空气废气中苯并芘采样与检测方法

大气中苯并a芘的测定方法苯并〔a〕芘是多环芳香烃类化合物,又名3,4－苯并芘,简称Bap,分子式C20H12；分子量；沸点475℃；熔点179℃；相对密度;3,4－苯并芘纯品为无色或微黄色针状结晶,在水中溶解度较小,易溶于苯、氯仿、乙醚、丙酮、环己烷、二甲苯等有机溶剂;在苯中溶解呈蓝色或紫色荧光,在浓硫酸中呈桔红色并伴有绿色荧光;3,4－苯并芘是环境中普遍存在的对动物致癌性很强的一种物质,主要是含碳燃料及有机物热解过程中的产物;煤炭、石油等在无氧加热裂解过程中产生的烷烃、烯烃,经过脱氢、聚合,常可产生一定数量的3,4－苯并芘;工厂烟气中的悬浮颗粒物上吸附有3,4－苯并芘,散布在大气,一部分降落到水面和陆地上,从而污染水源和土壤;炼焦、化工、染料等工厂排出的工业废水中以及熏制食品、香烟烟雾中均含有3,4－苯并芘;3,4－苯并芘对动物具有局部和全身的致癌作用,对猴子反复皮下注射可在局部形成肿瘤,从气管反复滴注可形成肺癌,在小鼠身上涂抹可使小鼠诱发皮肤癌;流行病学调查认为人的肺癌与环境中3,4－苯并芘的含量之间有着极为密切关系;虽然目前各国尚无公认3,4－苯并芘的最高容许浓度,但通过动物试验和现场调查提出了一些建议,例如：车间空气中3,4－苯并芘最高容许浓度为μg/m3；居民区大气最高容许浓度为10－3μg/m3;飘尘上有机物的组分异常复杂,仅其中多环芳烃简称PAH就有几百种之多;测定3,4－苯并芘的方法很多,主要是将3,4－苯并芘与其他多环芳烃分开,常用的有柱层、纸层、薄层、气相色谱、高压液相色谱、气质联机等一系列分离体系;其中以气相色谱法分离PAH尤为重要;利用气相色谱法分离迅速、效能高,再与薄层层析结合起来,可以迅速判断提取物中某些PAH的存在;特别是用毛细管色谱与质谱及核磁共振谱联用,从城市悬浮颗粒物、烟草焦油及汽车废气中,可分离出100多种PAH,极大地发挥了气相色谱的分离效能;用高压液相色谱法分离PAH比气相色谱法具有以下优点：工作温度低＜80℃对被分离的各组分可以完整地收集起来,再进一步的用紫外或荧光光谱分析;色谱柱是十八烷基硅烷ODS化学键为固定相;被检样品在注入分离柱前,最好先经过薄层作初步分离,除去其中混杂的烷烃、烯烃、杂环等化合物,以减轻分离柱的负担,此种方法可以和薄层层析联用,是一种快速鉴定PAH较好的方法;柱层、纸层和薄层层析法,所需设备简单、操作容易,易于掌握和推广;但是,柱层析法和纸层析法所需时间长,分离效果较差,无法排除PAH异构体之间的干扰,使之不能精确定量;为了改进分离效果,可以先经过柱层析,再在乙酰化纸上进行分离;乙酰化纤维素薄层分离同分异构体效果较其他薄层为好;采用两种吸附剂如氧化铝和40%乙酸的乙酰化纤维素混合制板,进行双向展开,第一向用正烷＋苯9＋1,第二向用甲醇＋乙醚＋水4＋4＋1;这时可以将干扰3,4－苯并芘的几种干扰物分离,进行几种主要PAH的定量测定;因苯并〔a〕芘是多环芳香烃类化合物,气相色谱-质谱法被广泛采用;执行 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 ：1、环境空气苯并a芘的测定高效液相色谱法GB/T15439-1995样品采集：崂应2031型智能大流量TSPPM10采样器2、固定污染源排气中苯并a芘的测定高效液相色谱法HJ/T40-1999样品采集：崂应3012H型自动烟尘气测试仪3、环境空气和废气气相和颗粒物中多环芳烃的测定气相色谱-质谱法HJ646-2013空气样品采集：崂应2033B型环境空气挥发性有机物采样仪废气样品采集：崂应3075型智能烟气有机物采样仪4、气相和颗粒物中多环芳烃的测定高效液相色谱法HJ647-2013备注：“环境空气和废气气相和颗粒物中多环芳烃的测定气相色谱-质谱法HJ646-2013”此方法被广泛采用;附录A：高效液相色谱法测定环境空气中苯并芘;一、高效液相色谱法〔1〕一原理空气中颗粒物中的多环芳烃被采集在玻璃纤维滤纸上,经索氏提取或真空升华后,用高效液相色谱分离测定,以保留时间定性,峰高或峰面积定量;二仪器1大流量采样器见第十二章第一节总悬浮颗粒物大流量采样称量法;2索氏提取器容量60ml;3升华管见图6－9;4真空升华装置见图6－10;5浓缩器及浓缩瓶见图6-116微量注射器10μl、20μl,刻度应校正;7离心机4000rpm;8离心管5ml,刻度应校正;9高效液相色谱仪附荧光检测器或紫外检测器;三试剂1玻璃纤维滤纸规格见第十二章第一节总悬浮颗粒物;滤纸需作预处理,方法是将滤纸不重叠地放在高温炉中,经500℃灼烧30min,保存备用;2色谱柱内径4mm,长20cm不锈钢柱,内装YWG－CH型微粒硅胶粒子10μm,塔板数为30000/m,柱压不超过5MPa;3苯重蒸馏;4甲醇重蒸馏;5环己烷重蒸馏;6碱性氧化铝200～300目;7标准溶液取一个10ml棕色容量瓶,准确称量,然后小心加入约10mg苯并〔a〕芘①,再准确称量,两次称量之差即为苯并〔a〕芘质量;加苯溶解并稀释至刻度,计算每毫升溶液中苯并〔a〕芘的含量;然后再用甲醇稀释成含100μg苯并〔a〕芘的贮备液;临用时,用甲醇稀释成含2μg苯并〔a〕芘的标准溶液;贮于棕色容量瓶中,置冰箱中保存;四采样采样方法同第十二章第一节中“总悬浮颗粒物大流量采样－重量法”五分析步骤1.