结直肠癌异时性肝转移的分子标志物:miR-181a及其生物学功能研究背景microRNA的概念及其作用机制研究背景miRNA对肿瘤的发生发展起着重要的作用miRNA在不同肿瘤组织中具有特征性表达模式miRNA与肿瘤的生物学行为密切相关可用于诊断CLL、乳腺癌和软组织肉瘤等肿瘤miRNA与结直肠癌(CRC)肝转移的关系?实验目的筛选可能有助于预测CRC肝转移的miRNAsCRC肝转移相关的miRNAs功能研究实验方案体外培养病毒感染基因增强表达效率测定比较转染前后生物学性状的改变低转移潜能CRC细胞系HT29接种裸鼠移殖瘤裸鼠局部成瘤能力浸润能力生长增殖裸鼠局部瘤的转移潜能携带miRNA前体的慢病毒表达载体实验结果完成miRNA芯片检测无肝转移的CRC组织:5例伴有同时性肝转移的CRC组织:5例筛选出7个在两组间差异表达倍数大于1.7倍的miRNAsmiR-181a,152,320aLet-7d,miR-15b,20b,223实验结果构建组织芯片同时性肝转移的CRC原发灶:n=160异时性肝转移的CRC原发灶:n=37无肝转移的CRC原发灶:n=97远癌正常CRC粘膜:n=72原位杂交Dig标记的LNA探针实验结果Figure1.miRNAdetectionincolorectalcancertissuesbyLNA-ISH.表1.miRNAs在CRC组织中的表达情况Figure3.TheexpressionofreportergeneGFPinHT29celllineFigure5.miR-181aenhancetheproliferationofHT29cellFigure6.miR-181aenhancethemigrationofHT29cellinvitroFigure8.InvivotumorgrowthinNOD-SCIDmiceFigure9.Xenografttumorsinthreegroups结论miR-181a对预测CRC异时性肝转移可能具有重要的意义miR-181a高表达是预后不良的分子标志物miR-181a促进HT29细胞的生长,迁移和浸润对miR-181a功能的后续研究可能有助于阐明CRC异时性肝转移的调控机理
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