恒磁场对金属离子钴铬作用下人单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响66

恒磁场对金属离子钴铬作用下人单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响66 作者:戴闽，熊建卫，詹 平，漆启华，郝亮 【摘要】 [目的]探讨恒磁场对金属离子钴、铬作用下人外周血单核 细胞分泌肿瘤坏死因子的影响，寻找防治假体周围骨溶解的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 。[方 法]将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和 CrCl3溶液，从健康人外周血提取单核细胞，将金属离子Co2+、Cr3+分 别与人单核细胞在不同的磁场强度(1 mT、10 mT、100 mT)下共培养。 实验分9组:单核细胞组(对照组)、Co2+、Cr3+组、Co2+、Cr3+分别+ 不同磁场强度(1 mT、10 mT、100 mT)组，各组细胞于培养12、24、48 h取细胞上清液，用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)的含 量，以吸光度(A值)的高低来反映标本中肿瘤坏死因子α含量的多少。 [结果]Co2+、Cr3+均能刺激人单核细胞释放TNF-α(P< 0. 05)，且以 24 h释放最为明显。经磁场暴露12 h之后，1 mT、10 mT、100 mT磁 场处理组TNF-α量均低于非磁场处理组(P< 0. 05)，并呈现强度依赖 性。[结论]一定强度的恒磁场可拮抗金属离子钴、铬刺激人外周血单核 细胞分泌TNF-α，为磁场疗法防治假体周围骨溶解提供了理论依据。 【关键词】 恒磁场; 肿瘤坏死因子; 金属离子; 无菌性松动 Abstract: [Objective]To detect the effect of constant magnetic field on metal ion Co2+,Cr3+ induced TNF-α secreted by human mononuclear cells, and to search a method for prevention and treatment of aseptic loosening. [Methods]CoCl2 powder and CrCl3 powder were dissolved in the asepsis injecting water. Mononuclear cells from human peripheral blood, were taken and cultured with Co2+,Cr3+ ions in different magnetic field of 10Gs,100 Gs,1000Gs for 12,24 and 48 hs. There were nine groups: control group,Co2+ group,Cr3+ group,Co2+andCr3+ with various intensities of constant magnetic field,respectively.ELISA method was applied to detect tumor necrosis factor (TNF-α) in serum via the absorbance (A).[Results]Co2+ and Cr3+ ions stimulated human mononuclear cell to secrete TNF-α (P<0. 05). TNF-α content was obviously higher at 24 h.After the magnetic exposure time extended to 12 h, TNF-α value obviously decreased (P<0. 05) as compared with non-magnetic group,and it was positively related to the Aintensities of constant magnetic field.[Conclusion]Within a certain range of magnetic intensity , constant magnetic fields inhibit human mononuclear cell stimulated by Co2+andCr3+ ions to secrete TNF-α.It provides a theoretical basis for the prevention and treatment of aseptic loosening. Key words:constant magnetic field; tumor necrosis factor; metal ion; aseptic loosening 人工关节置换术是 治疗 骨关节疾患的有效方法之一。但随着人工关节使用年限的延长，人工关节无菌性松动这一问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 逐渐凸现出来，磨损产物导致的骨溶解是人工关节中晚期失败的主要原因。目前研究认为，人工关节磨损产物能刺激单核巨噬细胞释放肿瘤坏死因子、白细胞介素1、白细胞介素6等炎症介质，这些溶骨性因子能诱使破骨细胞的成熟、活化，产生骨溶解，最终导致人工关节无菌性松动。其中TNF-α能够通过多种途径参与破骨细胞的分化及生物活性的调控，在骨溶解这一病理过程中扮演了非常重要的角色。 磁场是骨科领域治疗骨不连、促进骨愈合的重要生物物理手段，对骨代谢、骨重建具有重要调节作用，并且磁场具有无创性、无副作用和无药物之间相互作用等优点，具有广阔的临床应用前景[1]。同时，有研究报道磁场具有抗炎抗氧化作用，它能通过抑制炎性细胞因子如TNF-α、IL-1β等的产生，从而缓解大量TNF-α堆积造成的炎症反应及病理损伤，达到治疗疾病的目的[2]。恒磁场是否对磨损产物诱导的炎症因子的产生具有影响，目前国内外尚未见报道，本实验以金属离子刺激单核细胞为模型，观察不同强度恒磁场对其分泌TNF-α的影响，以期为预防和治疗无菌性松动提供一种新的方法。 1 材料与方法 1.1 恒磁场的 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 实验中采用的恒定磁场为稀土钕铁硼永磁体，由深圳市怡天磁性材料有限公司加工设计，由两块钕铁硼磁体制成为15 cm×10 cm×3 cm长方体，4周用软铁进行磁屏蔽，充磁后使之空间磁场强度分别恒为1、10、100 mT，细胞培养时培养板可以直接置于磁体中一同放入培养箱中。 1.2 主要试剂及仪器 CoCl2粉末与CrCl3粉末(均购于南康化学仪器公司)，环氧乙烷消毒后溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液，使用前内毒素鳌试剂检测均证实无内毒素，肿瘤坏死因子ELISA试剂盒(晶美生物公司)，小牛血清(特级，杭州四季青)，酶标 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 仪RT-2 100 C(深圳雷杜公司)。 1.3 单核/巨噬细胞的提取与培养 从12名健康志愿者分别抽取50 ml外周血，用Lymphoflot和Percoll梯度离心获得外周血中的单核细胞，细胞记数。将细胞在35 mm培养皿中培养(培养液:RPMI 1 640+体积分数10%胎牛血清+质量分数1%青霉素、链霉素+2 mmol/L左旋谷氨酰胺)，4×106个/孔。在温 度37?，体积分数5%二氧化碳的培养箱中培养30 min，使细胞贴壁，在显微镜下观察，见细胞的贴壁率98%，洗去未贴壁的细胞，重新加入培养液后将细胞置入培养箱中培养过夜使其分化。 1.4 金属离子与单核细胞在不同磁场强度下共培养 在加入金属离子前，酞酚蓝检测培养皿中单核细胞活性>98%。在单核细胞悬液中分别加入CoCl2 溶液使其终末溶度为10-5、加入CrCl3溶液使其终末溶度为5×10-4。本实验将钴、铬离子与单核细胞共作用后进行不同磁场强度恒磁场的加载处理，设单核细胞培养组(对照组)、Co2+、Cr3+组和Co2+、Cr3+分别+1、10、100 mT组，分别于作用12、24、48 h取细胞培养上清液，用ELISA 试剂盒检测TNF-α含量。 1.5 统计学分析 实验所得数据采用SPSS 13.0软件中的单因素多组资料的方差分析，数据用x-?s 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示，用F检验(方差不齐时采用F′验)，P< 0. 05为差异有显著性意义。 2 结果 2.1 Co2+刺激下各组单核细胞(PBMC)分泌肿瘤坏死因子结果见表1 表1 Co2+刺激下各组肿瘤坏死因子分泌结果 ELISIA测得的OD值与标本中TNF-α的含量呈正比，因此以所测的OD值的高低来反映标本中TNF-α含量的多少。如表1中示钴离子与单核细胞共培养12、24、48 h后，测得TNF-α含量均高于对照组(P< 0. 05)，且24 h实验组作用最为明显。由图1可见，与钴离子组比较，各磁场组在加载12 h后，结果显示各磁场组对TNF-α分泌的抑制作用不明显(P>0. 05)，经磁场作用24、48 h后，1、10、100 mT磁场处理组TNF-α量均低于钴离子组，与钴离子组比较，差别有统计学意义(P< 0. 05)，并呈现强度依赖性。