液相色谱仪测试条件分析时,应根据液相色谱仪的型号和性能制定能测定苯并〔a〕芘的最佳测试条件;柱温：室温;流动相：3＋1甲醇＋水;流动相温度：40℃;流量：1ml/min;柱压：4MPa;检测器：紫外检测器波长　254nm;荧光检测器激发波长365nm;荧光检测器发射波长405nm;2.绘制标准曲线和测定校正因子在作样品测定的同时,绘制标准曲线或测定校正因子;1绘制标准曲线将液相色谱仪调至最佳测试条件,如用紫外检测器,可用微量注射器分别吸量含100μg苯并〔a〕芘标准溶液5、10、15、20μl注入色谱仪；如用荧光检测器,可用微量注射器分别吸量含2μg苯并〔a〕芘标准溶液2、4、6、8、10μl注入色谱仪,得苯并〔a〕芘的色谱峰和保留时间;另取试剂空白溶液作零浓度点的测定,每个浓度重复三次测定,得峰面积或峰高的平均值;以苯并〔a〕芘的含量ng为横坐标,峰面积mm2或峰高mm为纵坐标,绘制标准曲线,并计算回归线的斜率;以斜率倒数作为样品测定的计算因子Bsng/mm2或ng/mm;2测定校正因子在测定的线性范围内,可用单点校正法求校正因子;在样品测定同时,取试剂空白溶液和与样品提取溶液苯并〔a〕芘浓度相接近的标准溶液,按液相色谱的最佳测试条件进行测定,得苯并〔a〕芘的色谱峰和保留时间;重复做三次,得峰面积或峰高的平均值;用下列公式计算校正因子：式中f——校正因子,ng/mm2或ng/mm；cs——标准溶液中苯并〔a〕芘含量,ng；As——标准溶液平均峰面积或峰高,mm2或mm；A0——试剂空白溶液平均峰面积或峰高mm2或mm;3.样品测定1样品提取用索氏提取法或真空升华法;①索氏连续提取法：采样后,取80～100cm2的玻璃纤维滤纸,折叠后放进索氏提取器,加40ml环己烷,于沸水浴中连续提取8h每小时回流次数不少于10次;将提取液移至浓缩器中,在70～80℃水浴上减压浓缩至～不可蒸干;将浓缩液转移至5ml离心管内,用少量环已烷洗涤浓缩瓶,合并于离心管内,使总体积控制在;加入碱性氧化铝,摇匀,离心5min,取上清液待测;②真空升华提取法：采样后,取80～100cm2的玻璃纤维滤纸,卷成筒状,放入升华管内;勿使滤纸折叠或堵塞管口,旋紧磨口;接口处用少量石膏浆密封,石膏固化后,将升华管放在管状电炉内,连接气路和真空泵,将管内抽成真空,3～5min后,转动三通活塞4,向管内充氮气,再抽真空、再充氮气,如此重复三次,以除去管内残留的空气;同时,将管状炉升温至300℃,升华40min;此时,可看到黄色的油状物凝集在升华管的毛细管内壁上,为防止升华物被抽走,可在毛细管一端外壁放一小块纱布,裹以冰块冷却;待管状电炉温度下降至室温后,转动三通活塞,使内外气压平衡,关闭真空泵避免真空泵的油进入管道和真空规中;取下升华管,旋开磨口,将毛细管的大口朝上,垂直地固定在铁架上;用100μl注射器吸取甲醇,注入毛细管内壁,必要时可用金属丝摩擦管壁,帮助溶解,如此重复多次冲洗内壁,冲洗液收集于浓缩管中,将洗脱液浓缩至～,即为待测样品;2样品分析在液相色谱仪的最佳测试条件下,取1～20μl样品提取液根据浓度大小决定进样量注入色谱仪,得色谱峰,以保留时间确认苯并〔a〕芘峰,测定峰面积mm2或峰高mm,重复做三次,得峰面积或峰高的平均值;在样品测定的同时,取同样规格及大小的未采样滤纸,按相同的操作步骤作试剂空白测定;六计算1.用绘制标准曲线法式中c——空气中苯并〔a〕芘浓度,μg/100m3；A样品溶液峰面积或峰高,mm2或mm；A0——试剂空白溶液峰面积或峰高,mm2或mm；Bs——用标准溶液绘制标准曲线得到的计算因子,ng/mm2或ng/mm；V1样品提取溶液的总体积,ml；V2——注入色谱仪中样品溶液的体积,ml；S1——滤纸总过滤面积,cm2；S2——分析时所取滤纸的过滤面积,cm2；Es——由 实验室 17025实验室iso17025实验室认可实验室检查项目微生物实验室标识重点实验室计划 确定的苯并〔a〕芘平均提取效率；V0——换算成标准状况下的采样体积,m3;2.