Brdu染色

Brdu染色Brdu染色 1(切片复水，灭活内源性过氧化物酶。 2(组织切片滴加2N盐酸，37?温育20分钟。 3(0.1M PBS洗以中和盐酸，5分钟×3次。 4(0.125%胰蛋白酶室温消化10分钟。 5(0.1M PBS洗，3分钟×3次。 6(封闭、滴加一抗、二抗和辣根过氧化物酶标链霉卵白素同常规组化步骤。 7(最后苏木素轻度复染，脱水、中性树胶封片。 2.9 免疫组织化学 1(石蜡切片58 ?烘烤2小时，脱蜡，系列乙醇复水。 2(3%过氧化氢室温孵育10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。 3(蒸馏水洗...

Brdu染色 1(切片复水，灭活内源性过氧化物酶。 2(组织切片滴加2N盐酸，37?温育20分钟。 3(0.1M PBS洗以中和盐酸，5分钟×3次。 4(0.125%胰蛋白酶室温消化10分钟。 5(0.1M PBS洗，3分钟×3次。 6(封闭、滴加一抗、二抗和辣根过氧化物酶标链霉卵白素同常规组化步骤。 7(最后苏木素轻度复染，脱水、中性树胶封片。 2.9 免疫组织化学 1(石蜡切片58 ?烘烤2小时，脱蜡，系列乙醇复水。 2(3%过氧化氢室温孵育10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。 3(蒸馏水洗2分钟×3次，PBS浸泡5分钟。 4(抗原热修复，即将组织切片置于400 ml 0.1M柠檬酸钠缓冲液内，微波炉加热4分钟，然后使其自然冷却(约需30分钟)。 5(依据不同的一抗种属，选用不同的封闭液。室温孵育30分钟。 6(倾去血清，滴加适当比例稀释的一抗。4 ? 过夜。 7(PBS洗，5分钟×3次。 8(滴加1:200稀释的生物素化二抗，37 ?孵育30分钟。 9( PBS洗，5分钟×3次。 10(滴加1:200稀释的辣根酶标记链霉卵白素，37 ?孵育30分钟。 11(PBS洗，5分钟×3次。 12(DAB显微镜下观察显色。 13(流水冲洗，系列乙醇脱水，中性树胶封片。

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