平行线系统14.封闭群动物引种数量应不少于(D)A、5对B、10对C、15对D、25对15.采用交通信号灯方法扩大繁殖生产近交系小鼠时，基础群、血缘扩大群、扩大群、生产群的标记分别为(C)A、红色、黄色、白色、绿色B、绿色、白色、黄色、红色C、白色、绿色、黄色、红色D、红色、黄色、绿色、白色16.采用交通信号灯方法扩大繁殖生产近交系小鼠时，生产群采用的繁殖方式是(C)A、全同胞兄妹交配B、半同胞兄妹交配C、随机交配D、最大限度避免近交17.封闭群动物群体中雄种动物数目多于100只时，一般采用的繁殖方法是(A)A、随机交配B、最大限度避免近交C、循环交配D、循环配对交配18.裸鼠的繁殖生产，常采用的方法是(C)A、nu/nu♀×nu/nu♂B、nu/nu♀×nu/+♂C、nu/+♀×nu/nu♂D、nu/nu♀×+/+♂五、问答1.如何鉴定小鼠、大鼠、豚鼠、兔的性别?答：①小鼠、大鼠的性别鉴定成年鼠雄性阴囊明显、雌性乳头明显。离乳仔鼠雌雄性识别的要点是：雄鼠的生殖器距肛门较远，雌鼠较近；雄鼠生殖器与肛门之间长毛，雌鼠的不长毛；雄鼠的生殖器突起较雌鼠大；雌鼠乳头较雄鼠明显。②豚鼠的性别鉴定主要通过生殖器形态来判断。雌性外生殖器阴蒂突起较小，拨开阴唇可见阴道口；雄性外生殖器阴茎隆起较明显，拨开包皮可见龟头。③兔的性别鉴定哺乳期仔兔，雄性肛门距尿道口较远，雌性较近；雄性尿道口略大于肛门，雌性尿道口略等于肛门。1月龄仔兔，雄性生殖孔呈圆形，并可见圆柱状突起，雌性生殖孔呈Y形，并可见裂缝及于肛门；3月龄以上兔，雄性阴囊明显而雌性无阴囊，雄性头大短而圆，雌性头小略呈长形。2.简述近交系动物的育种方法?答：从封闭群动物或其他动物群体中选择一对或几对具有育种目标性状的雌雄性动物，作为育种的初始动物。采用全同胞兄妹交配或亲子交配的繁殖方法，连续繁殖20代以上。一般采用连续20代以上的全同胞兄妹交配繁殖方法。作为初始动物的全同胞兄妹记为0代，按雌雄1∶1进行交配，所生后代记为第1代。从中又选留满意的1对或几对全同胞兄妹作亲本，按雌雄1∶1进行交配。以此类推，直到第20代以上。在育种过程中，如全同胞缺一性别而无法配对，可以与亲代回交过渡。为了防止断种，一般保持3～4支谱系线，每只谱系线保持7～12个繁殖对。整个过程，要有详细的系谱记录，繁殖记录等。3.采用修饰平行线系统对近交系动物保种是如何进行的?答：从基础群中选择3～5对全同胞兄妹进行交配，再在各兄妹的子代中比较生育能力、模型性状，如果差异不大，则从每对兄妹的子代中选留1对作亲本；如果差异较大，从满意的兄妹子代中选留亲本，总数仍为3～5对。一般在每过4～7代时进行一次这样的修饰。4.封闭群动物育种应注意哪些问题?答：①初始群体必须具有育种目标性状和较高程度的遗传杂合性。②每一代的有效群体大小，即参予繁殖的雌雄性数目，不能少于25对。③应采用随机交配方式进行繁殖。④在育种过程中要始终保持群体与外界动物的隔离，同时要避免对任何特征的动物进行选择或任意淘汰。⑤对于小鼠要随机交配繁殖5代以上。5.采用定期同居法繁殖生产封闭群小鼠是如何进行的?答：将1只雄性小鼠与6只雌性小鼠组成一个繁殖单元，依周次向雄性小鼠笼内放入1只雌性小鼠。第一周笼内保持1雄1雌，第2周笼内1雄2雌，从第3周起每周从笼内提出1只受孕雌鼠，即又放入1只雌鼠，以此类推。提出的受孕雌鼠置单独笼内分娩、哺乳、离乳。6.简述裸小鼠的繁殖生产方法?答：由于雌性裸小鼠繁殖性能低，一般采用杂合子与杂合子交配或杂合子雌性小鼠与隐性纯合子雄性裸小鼠交配进行繁殖生产。大量繁殖生产时，可设立核心群，扩大群和生产群。核心群保持无菌动物级别，饲养在小型隔离器内，可采用杂交(+/+♀×nu/nu♂)、互交(nu/+♀×nu/+♂)、回交(nu/+♀×nu/nu♂)等方式进行繁殖。扩大群来自核心群，保持已知菌动物级别，饲养在大型隔离器内，可采用互交(nu/+♀×nu/+♂)、回交(nu/+♀×nu/nu♂)等方式进行繁殖。生产群来自扩大群，保持无特定病原体动物级别，饲养在屏障系统里面，可采用互交(nu/+♀×nu/+♂)、回交(nu/+♀×nu/nu♂)的方式进行繁殖。再见！