用单点校正法式中f——用单点校正法得到的校正因子,ng/mm2或ng/mm；其他符号与上式相同;七说明1检出限和测定范围本法检出限荧光检测器、10ng紫外检测器;用荧光检测器测定范围为～20ng苯并〔a〕芘;如采样体积为1440m3,取1/5滤纸样品,制成溶液总体积为1ml,进样量为10μl,则可测浓度范围为～μg/100m3;2精密度对浓度为～17mg/L的溶液重复测定的相对标准差为%～%;3干扰与排除样品经过预处理以及色谱柱分离,消除了大部分有机物的干扰;4真空升华法和连续提取法各具优缺点;前法操作简单、快速、节省溶剂,可同时提取一组样品,但需要有一定的设备和条件,后法不需要特殊仪器设备,方法简单,提取效率高,易推广；缺点是使用溶剂多,需要增加浓缩这一步骤,提取时间太长;试验证明,这两种方法提取颗粒物中苯并〔a〕芘的回收率都很高,加入5μg苯并〔a〕芘,真空升华法回收率为95%～100%,索氏提取法为96%～108%;53,4－苯并芘是致癌性物质,操作人员要特别注意防护,防止污染;接触3,4－苯并芘溶液时,要带医用橡胶手套,并在专用实验台上操作,标准溶液要注意保管;测定后的3,4－苯并芘废液应集中起来,统一处理;所用过的玻璃仪器,必须用铬酸钾－硫酸洗液浸泡4h以上,最好浸泡过夜后用水洗净;6色谱条件的选择①流动相：用甲醇和水调节其不同比例,在每种比例下,变化流量,固定柱温,用萘、联苯、菲、蒽混合样品测量在各种条件下的保留值、柱效和蒽菲的分离度,结果见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 6－10;表6－10流动相极性、流量变化对多环芳烃保留值、柱效和分离度菲、蒽的影响续表流动相甲醇和水的比例影响分离组分的保留值、柱效和分离度;如增加甲醇,保留时间减少,柱效和分离度发生变化,这主要是由流动相极性变化所引起的;另外,流量对保留时间、柱效和分离度也有影响,如流量变大,则保留时间减小,柱效降低,分离度下降;因此,对于甲醇和水的比例以及流量均须严格控制恒定;②柱温：提高柱温能缩短保留时间、增加塔板数见表6－11,这是由于温度增高,溶剂粘度减少,增加了溶剂在固定相中的渗透性,所以加快了分离；但温度过高,对低沸点溶剂如甲醇易形成气泡析出,影响结果;表6－11柱温对保留值、柱效和分离度影响7标准和空气样品的色谱图标准和空气样品的色谱图示于图6－12、图6－13、图6－14,空气样品测量结果列于表6－12;表6－12大气飘尘中多环芳烃含量ng/m3从色谱图上看到,二个环的仅知道萘和联苯,三个环的有蒽、菲二个峰,这在气相谱不易分开,而用液体色谱是可以分开的;四个环的芘和荧蒽基本能分开,和苯并〔a〕蒽是难分离的异构体,此法虽能分开,但不理想;五个环的有苯并〔e〕芘、苯并〔a〕芘和苝是能分开的;仪器型号用北京分析仪器厂生产的SY01型高压液体色谱仪UV－254检测器得到多环芳烃标准曲线如图6－15;二、纸层析－荧光分光光度法〔1〕一原理采集在玻璃纤维滤纸上颗粒物中的多环芳烃,经索氏提取或真空升华后,用苯洗脱浓缩,经乙酰化滤纸层析分离,分离出的苯并〔a〕芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点,用苯洗脱或斑点直接扫描,用荧光分光光度法定量;二仪器1层析缸5L;2紫外灯附365或254nm滤光片;3具塞比色管10ml,刻度需校正;4荧光分光光度计用10mm石英比色皿,在激发波长385nm和发射波长400～410nm下测定荧光强度或附薄层扫描装置,用于荧光斑点直接扫描测定荧光强度;其他仪器同一法415页;三试剂1玻璃纤维滤纸同一法415页;2苯重蒸馏;3环己烷重蒸馏;4二氯甲烷重蒸馏;5无水乙醇重蒸馏;6乙酰化溶液按150ml苯、50ml乙酸酐和硫酸的比例混合配制;7层析滤纸新华牌中速层析滤纸;8展开剂无水乙醇十二氯乙烷,按2＋1比例体积比配制;9乙酰化滤纸将层析滤纸裁成长27cm、宽15cm;取20张卷成圆筒形,逐张浸入到盛有2000ml乙酰化溶液的烧杯中,滤纸圆筒状中空部分放入一个高10cm,内径6cm玻璃管防止滤纸在搅拌时被搅破;将电动搅拌棒置于玻璃柱中心,在50～55℃下缓慢搅拌6h,在搅拌浸泡过程中,溶液液面始终保持超出滤纸1cm,并在通风橱中进行;然后,静置浸泡过夜;取出滤纸在通风橱内晾干,再将滤纸逐张放入无水乙醇中浸泡4h以上,取出晾至微干,夹入粗滤纸之间,用玻璃板压平至干备用;经乙酰化处理过的滤纸,对着光线观察,质地应均匀,透明度一致;如质地不均匀,透明度明、暗不一,则不能用于分析;乙酰化滤纸检验方法：在乙酰化滤纸上分别点3,4－苯并芘、芘、1,2－苯并芘溶液和三种物质的混合液,用乙醇和二氯甲烷2＋1为展开剂,展开上升20cm后,在荧光灯下观察,三种物质均分开,3,4－苯并芘的斑点Rf值小于,此滤纸即可供分析使用;10标准溶液贮备液的配制方法同一法,临用时,用苯稀释成含2μg苯并〔α〕芘的标准溶液,贮于棕色容量瓶中,并置冰箱中保存;四采样采样方法同第十二章第一节中总悬浮颗粒物大流量采样－重量法;五分析步骤1.样品提取同一法415页;2.纸层析分离将空气总悬浮颗粒物样品的提取液定容后,作为纸层析点样待测液;1点样在乙酰化滤纸一端距底边5cm处,用铅笔轻轻划一横线,在横线上点6个样：二个点样品、二个点标准取10μl标准溶液含μg苯并〔α〕芘、二个点试剂空白均为平行双样;各点间隔2cm;用微量注射器吸量样品提取液,根据苯并〔α〕芘浓度点样10～50μl;在点样过程中用吹风机缓缓送风,促使溶剂挥发,点样斑点直径不应超过5mm,点样速度应缓慢;如需将全部样品点样时,可用玻璃毛细管点样;溶液点完后,可用少量苯洗涤浓缩瓶,并将洗涤液全部点在斑点上;按相同操作步骤点标准溶液和试剂空白溶液;2层析在层析缸中加入适量展开剂,将点完样的层析滤纸悬挂在层析缸中,下端浸入展开剂约5mm,将层析缸用透明胶纸密封并避光,待溶剂前沿上升至离原点20cm处,取出滤纸,在通风橱中使展开剂自然晾干;然后在暗室内,于365nm紫外光下观察层析纸上苯并〔α〕芘的亮紫色荧光斑点,并用铅笔圈出苯并〔α〕芘标准斑点及与其位置相对应的样品斑点和空白斑点;3洗脱用光亮无锈的剪刀分别剪下层析滤纸上苯并〔α〕芘标准、样品和空白斑点,各放入5ml比色管中,各管准确加入苯,加盖,于60～70℃水浴中,不断振摇,浸泡15min,使苯并〔α〕芘转移至苯液中;3.测定1洗脱液的荧光分光光度测定将标准、样品和空白斑点的苯洗脱上清液分别倒入10mm石英比色皿中,在激发狭缝10nm,激发波长385nm和发射狭缝5nm,发射波长400,405和410nm的条件下,分别测定荧光强度mm;2苯并〔α〕芘荧光斑点直接扫描定量用荧光分光光度计的薄层扫描仪时,将层析纸展开的一面朝下,用透明胶纸将其固定于玻璃板上,放入薄层层析扫描板框座架上,设定激发波长为385nm、入射狭缝10nm、入射狭缝5nm,发射波长为405nm,以标准斑点调节仪器的负高压和记录器灵敏度,使记录笔的响应值在1/2满量程处;然后在发射波长400、405和410nm处,对标准,空白和样品斑点逐一进行直线或曲线移动扫描,测得每个斑点峰高或峰面积的积分值之和,即为该斑点的荧光强度mm或mm2;六计算1.荧光光度法测定洗脱液或斑点直接扫描标准、空白和样品的相对荧光强度：式中A——相对荧光强度；A405——于405nm发射波长处测定的荧光强度；A400——于400nm发射波长处测定的荧光强度；A410——于410nm发射波长处测定的荧光强度;2.空气中苯并〔α〕芘浓度式中c——空气中苯并〔α〕芘浓度,μg/100m3；A——样品斑点相对荧光强度,mm2或mm；A0——试剂空白样品相对荧光强度,mm2或mm；As——标准样品相对荧光强度,mm2或mm；W——标准斑点苯并〔α〕芘含量,μg；B——样品洗脱定容体积,μl；D——点样时所取洗脱液体积,μl；S1——样品滤纸的总面积,cm2；S2——分析时所取样品滤纸的面积,cm2；Es——由实验确定的苯并〔α〕芘的平均提取效率；V0——换算成标准状况下的采样体积,m3;七说明1纸层析法分离－荧光光度法测定苯并〔α〕芘,具有灵敏度高,操作简便,样品便于保存等优点,是目前测定苯并〔α〕芘普遍采用的方法之一,检出限为2ng/5ml;2精密度和准确度对μg苯并〔α〕芘重复测定的相对标准差小于6%；对5μg苯并〔α〕芘的加标回收率为95%～108%;3精确量取10μl混合样品提取物各5份进行纸层析法和薄层层析法比较,测定结果见表6－13,从表中结果可以看出两种方法测定结果基本上是一致的;目视观测纸层分离荧光点分界不清晰,不如薄层法;但制备乙酰化滤纸比较容易;表6－13两种分离方法测定飘尘中3,4－苯并芘的比较三、薄层层析－荧光或紫外分光光度法一原理采集在玻璃纤维滤纸上颗粒物中的3,4－苯并芘Bap,用充氮升华法或连续提取法提取,再经醋酸纤维素薄层层析法分离,分离出的Bap斑点,用苯洗脱,以荧光分光光度法或紫外分光光度法定量;二仪器1薄层涂布器;2薄层层析仪;3离心机4000rpm;4玻璃熔封铁芯转子长6mm;5电热式磁力搅拌器;6其他仪器同二法425页;三试剂1玻璃纤维滤纸预处理同一法415页,Bap的空白值不应大于1ng;2无水乙醇重蒸馏;3甲醇重蒸馏;4乙醚重蒸馏;5苯使用前提纯,提纯方法：在分液漏斗中每次加少量浓硫酸,振摇,至浓硫酸层无色为止,再加水振摇数次,洗去硫酸;然后加入无水硫酸钠脱水,再蒸馏;6展开剂甲醇+乙醚+水＝4+4+1体积比;7薄层板以每块板200×200mm平均需用4g乙酸纤维素,和15ml无水乙醇的比例调成糊状,在涂布器上制板;涂布后,先在室温下风干,再于80℃干燥箱中活化30min;然后,放在干燥器内,冷却备用;8乙酸纤维素160～250目,结合酸的含量为26%～30%;乙酸纤维素制备方法：量取乙酸酐、300ml苯、水依次放入2L烧杯中,混匀;置于冰水浴中,缓慢加入10ml高氯酸,搅匀注意防止反应剧烈溅出;然后,在不断搅拌下慢慢加入100g微晶纤维素色层用,在通风橱内于30～35℃水浴中放置2h,并不断搅拌,以保证乙酰化反应充分,并注意观察温度,以防温度骤增;然后,再倒入大型离心管中,以4000rpm速度,离心3～5min,除去上层乙酰化剂溶液,沉淀物用无水乙醇洗涤三次,再离心,至pH＝6为止;最后将乙酰化纤维素置于通风橱中吹风晾干;放置过夜,再放入干燥箱中,于80℃干燥1h,取出冷却后,研磨,过160目筛,备用;93,4－苯并芘标准溶液同一法415页,临用时配制成含10μgBap标准溶液;四采样采样方法同一法415页;五分析步骤1.样品提取2.薄层分离①1点样取活化处理过的薄层板,将三边各刮去5mm;在距离底边2cm处,以1．5cm间隔,用毛细管将样品液全部或一部分,视浓度而定,在薄层板上作条状点样;斑点不大于15mm×3mm;用苯洗管壁,洗液再点样;如此反复,直至洗液无荧光为止;同时,以同样方法,用微量注射器取10μl苯并芘标准溶液μg点样,作为标准对照点;另外一个点不点样品,作为展开剂空白点;如用紫外分光光度法测定时,标准对照应点μg苯并芘,并且不留展开剂空白点;2层析点样后薄层板放入薄层层析仪中,加入15ml展开剂;待展开剂前沿上升至15cm处,取出薄层板,放在通风橱中,让展开剂自然挥发,晾干;然后在暗室内,于紫外线灯下观察薄层板上荧光斑点;用针划出苯并芘标准斑点和其相对应位置的样品斑点和空白点;3洗脱用光亮无锈的小刀仔细刮下标准斑点、样品斑点和空白点;通过漏斗分别移入10ml比色管中,再加入5ml苯,并放入一个玻璃熔封铁芯转子;将比色管放在盛水的烧杯中,于电热磁力搅拌器上加热65℃,10min,进行洗脱;然后,在离心机上,以4000rpm,离心2min;上清液分别转移于10ml比色管中;再向原比色管中加5ml苯,重复洗脱一次,合并洗脱液,混匀,作为被测样品;3.测定将标准管及样品管和空白管中洗脱液均用苯定容至10ml,分别进行荧光或紫外分光光度法测定,测定步骤同二法425页;六计算同二法425页;七说明1乙酸纤维素薄层法可将样品中的3,4－苯并芘与其他多环芳烃化合物完全分离,不受或少受其他干扰物的影响;由于它具有灵敏度高,重现性好,分离时间比纸层析法快等优点,所以这个方法仍被广泛采用;2检出限本法检出限用荧光分光光度法为1ng/10ml紫外分光光度法为300ng/10ml;3乙酸纤维素目前市场还没有商品供应,需要自己制备;乙酸纤维素的结合酸含量对分离有一定的影响,结合酸最适范围26%～30%为最好;结合酸测定步骤如下：①试剂c.丙酮：一级;②测定步骤a.总酸测定：称取乙酰化纤维素放到回流器的磨口瓶中,加入丙酮15ml溶解乙酰化纤维素,在不停振摇下加入1ml水及L氢氧化钠乙醇溶液,摇匀;在65℃水浴中回流30min,冷却后加入L盐酸,10min后,以酚酞为指示剂,用L氢氧化钠溶液滴定;计算式中V1——L氢氧化钠－乙醇溶液体积,ml；V2——L盐酸体积,ml；V3——L氢氧化钠滴定体积,ml；60——乙酸摩尔质量；W——样品质量,g;b.游离酸的测定：不加温回流,其余步骤和计算与测定总酸相同;c.结合酸的计算结合酸%＝总酸－游离酸例：总酸测定消耗氢氧化钠游离酸测定消耗氢氧化钠③此法比纸层析法分离多环芳烃效果好,荧光斑点不扩散,清晰;3,4－苯并芘与其他荧光斑点之间有明显的无荧光带分界线,如果展开两次或进行连续展开,分界效果更佳;④薄层分离样品后最好当日将样品洗脱定量测定,如果不能完成时,应将薄层板放在暗箱内保存,24h内无有明显变化,放置5天后再经薄层扫描测定,3,4－苯并芘结果偏低6%～10%;4鉴于苯并芘Bap的强致癌性,实验中的一切操作均在白搪瓷盘中进行,防止泼散污染,可随时用重铬酸钾－浓硫酸洗液处理,Bap可被强氧化剂破坏;参考文献1中国预防医学科学院环境卫生监测所.环境空气质量监测检验方法.北京：中国科技出版社,1991：31～42①苯并〔a〕芘为强致癌性物质,操作时务必注意安全;①应避光直射,以防Bap光解;附录B：环境空气和废气气相和颗粒物中多环芳烃的测定气相色谱-质谱法HJ646-2013　　1适用范围　　本标准 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 了测定环境空气和废气中十六种多环芳烃的气相色谱-质谱法;　　本标准适用于环境空气、固定污染源排气和无组织排放空气中气相和颗粒物中十六种多环芳烃PAHs的测定;十六种多环芳烃包括萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并a蒽、、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽、苯并a芘、茚并1,2,3-c,d芘、二苯并a,h蒽、苯并g,h,i苝;若通过验证本标准也适用于其他多环芳烃的测定;　　当以100L/min采集环境空气24h时,采用全扫描方式测定,方法的检出限为～μg/m3,测定下限～μg/m3；当以225L/min采集环境空气24h时,采用全扫描方式测定,方法的检出限为～μg/m3,测定下限～μg/m3；当采集固定源废气1m3时,采用全扫描方式测定,方法的检出限为～μg/m3,测定下限～μg/m3;详见附表A;　　2规范性引用文件　　本标准内容引用了下列文件中的条款;凡是不注日期的引用文件,其有效版本适用于本标准;　　GB/T16157固定污染源排气中颗粒物测定与气态污染物采样方法　　HJ/T48烟尘采样器技术条件　　HJ/T55大气污染物无组织排放监测技术导则　　HJ/T93PM10采样器技术要求及检测方法　　HJ/T365危险废物焚烧含医疗废物处置设施二恶英排放监测技术规范　　3术语和定义　　下列术语和定义适用于本标准;　　全程序空wholeprogramblank　　将密封保存的采样筒和玻璃纤维滤膜/筒带到采样现场,采样时暴露在采样现场但不经过采样,采样后随样品运回实验室,按与样品相同的操作步骤进行处理和测定,用于检查从样品采集到分析全过程是否受到污染;　　运输空白tripblank　　将密封保存的采样筒和玻璃纤维滤膜/筒带到采样现场,采样时不开封,采样后随样品运回实验室,按与样品相同的操作步骤进行处理和测定,用于检查样品运输过程是否受到污染;　　内标Internalstandards　　样品中不含有的化合物,在样品分析之前加入已知量,用于目标化合物的定量分析;　　替代物surrogatestandards　　样品中不含有,但其物理化学性质与待测目标化合物相似的物质;一般在样品提取或采样前加入,通过回收率可以评价样品前处理或采样过程对分析结果的影响;　　采样效率samplingefficiency　　指采样器捕集并保留多环芳烃的能力;将一定量的多环芳烃加到采样滤膜上,按与样品相同的操作条件抽空气,测定采样介质对多环芳烃的保留能力;　　动态采样效率dynamicretentionefficiency　　将一定量多环芳烃加到采样吸附柱表面,按与样品相同的操作条件抽空气,测定采样介质对多环芳烃的保留能力;　　4方法原理　　气相和颗粒物中的多环芳烃分别收集于采样筒与玻璃或石英纤维滤膜/筒,采样筒和滤膜用10/90v/v乙醚/正己烷的混合溶剂提取,提取液经过浓缩、硅胶柱或氟罗里硅土柱等方式净化后,进行气相色谱-质谱联机GC/MS检测,根据保留时间、质谱图或特征离子进行定性,内标法定量;　　5干扰和消除　　杂环类多环芳烃和烷基取代的多环芳烃与待测化合物在相同的保留时间出峰时,可以通过质谱检测辅助定性离子来加以区别；　　样品采集、贮存和处理过程中受热、臭氧、氮氧化物、紫外光都会引起多环芳烃的降解,需要密闭、低温、避光保存;　　6试剂和材料　　除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和蒸馏水;　　二氯甲烷CH2Cl2：色谱纯;　　正己烷C6H14：色谱纯;　　乙醚C2H6O：色谱纯;　　丙酮C3H6O：色谱纯;　　无水硫酸钠Na2SO4　　使用前在马福炉中于450℃烘烤2h,冷却后,贮于磨口玻璃瓶中密封保存;　　十氟三苯基膦DFPTT：5mg/L二氯甲烷溶剂,可直接购买市售有证标准溶液,或用高浓度标准溶液配制;　　替代物　　2-氟联苯2-fluorobiphenyl和对三联苯-d14P-Terphenyl-d14,纯度：99%以上;亦可采用其他类似物或氘代多环芳烃;可直接购买市售有证标准溶液;ρ=2000μg/ml;ρ=40μg/ml;　　荧蒽-D10、苯并a芘-D12,纯度：99%以上;亦可采用其他氘代多环芳烃;可直接购买市售有证标准溶液;ρ=2000μg/ml;ρ=40μg/ml;　　内标溶液ρ=2000μg/ml;　　直接购买市售有证标准溶液,含萘-d8、苊-d10、菲-d10、-d12、苝-d12;ρ=400μg/ml;　　标准溶液ρ=2000μg/ml;　　直接购买市售有证标准溶液,包括萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、、苯并a蒽、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽、苯并a芘、二苯并a,h蒽、苯并ghi苝、茚并1,2,3-cd芘,4℃以下、密封、避光保存,或参考生产商推荐的保存条件;ρ=200mg/L;ρ=20mg/L;　　注1：所有溶液、、均转移至顶盖具有聚四氟乙烯衬垫的螺口玻璃瓶内,密封、避光,4℃以下冷藏;　　注2：必要时,需将替代物2一并配入其中;　　样品提取液：1+9V/V乙醚/正己烷混合溶液;　　淋洗液　　柱层析硅胶：试剂级,100-200目,孔径30Ao或60Ao;使用前,放在浅盘中130℃烘烤活化16h,取出放在干燥器中冷却后,装入玻璃瓶中备用;必要时,活化前使用二氯甲烷浸洗;　　硅胶固相柱或氟罗里硅土固相柱：1000mg/6ml,亦可根据杂质含量选择适宜容量的商业化硅胶或氟罗里硅土固相柱;　　超细玻璃纤维滤膜或石英纤维滤膜　　根据采样流量选择相应规格的滤膜;滤膜对μm标准粒子的截留效率不低于99%,在气流速度为s时,单张滤膜阻力不大于,在此气流速度下,抽取经高效过滤器净化的空气5h,每平方厘米的失重不大于;使用前在马福炉中于400℃加热5h以上,冷却,用铝箔包好,保存于滤膜盒,保证滤膜在采样前和采样后不受沾污,并在采样前处于平展不受折状态;　　玻璃纤维滤筒石英滤筒　　对μm标准粒子的截留效率不低于%,使用前在马福炉中于600℃加热6h以上,冷却,密封保存,保证滤筒没有折痕;必要时依次用丙酮、二氯甲烷回流提取,溶剂挥干后封存备用;　　树脂苯乙烯-二乙烯基苯聚合物;　　使用前用二氯甲烷回流提取16小时后,更换二氯甲烷继续回流提取16小时,再用乙醚/正己烷提取液回流提取16小时,然后放置在通风橱中将溶剂挥干亦可采用50℃真空干燥8h;贮存于干净广口玻璃瓶中密封保存;　　聚氨酯泡沫PUF　　聚醚型,密度为22～25mg/cm3,切割成长10mm～20mm的圆柱形直径根据玻璃采样筒的规格确定;首次使用前用蒸馏水清洗,沥干水分,用丙酮清洗三次,放入索氏提取器,依次用丙酮回流提取16h,乙醚/正己烷提取液回流提取16h,更换2～3次乙醚/正己烷提取液回流,每次回流提取16h;然后取出,将溶剂挥干或氮气吹干亦可采用50℃真空干燥8h;用铝箔包好放于合适的容器内密封保存;必要时,用丙酮使PUF恢复原形,再挥干溶剂;　　也可购买市售经预处理的PUF;　　亦可使用快速溶剂萃取ASE、自动索氏提取等其他方式提取;　　注3：净化后,使用量PUF、XAD-2树脂和滤膜/筒空白中萘、菲小于50ng,其他多环芳烃小于10ng;　　氮气：纯度≥%;　　玻璃棉　　使用前用二氯甲烷浸洗,待挥去溶剂后密封保存;　　7仪器和设备　　气相色谱质谱联机：气相色谱具有分流/不分流进样口,具有程序升温功能；质谱仪采用电子轰击电离源;×内径×μm膜厚,固定相为5%苯基甲基聚硅氧烷,或其它等效的色谱柱;≥%　　环境空气采样设备　　采样装置由采样头、采样泵和流量计组成;　　采样头由滤膜夹和吸附剂套筒两部分组成,详见图1;采样头配备不同的切割器可采集TSP、PM10或颗粒物;　　滤膜夹包括滤膜固定架、滤膜、不锈钢筛网组成;滤膜固定架由金属材料制成,并能够通过一个不锈钢筛网支撑架固定玻璃纤维/石英滤膜;　　吸附剂套筒外筒由聚四氟乙烯或不锈钢材料制成,内部装有玻璃采样筒,玻璃采样筒底部由玻璃筛板或不锈钢筛网支持,玻璃采样筒内上下两层为厚度至少为1cm的PUF,中间装有高度为5cm左右的XAD-2大孔树脂;玻璃采样筒密封固定在滤膜架和抽气泵之间;采样时吸附剂套筒进气口与滤膜固定架连接,出气口与抽气泵端连接;采样后玻璃采样筒也可直接放入索氏提取器中回流提取;采样前、后将采样筒用铝箔纸包好,放于保存盒内,保证玻璃采样筒及其里面的吸附剂在采样前和采样后不受沾污;　　可设定流量不低于100L/min,采样前用标准流量计对采样流量进行校准;　　固定污染源排气采样设备　　同时采集气相和颗粒物中多环芳烃时可选用HJ/T365中推荐的仪器,其构成包括采样管、滤筒或滤膜、气相吸附单元、冷凝装置、流量计量和控制装置等部分,见图2;　　仅采集固定污染源排气颗粒物中的多环芳烃时,可以采用符合HJ/T48的烟尘采样器;　　索氏提取器：500ml、1000ml、2000ml;亦可采用其他性能相当的提取装置;　　恒温水浴：控制温度精度在±5℃;　　旋转蒸发装置,也可使用K-D浓缩器、有机样品浓缩仪等性能相当的设备;　　固相萃取净化装置;　　玻璃层析柱：长350mm,内径20mm,底部具PTFE活塞的玻璃柱;　　微量注射器：10μl、50μl、100μl、250μl;　　气密注射器：500μl、1000μl;　　容量瓶：A级,5ml、10ml、25ml、50ml;　　其他实验室常用仪器设备;　　8样品　　样品采集　　五环以上的多环芳烃主要存在于颗粒物,可用玻璃纤维石英滤膜/滤筒采集；二环、三环多环芳烃主要存在于气相,可以穿过玻璃纤维石英滤膜/滤筒,可用XAD-2树脂和聚氨酯泡沫PUF采集；四环多环芳烃在两相同时存在,必须同时用玻璃纤维石英滤膜/筒、树脂和聚氨酯泡沫采集样品;　　现场采样前要对采样器的流量进行校正,依次安装好滤膜夹、吸附剂套筒,连接于采样器,调　　节采样流量,开始采样;采样结束后打开采样头上的滤膜夹,用镊子轻轻取下滤膜,采样面向里对折,从吸附剂套筒中取出采样筒,与对折的滤膜一同用铝箔纸包好,放入原来的盒中密封;采样后进行流量校正;　　只采集固定源排气的颗粒物时,按照固定污染源排气中颗粒物测定与气态污染物采样方法GB/T16157进行采样;　　样品的保存　　样品采集后应避光于4℃以下冷藏,7日内提取完毕；或在-15℃以下保存,30日内完成提取;　　试样的制备　　将滤膜或滤筒和玻璃采样筒直接放在索氏提取器中如果玻璃采样筒内的树脂和PUF转移到索氏提取器中,用一定量乙醚/正己烷提取液冲洗玻璃采样筒,冲洗液转移到提取器中,于树脂上添加100μ　　注4：只要能达到本标准规定质量控制要求,亦可采用其他样品提取方式;自动索氏提取采用上述提取液提取40个循环；快速溶剂萃取参考条件：温度100℃,压力1500~2000Psi,静态萃取时间5min,淋洗体积60%池体积,氮气吹扫60s,静态萃取次数2次;　　提取液转移入浓缩瓶中,温度控制在45℃以下浓缩至以下,加入5-10ml正己烷,继续浓缩,将溶剂完全转为正己烷,浓缩至以下;如不需净化,加入μl内标,定容至,转移到样品瓶中待分析;制备的样品在4℃以下冷藏保存,30日内完成分析;μ℃以下冷藏保存,30日内完成分析;μl内标,定容至,转移到样品瓶中待分析;制备的样品在4℃以下冷藏保存,30日内完成分析;　　注5：净化过程中柱内液体不能流干;　　注6：只要能达到本标准规定质量控制要求,亦可采用其他样品净化方式;　　全程序空白和运输空白　　每采集一批样品,至少保证一个运输空白和全程序空白;　　9分析步骤　　仪器的参考条件　　离子源：EI源；离子源温度：230℃；离子化能量：70eV；扫描方式：全扫描或选择离子扫描SIM;扫描范围：m/z35～500amu；溶剂延迟：；电子倍增电压：与调谐电压一致；传输线温度：280℃;其余参数参照仪器使用说明 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 进行设定;　　在每天分析之前,GC/MS系统必须进行仪器性能检查;进1μLDFTPP溶液,GC/MS系统得到的DFTPP关键离子丰度应满足附表的规定标准,否则需对质谱仪的一些参数进行调整或清洗离子源;　　化合物的定性定量方法　　以全扫描或选择离子方式采集数据,以样品中相对保留时间RRT、辅助定性离子和目标离子峰面积比Q与标准溶液中的变化范围来定性;样品中目标化合物的相对保留时间与校准曲线该化合物的相对保留时间的差值应在±内;样品中目标化合物的辅助定性离子和定量离子峰面积比Q样品与标准曲线目标化合物的辅助定性离子和定量离子峰面积比Q标准相对偏差控制在±30%以内;　　按公式1计算相对保留时间RRT　　按条件进行分析,得到多环芳烃的质量色谱图,根据定量离子的峰面积,采用内标法定量;多环芳烃的标准谱图见图3,定量离子、各目标化合物的内标见附表;　　标准曲线的绘制　　在6个2ml棕色样品瓶中,依次加入980μl、950μl、900μl、800μl、600μl、500μl正己烷,再依次加入20μl、50μl、100μl、200μl、500μμ　　按条件进行分析,得到不同浓度的多环芳烃标准溶液的质量色谱图,按公式3、4计算不同浓度的待测物定量离子的相对响应因子及平均相对响应因子,并计算相对标准偏差,如果各浓度化合物相对响应因子的相对标准偏差不大于30%,利用平均相对响应因子进行结果计算;相对响应因子RRFi按公式3计算：　　每个工作日应测定曲线中间点溶液,来检验标准曲线;　　样品的测定　　标准曲线绘制完毕或曲线核查完成后,将处理好的并放至室温的样品注入气相色谱-质谱仪,按照仪器参考条件进行样品测定;根据目标化合物和内标定量离子的峰面积计算样品中目标化合物的浓度;　　当样品浓度超出标准曲线的线性范围时,将样品稀释至校准曲线线性范围内,适当补加内标量保持与标准曲线一致,再进行测定;　　空白试验　　在分析样品的同时,应作空白试验,按与样品测定相同步骤分析,检查分析过程中是否有污染;　　10结果计算与表示　　结果计算　　样品中目标化合物的质量浓度ρ按公式5计算;　　结果表示　　当环境空气样品大于等于μg/m3时,结果保留三位有效数字；小于μg/m3时,结果保留至小数点后四位;　　当固定源废气样品大于等于μg/m3时,结果保留三位有效数字；小于μg/m3时,结果保留至小数点二位;　　11精密度和准确度　　精密度　　六个实验室对含多环芳烃含量为μg和μg的统一样品进行了测定：实验室内相对标准偏差分别为：%～%,%～%；实验室间相对标准偏差分别为：%～%,%～10%；重复性限为：～μg,～μg；再现性限为：～μg,～μg;六个实验室重复测定含量为~μg的统一实际样品,实验室内相对标准偏差范围为%~13%,实验室间相对标准偏差范围为%~20%;重复性限范围为~μg；再现性限范围为~μg;　　精密度数据详见附表;　　准确度　　六个实验室用统一样品加标2μg,经过净化、浓缩、分析过程的加标回收率为%~124%;　　准确度数据详见附表;　　12质量控制和质量保证　　仪器的性能检查　　采样效率的评价及要求　　实验室第一次使用本方法或如果环境空气采样时间超过体积350m3,采样前要测定采样效率ES,或利用动态保留效率Er评价采样效率;采样效率和动态保留效率一般在75%~125%除了萘、苊烯,效率更低,至少应达到50~150%;动态保留效率一般等于或低于采样效率;　　采样过程替代物　　空白　　分析内标　　标准曲线核查的内标与曲线中间点的内标比较,样品的内标与同批标准曲线核查的内标比较,保留时间变化不超过10s,峰面积变化-50%~100%；　　分析替代物的控制范围　　经过提取、净化、浓缩、分析过程,2-氟联苯和对三联苯-d14回收率控制范围分别为55~125%和70~130%;　　空白加标　　空白加标的回收率一般控制在75%~125%萘、苊烯除外,但不得超出50%~150%范围;　　平行测定：10%的样品进行GC/MS重复分析,其相对偏差小于25%;　　13废物的处理　　实验室应遵守各级管理部门的废物管理法律规定,避免废物排放对周边环境的污染;含多环芳烃的废液统一收集,送交有资质单位进行处理;